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白眉蝮蛇蛇毒中L-氨基酸氧化酶的纯化鉴定及其肺损伤的作用

作　者: 魏晓龙
导　师: 何韶衡
学　校: 汕头大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: L-氨基酸氧化酶白眉蝮蛇急性肺损伤纯化酶促动力学肝素凝胶 Q凝胶
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

背景与目的：L-氨基酸氧化酶广泛存在于蛇毒中，除外海蛇它能专一催化L-氨基酸的脱氨基作用，生成相应的α-酮酸、氨和过氧化氢。蛇毒L-氨基酸氧化酶大都含有两个相同非共价结合的辅基FAD或者FMN。FAD或者FMN辅基在pH值改变或冷融过程特别容易脱离而导致酶活性的降低甚至丧失。目前对于L-氨基酸氧化酶在蛇毒中的作用还不是很清楚，目前认为该酶有抗菌、诱导水肿、溶血、出血、抗病毒、诱导细胞凋亡等活性。白眉蝮蛇主要分布在我国东北、韩国、俄罗斯，该地区毒蛇咬伤主要是白眉蝮蛇所致。目前，从白眉蝮蛇蛇毒已经分离部分组分，如磷脂酶A₂（PLA₂）、纤溶酶。本文从该蛇毒中分离到一个L-氨基酸氧化酶并通过SDS-PAGE测定其表观分子量约为60kDa，通过高效液相色谱仪（HPLC）凝胶过滤测定其分子量为108.8kDa，提示可能为同源双亚基结构。并首次系统研究了其对各种氨基酸底物的酶促动力学及其诱导的肺损伤的作用。方法：通过Heparin-Sepharose FF及Q-Sepharose HP从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化得到一个L-氨基酸氧化酶，命名为ABU-LAO。研究了其对各种氨基酸底物的酶促动力学及不同pH条件和化合物对ABU-LAO酶活力的影响。BALB／c小鼠静脉注射50，5，0.5μg药物或生理盐水100μL，每组6只，6h或24h后取材，心脏、肝脏、脾脏、肾脏及肺脏组织脱水包埋，常规切片，HE染色。肺脏切片高倍镜视野下计算平均红细胞数（RBCs）、平均肺泡内多形核白细胞数（IAPLs）、平均肺泡隔多形核白细胞数（ASPLs）；用图像分析仪测平均肺泡面积（MACA）。统计学处理：数据分析采用SPSS 11.0软件完成。各组数掘采用非参数秩和检验方法，P＜0.05为有显着性差异。组内多个实验组与同一对照组比

全文目录

中文摘要  3-6
英文摘要  6-10
前言  10-13
材料和方法  13-24
结果  24-46
讨论  46-50
参考文献  50-54
综述  54-61
  参考文献  58-61
英文缩略语  61-63
致谢  63-64
附录  64

白眉蝮蛇蛇毒中L-氨基酸氧化酶的纯化鉴定及其肺损伤的作用

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