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目的研究不同方式的射频消融(RFA)与无水酒精(PEI)联合应用对正常兔肝脏的消融效果,并评价其安全性、有效性和实用性。材料与方法1.分组情况:采用活体新西兰大白兔正常肝脏进行研究,共24只,分为4组(每组6只),均采用CT导引下同轴穿刺技术,A组为RFA后PEI组:1cm单极射频针射频3min+局部注射PEI 1.5ml;B组为PEI后RFA组:局部注射PEI 1.5ml+局部1cm单极射频针射频3min;C组为RFA组:局部1cm单极射频针射频3min;D组为PEI组:局部注射PEI 1.5ml。2.观察指标:①术后实验动物一般情况;②分别于术前、术后1天、3天、7天抽血检查ALT、AST、Cr水平的变化情况;③各组行RFA及PEI消融术后,行肝脏增强CT扫描,观察消融灶大小、形态及消融区增强情况;④观察RFA时各组的电阻、电流大小,并统计消融体积、类圆率及单位消融体积能耗;⑤于术后7天完成上述观察指标后处死实验动物,提取消融区肝脏标本,行病理学及细胞凋亡检查。结果1.术后实验动物的一般情况四组动物术后24小时内均出现活动减少、纳差,对刺激反应差,精神萎靡,术后3天基本恢复正常。以A、B组实验兔表现明显。B、C组各有1只实验兔术后24小时内死亡,其中1只死于麻醉意外,1只死于急性肝功能衰竭,死亡兔均予及时补充。2.肝、肾功能2.1 ALT:干预前1天各组血清ALT水平分别为A=39.5±31μ/L,B=44.8±32μ/L,C=48.7±26μ/L,D=83.8±64μ/L,各组差异无统计学意义;在术后1天明显增高达到峰值,分别为A=257.1±140μ/L,B=169.5±89μ/L,C=188.7±69μ/L,D=157.8±112μ/L;术后第三天转氨酶水平开始下降,分别为A=90±30μ/L , B=147.7±91μ/L ,C=94.8±38μ/L,D=68±27μ/L;至术后7天ALT水平:A=45.5±7.2μ/L、C=48.7±19.3μ/L、D=45.3±18.2μ/L,均恢复至术前水平(P>0.05)。B组术7天血清ALT水平为127±103μ/L,和术前有显著差异(P<0.05)。术后7天血清ALT水平各组间比较有显著差异(P<0.05)。2.2 AST:干预前1天各组血清AST水平分别为A=131.2±214μ/L,B=122.5±199μ/L,C=54.8±58μ/L,D=58.7±43μ/L,差异无统计学意义;在术后1天明显增高达到峰值,分别为A=518.8±381μ/L,B=350.5±433μ/L,C=230.5±117μ/L,D=251.7±212μ/L;术后3天各组AST水平开始下降,分别为A=40±8μ/L,B=115±83μ/L,C=39±16μ/L,D=25.5±11μ/L;术后7天各组AST水平分别为A=454.8±58μ/L,B=254.3±484μ/L,C=21.5±7.4μ/L,D=21.5±7.3μ/L。除C组术后1天血清AST水平为230.5±117μ/L和术前比较有统计学意义,余各组术后不同时期与术前比较均无差异(P>0.05)。B组术后3天AST水平为115±83μ/L,显著高于其它3组(P<0.05)。2.3干预前1天各组血清Cr水平分别为A=76.1±16μmol/L,B=72.5±13μmol/L,C=110.8±58μmol/L,D=74±10.7μmol/L,组间比较无统计学差异;术后1天分别为A=63±8.3μmol/L,B=93.5±37.9μmol/L,C=113±45.4μmol/L,D=84.5±11.7μmol/L;术后3天D组血清Cr水平升高为84.5±10.6μmol/L,较术前有显著差异(P<0.05),其它3组术后3天分别为A=72.8±7.5μmol/L ,B=75.8±18.4μmol/L ,C=76.2±19.1μmol/L,术后3天各组两两比较无显著意义(P>0.05);术后7天D组血清Cr水平降低为51±8.9μmol/L,较术前有显著差异(P<0.05)。3.消融灶的大小、形态及类圆率及影像表现各组消融的长径分别为A=20.7±4.2mm,B=24.1±4.4mm,C=12.4±1.6mm,D=7.7±2.3mm;短径分别为A=18.5±2.3mm,B=21.4±4.0mm,C=11.1±1.4mm,D=5.1±1.5mm;消融体积分别为A=3130±1250mm3,B=5879±2607mm3,C=767±173 mm3,D=146±83mm3,各组差异均有统计学意义(P<0.01),在长径和短径上B组显著大于C组、D组。在高径和消融体积上,B组显著大于A组、C组、D组(P<0.01),B组产生的消融灶最接近球形,类圆率各组A=96.6±0.85%,B=98.5±0.93%,C=98.0±3.3%,D=93.0±6.3%,两两比较各组无显著差异(P>0.05)。PEI后RFA组、RFA组消融区平扫呈类圆形低密度影,RFA后PEI组、PEI组消融区平扫呈椭圆形或不规则形低密度影,不同方式PEI联合RFA产生的消融灶增强CT表现基本类似,表现为中心为无强化的坏死区,其中23例周边无环形强化带,1例出现环形均匀强化带。4.电阻、电流及单位消融体积能耗各组电阻及电流分别为A组:127.8±19.5?、0.39±0.07mA;B组:170.7±12.8?,0.29±0.05mA;C组:126.7±12.5?,0.38±0.04mA。B组的电阻显著高于A组及C组(P<0.01),B组RFA术中电流显著低于A组及C组(P<0.05);单位消融体积能耗则是A组为12.3±8.9W/cm3、B组为7.0±5.7W/cm3,显著低于C组41.6±13.4W/cm3,差异有显著统计学意义(P<0.01),单位消融体积能耗C组显著高于A组和B组。三组中电阻、电流及单位消融体积能量消耗经方差分析均有统计学意义(P<0.01)。5.大体标本及病理学观察消融区中心可见B组碳化区较A组及C组明显增大,且组织破坏更明显,D组无碳化区。各组消融灶中央呈典型的凝固性坏死,移行区内可见凋亡细胞明显增多,不同消融方式导致的坏死和凋亡形态基本相同,表现为组织、细胞结构破坏,但形态尚存,见大片细胞变形、细胞皱缩、细胞核固缩、大量坏死细胞碎片。消融区周围见纤维组织细胞增生和炎症细胞浸润。凋亡细胞为细胞核有棕黄色着染者,细胞皱缩变圆、胞质浓缩、核固缩。结论1. PEI后RFA组产生的消融体积明显大于RFA后PEI组、RFA组、PEI组的消融体积。2. PEI后RFA组单位消融体积能耗最低;PEI后RFA组产生的消融灶形态最接近球形,类圆率最高。3. PEI后RFA组、RFA组消融区平扫呈类圆形低密度影,RFA后PEI组、PEI组消融区平扫呈椭圆形或不规则形低密度影,不同方式PEI联合RFA产生的消融灶增强CT表现类似,表现为中心为无强化的坏死区,周边边缘大部分无强化带,少部分可有环形均匀强化带。4.不同方式PEI联合RFA产生的细胞坏死和凋亡形态相同,消融中心区可见典型的细胞凝固性坏死而移行区细胞凋亡则明显增多。5. PEI后RFA对于兔肝、肾功能影响小、并发症少,PEI后RFA治疗是安全、有效的。
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