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胡桃楸树皮提取物体外抗肿瘤作用研究
作 者: 潘丽艳
导 师: 李淑红
学 校: 吉林大学
专 业: 病原生物学
关键词: 胡桃楸树皮提取物 抗肿瘤 SMMC-7721 MCF-7 A549 凋亡 端粒酶
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
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内容摘要
本项研究以人肝癌细胞株SMMC-7721、人乳腺癌细胞株MCF-7、人肺腺癌细胞株A549为靶细胞,研究胡桃楸树皮提取物(JMME)体外抗肿瘤作用及其机制。首先制备JMME,胡桃楸树皮以95%乙醇煮沸,有机溶剂萃取,取乙酸乙酯部分过柱层析硅胶,以氯仿和甲醇按4:1(体积)洗脱,将红色流分收集于旋转蒸发仪中蒸干,得到的粉末状物质留作实验用。以生长曲线法、MTT法、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳法、端粒酶PCR-ELISA等方法研究JMME对肿瘤细胞增殖抑制作用、增强淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)的抑瘤作用、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制端粒酶活性。结果表明JMME作用于三种肿瘤细胞均显示出了抑制肿瘤细胞生长的作用。对同一种肿瘤细胞,JMME浓度增加抑制率增强。LAK与JMME合用对三种肿瘤细胞的抑制作用均强于单用JMME或单用LAK组。三种肿瘤细胞经JMME作用后单位视野内细胞数量明显减少,细胞间隙增大,细胞体积明显缩小,细胞失去原有的形态,胞体皱缩变圆,出现膜发泡现象,琼脂糖凝胶电泳均出现DNA Ladder带,表明JMME可诱导肿瘤细胞凋亡。经过JMME处理后的SMMC-7721、MCF-7、A549三种肿瘤细胞株的端粒酶活性都受到了抑制,抑制率分别为42.86%、73.30%、58.78%。实验表明JMME在体外可杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长,增强LAK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的端粒酶活性。
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全文目录
内容提要 4-6 引言 6-8 实验材料 8-10 1.仪器 8 2.试剂 8-9 3.细胞株 9-10 实验方法 10-17 1.胡桃楸树皮提取物(JMME)的制备 10 2.细胞培养、传代、冻存、复苏 10-11 3.JMME 对肿瘤细胞生长曲线的影响 11 4.JMME 对肿瘤细胞细胞毒性实验 11-12 5.JMME 增强 LAK 细胞抑瘤活性 12-13 6.JMME 对肿瘤细胞凋亡的影响 13-14 7.JMME 对肿瘤细胞端粒酶活性的影响 14-16 8.统计学处理 16-17 实验结果 17-30 1.JMME 对肿瘤细胞生长曲线的影响 17-19 2.JMME 对肿瘤细胞细胞毒性实验 19-21 3.JMME 增强 LAK 的抑瘤活性 21 4.JMME 对肿瘤细胞凋亡的影响 21-28 5.JMME 对肿瘤细胞端粒酶活性的影响 28-30 讨论 30-36 1.JMME 对肿瘤细胞的生长抑制及细胞毒作用 30-31 2.JMME 增强 LAK 的抑瘤活性 31 3.JMME 诱导肿瘤细胞凋亡 31-33 4.JMME 抑制肿瘤细胞端粒酶活性 33-34 5.胡桃楸树皮化学成分与抑瘤关系的推测 34-36 结论 36-37 参考文献 37-43 中文摘要 43-47 英文摘要 47-51 致谢 51-52 导师及作者简介 52
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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