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压应力对体外培养的血管平滑肌细胞增殖的影响及相关机制

作 者: 罗迪贤
导 师: 廖端芳;何淑雅
学 校: 南华大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 压应力 血管平滑肌细胞 增殖 小凹蛋白 细胞外信号调节激酶
分类号: Q813.11
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 45次
引 用: 0次
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内容摘要


目的:探讨压应力对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及其机制。 方法:原代培养大鼠主动脉VSMCs,用自行研制的压力可调细胞培养箱加压处理不同压力(0mmHg、120mmHg、180mmHg和240mmHg),得出促增殖最明显的压力120mmHg后,用120mmHg处理不同时间(0、2、4、8、12和24小时)。用MTT法和细胞记数法观察压应力对VSMCs活性和增殖的影响;用细胞流式术观测不同压力不同时间VSMCs细胞周期的分布;用免疫印迹法检测Caveolin-1的表达与ERK1/2磷酸化的情况;用免疫荧光检测p-ERK1/2的核转位情况。用ERK磷酸化抑制剂PD98059和微丝骨架蛋白破坏剂细胞松弛素D干预压应力对VSMCs增殖和ERK1/2磷酸化的影响。 结果:压应力可诱导VSMCs的增殖,促进VSMCs从G0/G1期进入S/G2/M期,下调VSMCs中Caveolin-1的表达,上调ERK的磷酸化,其中120mmHg时VSMCs增殖与ERK1/2磷酸化最明显,而随着压应力增高,增殖速度下降,到240mmHg时则没有促增殖效应。时效上,4小时后VSMCs增殖进入平台期,Caveolin-1表达达到谷值,ERK1/2磷酸化达到峰值。免疫荧光发现压应力能明显促进p-ERK1/2核转位。PD98059可显著抑制ERK1/2磷酸化和VSMCs增殖。细胞松弛素D可明显抑制ERK/1/2的磷酸化。

全文目录


一、主要英文缩略语索引  4-5
二、中文摘要  5-7
三、英文摘要  7-9
四、正文  9-37
  (一) 前言  9-12
  (二) 实验材料  12-14
  (三) 实验方法  14-17
  (四) 实验结果  17-28
  (五) 讨论  28-31
  (六) 结论  31-32
  (七) 参考文献  32-37
五、综述  37-49
六、成果目录  49-50
七、致谢  50-51
致谢  51

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中图分类: > 生物科学 > 生物工程学(生物技术) > 细胞工程 > 细胞、组织培养技术 > 细胞培养
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