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胡桃楸树皮提取物体外抗肿瘤作用研究

作　者: 潘丽艳
导　师: 李淑红
学　校: 吉林大学
专　业: 病原生物学
关键词: 胡桃楸树皮提取物抗肿瘤 SMMC-7721 MCF-7 A549 凋亡端粒酶
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

本项研究以人肝癌细胞株SMMC-7721、人乳腺癌细胞株MCF-7、人肺腺癌细胞株A549为靶细胞,研究胡桃楸树皮提取物(JMME)体外抗肿瘤作用及其机制。首先制备JMME,胡桃楸树皮以95%乙醇煮沸,有机溶剂萃取,取乙酸乙酯部分过柱层析硅胶,以氯仿和甲醇按4:1(体积)洗脱,将红色流分收集于旋转蒸发仪中蒸干,得到的粉末状物质留作实验用。以生长曲线法、MTT法、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳法、端粒酶PCR-ELISA等方法研究JMME对肿瘤细胞增殖抑制作用、增强淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)的抑瘤作用、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制端粒酶活性。结果表明JMME作用于三种肿瘤细胞均显示出了抑制肿瘤细胞生长的作用。对同一种肿瘤细胞,JMME浓度增加抑制率增强。LAK与JMME合用对三种肿瘤细胞的抑制作用均强于单用JMME或单用LAK组。三种肿瘤细胞经JMME作用后单位视野内细胞数量明显减少,细胞间隙增大,细胞体积明显缩小,细胞失去原有的形态,胞体皱缩变圆,出现膜发泡现象,琼脂糖凝胶电泳均出现DNA Ladder带,表明JMME可诱导肿瘤细胞凋亡。经过JMME处理后的SMMC-7721、MCF-7、A549三种肿瘤细胞株的端粒酶活性都受到了抑制,抑制率分别为42.86%、73.30%、58.78%。实验表明JMME在体外可杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长,增强LAK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的端粒酶活性。

全文目录

内容提要  4-6
引言  6-8
实验材料  8-10
  1.仪器  8
  2.试剂  8-9
  3.细胞株  9-10
实验方法  10-17
  1.胡桃楸树皮提取物(JMME)的制备  10
  2.细胞培养、传代、冻存、复苏  10-11
  3.JMME 对肿瘤细胞生长曲线的影响  11
  4.JMME 对肿瘤细胞细胞毒性实验  11-12
  5.JMME 增强 LAK 细胞抑瘤活性  12-13
  6.JMME 对肿瘤细胞凋亡的影响  13-14
  7.JMME 对肿瘤细胞端粒酶活性的影响  14-16
  8.统计学处理  16-17
实验结果  17-30
  1.JMME 对肿瘤细胞生长曲线的影响  17-19
  2.JMME 对肿瘤细胞细胞毒性实验  19-21
  3.JMME 增强 LAK 的抑瘤活性  21
  4.JMME 对肿瘤细胞凋亡的影响  21-28
   5.JMME 对肿瘤细胞端粒酶活性的影响  28-30
讨论  30-36
  1.JMME 对肿瘤细胞的生长抑制及细胞毒作用  30-31
  2.JMME 增强 LAK 的抑瘤活性  31
  3.JMME 诱导肿瘤细胞凋亡  31-33
  4.JMME 抑制肿瘤细胞端粒酶活性  33-34
  5.胡桃楸树皮化学成分与抑瘤关系的推测  34-36
结论  36-37
参考文献  37-43
中文摘要  43-47
英文摘要  47-51
致谢  51-52
导师及作者简介  52

胡桃楸树皮提取物体外抗肿瘤作用研究

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