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泰山白首乌规范化种植与品质评价研究

作　者: 张宁
导　师: 徐凌川
学　校: 山东中医药大学
专　业: 生药学
关键词: 泰山白首乌 规范化种植 品质评价 内转录间隔序列 质量标准
分类号: S567.239
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 64次
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内容摘要


目的：对泰山白首乌人工栽培技术及其药材的外观性状和内在质量进行了系统研究,为泰山白首乌药材质量标准的制定和今后的资源开发利用提供实验数据和科学依据。方法：1、采用分子生物学方法对4个不同来源的白首乌基因组总DNA进行提取,使用特定的引物进行扩增,对扩增产物进行纯化、克隆、测序,使用NCBI的Blast软件,分析不同种的白首乌rDNA-ITS序列。2、按照国家现行的中药材生产质量管理规范(GAP)指导原则,对泰山白首乌的产地自然条件、栽培技术、产地加工、药材性状和内在质量等进行试验研究。3、在药材质量方面,参照《中国药典》(2005版)关于中药材质量标准的有关规定,对泰山白首乌药材的水分、总灰分和酸不溶性灰分进行检查；根据泰山白首乌已知化学成分的性质,测定了水溶性和醇溶性浸出物的含量；采用傅立叶变换红外光谱法制定泰山白首乌的红外指纹图谱。结果：1、得到了泰山白首乌内转录间隔区rDNA-ITS序列,为国内外首次报道(登录号：GU479037)与野生泰山白首乌碱基序列(登录号：GU198970)进行了比较,相似度99%,且通过DNAMAN软件分析为白首乌不同种的种间亲缘关系考察和种内鉴别提供了分子生物学依据。2、初步制定了泰山白首乌GAP种植标准操作规程(SOP修改稿)。3、分析比较了泰山白首乌外观性状和内在质量,确定了泰山白首乌药材中水分含量不得过10.00%,总灰分不得过4.00%。初步制定了水溶性浸出物含量不得少于30.00%,醇溶性浸出物含量不得少于11.00%的内在质量标准,并初步制定了泰山白首乌药材红外指纹图谱,初步制订了泰山白首乌药材质量标准。结论：1、首次采用分子生物学方法完成了泰山白首乌的种质资源鉴定,且方法简便、准确、可行。2、首次完成了泰山白首乌规范化种植技术研究内容并对SOP初稿进行了修订。3、本实验所完成的药材质量标准可以作为泰山白首乌药材饮片生产企业、保健品生产企业和药品生产企业制定本企业药材质量标准的参考依据。4、本实验为泰山白首乌资源保护和药材可持续性开发应用奠定了基础。

全文目录


提要  3-4
Abstract  4-10
引言  10-11
第一部分 文献综述  11-21
  1 白首乌的本草考证  11-12
  2 白首乌的研究进展  12-19
    2.1 植物来源  13
    2.2 生物学特性  13-15
    2.3 栽培技术  15-16
    2.4 化学成分  16-17
    2.5 药理作用  17-19
  3 小结  19-21
第二部分 种质资源鉴定-不同来源白首乌RDNA ITS序列分析  21-30
  1 材料和方法  21-24
    1.1 材料  21-22
    1.2 仪器与试剂  22
    1.3 配制实验溶液  22-23
    1.4 总DNA的提取与检测  23
    1.5 PCR扩增以及扩增产物的检测  23-24
  2 结果  24-28
    2.1 白首乌凝胶电泳检查  24-25
    2.2 白首乌ITS序列的长度分析  25
    2.3 白首乌各样品序列间的碱基差异性与遗传距离分析  25-26
    2.4 白首乌4种样品特异性鉴别位点(以ITSl的第一个位点为1)  26
    2.5 各样品的ITS序列  26-28
  3 小结  28-30
    3.1 不同来源白首乌克隆测序、比对  28-29
    3.2 ITS在白首乌类中药材鉴定、道地性药材鉴别以及遗传育种方面的意义  29-30
第三部分 泰山白首乌GAP基地环境质量和种植技术研究  30-38
  1 泰山白首乌GAP基地环境质量评价  30-33
    1.1 材料与方法  30
    1.2 评价结果  30-33
    1.3 小结  33
  2 泰山白首乌规范化种植研究  33-38
    2.1 主要内容与适用范围  33
    2.2 引用标准  33-34
    2.3 产地自然条件  34
    2.4 泰山白首乌栽培技术操作规程  34-35
    2.5 泰山白首乌的采收与加工操作规程  35-36
    2.6 泰山白首乌的包装、储藏、运输操作规程  36-38
第四部分 泰山白首乌GAP种植基地病虫害种类及无公害防治技术初探  38-43
  1 叶点霉斑病  38
  2 根腐病  38-39
  3 根结线虫病  39-40
  4 蚜虫  40
  5 红蜘蛛  40-41
  6 红脊长蝽  41
  7 蓝金花虫  41
  8 泰山白首乌果实黑点病  41-43
第五部分 白首乌的显微鉴别以及浸出物含量测定  43-51
  1 白首乌的植物形态、性状、粉末特征  43-44
  2 水分、灰分及浸出物的含量测定  44-51
第六部分 红外指纹图谱的测定  51-53
  1 仪器设备和参数设置  51
  2 样品来源和制备方法  51-52
  3 结果与讨论  52
  4 小结  52-53
第七部分 :高效液相色谱法测定泰山白首乌二苯酮含量  53-57
  1 样品、仪器与试剂  53
  2 实验方法  53-56
  3 小结  56-57
第八部分 泰山白首乌药材质量标准草案(修改稿)  57-60
第九部分 泰山白首乌规范化种植生产标准操作规程(SOP)  60-65
讨论  65-75
全文结论  75-76
参考文献  76-81
致谢  81-82
攻读学位期间发表的专利、论文、奖励  82-91

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 经济作物 > 药用作物 > 草本 > 多年生 > 其他
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