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蚊抗药性相关新基因

作　者: 孙艳
导　师: 朱昌亮
学　校: 南京医科大学
专　业: 病原生物学
关键词: 淡色库蚊抗药性 NYD-OP7 克隆定量PCR 原核表达载体真核表达载体
分类号: R384.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 77次
引　用: 0次
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内容摘要

[目的] 在淡色库蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系中鉴定视蛋白基因(NYD-OP7)的表达差异,获取NYD-OP7全长序列,并构建NYD-OP7原核和真核表达载体,为进一步研究奠定基础。 [方法] 用荧光定量PCR法鉴定NYD-OP7在淡色库蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系中的表达差异。用RT-PCR法从抗性品系中扩增NYD-OP7全长序列,对NYD-OP7编码的蛋白用BlastX软件在NCBI和SwissProt数据库中进行同源性比对,用Clustalw软件进行聚类分析,用EMBL pI/Mw tool计算等电点和分子量,Signl3.0软件进行信号肽分析,ProtScale软件进行疏水性分析,PSORT Ⅱ软件进行细胞定位分析,PatSearch软件进行基序分析,SMART软件进行蛋白质结构域分析。通过基因重组方法构建NYD-OP7原核和真核表达载体。 [结果] 荧光定量PCR结果显示,NYD-OP7在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中的表达量是敏感品系的9.78倍。获得淡色库蚊NYD-OP7完整开读框序列,为1116bp,经推导编码371个氨基酸(GenBank/NCBI AY749413,2004),与淡色库蚊NYD-OP1～6基因编码的视蛋白同源性最高,为91～93%。成功构建NYD-OP7原核和真核表达载体。 [结论] NYD-OP7在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中高表达,提示NYD-OP7与淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关,值得进一步研究。

全文目录

一、摘要  3-6
  1.中文摘要  3-4
  2.英文摘要  4-6
二、正文  6-40
  1.前言  6-8
  2.材料与方法  8-20
  3.结果  20-37
  4.讨论  37-40
三、小结  40-41
四、主要参考文献  41-52
五、致谢  52-53
附  53-70
  昆虫抗药性检测的研究进展  53-68
  淡色库蚊视蛋白基因(NYD-OP7)GenBank收录证明  68-70
  论文独创性声明  70

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