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MEK抑制剂PD98059对HepG2细胞增殖及凋亡的影响
作 者: 刘勇
导 师: 阳学风
学 校: 南华大学
专 业: 消化内科学
关键词: HepG2 PD98059 细胞增殖 凋亡
分类号: R735.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
下 载: 177次
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内容摘要
目的:研究MEK选择性抑制剂对人肝癌细胞HepG2细胞增殖及凋亡的影响及其相关机制。 方法:体外培养肝癌细胞HepG2,应用MEK抑制剂PD98059处理HepG2细胞,应用MTT比色法、细胞集落形成试验观察PD98059对HepG2细胞增殖的作用,HE染色、流式细胞术观察细胞凋亡并进行细胞周期分析,细胞免疫化学技术测定Caspase-3、P53的表达、western blot蛋白印迹法测定pERK蛋白表达变化。 结果:MEK抑制剂PD98059对HepG2细胞具有明显的增殖抑制作用,且能增强5-FU对HepG2细胞的抑制作用。不同浓度的PD98059(25 umol/L、50umol/L)及联合5-FU处理HepG2细胞后,72h的抑制率分别为49.03±1.562%、71.48±1.522%、83.48±1.011%。细胞集落形成率分别为32.0±2.554%,13.4±1.778%,7.4±0.751%,明显低于对照组的49.4±6.023%。PD98059能诱导HepG2细胞凋亡,使HepG2细胞阻滞于G1/S期。细胞免疫化学结果显示:PD98059处理后的HepG2细胞Caspase-3表达增高,p53表达下降。Western—blot结果显示PD98059处理后的HepG2细胞pERK蛋白表达下降。 结论:1、MEK抑制剂PD98059能以剂量和时间依赖方式抑制肝癌细胞HepG2增殖、诱导其凋亡。2、MEK抑制剂PD98059能增强肝癌细胞HepG2对5-FU的敏感性。3、MEK抑制剂PD98059对肝癌细胞HepG2的作用可能与细胞周期阻滞于G1/S期有关,其分子机制可能与降低pERK蛋白、P53基因的表达,增强Caspase-3蛋白的表达有关。
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全文目录
1、主要英文缩略语索引 4-5 2、中文摘要 5-6 3、英文摘要 6-8 4、前言 8-9 5、实验材料 9-12 6、实验方法 12-15 7、实验结果 15-24 8、讨论 24-30 9、结论 30-31 10、参考文献 31-35 11、综述 35-49 12、发表文章 49-50 13、致谢 50
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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