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朱砂七粗多糖的提取及其生物活性研究

作　者: 崔军见
导　师: 张志琪
学　校: 陕西师范大学
专　业: 应用化学
关键词: 朱砂七多糖分离纯化体外抗氧化作用体内抗氧化作用体外抗肿瘤作用
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

朱砂七为蓼科植物（Polygonum cillinerve（Nakai）Ohwi）的块根,产于太白山区以及中西部士也区,为“太白七药”之一,始载于《图经本草》。其味苦,性凉,具有滋肝养肾、抗肿瘤、抗衰老,抗炎、抗菌、抗病毒等作用。临床上主治扁桃体炎、肠炎、胃炎、肾炎、尿路感染及跌打损伤、风湿腰痛等症。关于朱砂七化学成分的研究已有报道,但尚未见到关于朱砂七多糖的研究报道。本论文包括综述和研究报告两部分内容。第一部分:绪论从下面三方面进行了综述:1.朱砂七研究概况从朱砂七化学成分研究进展和朱砂七药理研究现状两方面对朱砂七的研究概况做了综述。2.多糖研究概况包括多糖的研究进展、多糖的来源、多糖的药理研究现状以及多糖的研究应用及发展方向四方面的内容。3.抗氧化作用研究进展抗氧化作用研究进展部分涉及自由基及其特点、氧自由基与疾病和衰老、体内抗氧化系统、评价体外抗氧化能力的自由基体系、中药的抗氧化作用与应用等几部分内容。第二部分:研究报告分为四章内容:朱砂七粗多糖的提取、分离及纯化;朱砂七多糖体外抗氧化活性研究;朱砂七粗多糖的体内抗氧化活性和朱砂七粗多糖的抗肿瘤作用。一、朱砂七粗多糖的提取、分离及纯化采用石油醚回流和无水乙醇脱脂,然后使用水提醇沉的方法提取朱砂七总多糖;用透析袋透析除去小分子化合物:采用苯酚.硫酸法测定PCCP中总糖的含量。然后经过DEAE-纤维素柱初步脱色纯化,得朱砂七粗多糖。结果表明,水提纯沉朱砂七效果良好,提取率达到5.1%;用苯酚.硫酸法测得PCCP总糖含量达到91.8%,表明PCCP中的主要成分为多糖类化合物;DEAE-纤维素柱起到初步纯化粗多糖的作用。二、朱砂七多糖体外抗氧化活性研究实验通过测定PCCP对·OH自由基、O₂^?自由基和DPPH咱由基的清除能力以及抗脂质过氧化能力,探讨其体外抗氧化活性。结果显示:PCCP的浓度在8.48 mg/mL时,对·OH、O₂^?和DPPH·的清除率分别达到了52.3%、54.7%和38.3%;PCCP的浓度在8.48 mg/mL时,对脂质过氧化的抑制率达到了62.0%;表明PCCP具有一定的体外抗氧化活性。三、朱砂七粗多糖的体内抗氧化活性实验利用环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠模型,研究了朱砂七粗多糖的体内生物活性,考察了CY小鼠模型给药后的肝、脾和胸腺指数的变化,测定了心、肝和肾匀浆的总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）、活性超氧化物歧化酶（SOD）活性以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力。结果表明,治疗组小鼠三种器官的指数以及心、肝和肾的T-AOC、CAT、SOD和GSH-Px活力均高于阴性对照组,与正常组相比也有所提高;MDA与阴性组相比有不同层度的下降,并呈现出量效关系,说明PCCP具有体内抗氧化、增强机体免疫能力的作用。四、朱砂七粗多糖的体外抗肿瘤作用选用人肝癌HepG-2细胞,经MTT染色法研究了朱砂七粗多糖的体外抗肿瘤活性,为朱砂七粗多糖开发为抗肿瘤药物积累资料。结果显示PCCP溶液浓度在92.6μg/mL、168.9μg/mL、277.78μg/mL时,对人肝癌HepG-2细胞的抑制率分别达到了37.5%、40.1%和42.6%,表明PCCP能抑制人肝癌HepG-2细胞的生长,具有一定的体外抗肿瘤活性。本文从朱砂七中提取出多糖,经过初步分离、纯化得到粗多糖,重点研究了它的抗氧化活性,对体外抗肿瘤也进行了初步研究,这些研究为朱砂七多糖的进一步研究与开发奠定了基础。

全文目录

摘要  3-5
Abstract  5-11
第1章绪论  11-25
  1.1 朱砂七化学成分的研究进展  11
  1.2 朱砂七药理研究现状  11-12
  1.3 多糖研究进展  12-14
  1.4 多糖来源  14-15
    1.4.1 植物多糖  14
    1.4.2 动物多糖  14-15
    1.4.3 藻类多糖  15
    1.4.4 微生物多糖  15
  1.5 多糖的药理研究现状  15-19
    1.5.1 抗肿瘤活性  15-16
    1.5.2 抗衰老活性  16-17
    1.5.3 降血糖活性  17
    1.5.4 降血脂活性  17-18
    1.5.5 免疫调节活性  18-19
    1.5.6 抗病毒活性  19
    1.5.7 其它  19
  1.6 多糖的研究应用及其发展方向  19-20
  1.7 自由基与疾病和衰老  20-22
    1.7.1 自由基及其特点  20-21
    1.7.2 氧自由基与疾病和衰老  21-22
  1.8 体内外抗氧化系统  22-23
    1.8.1 体内抗氧化系统  22
    1.8.2 评价体外抗氧化能力的自由基系统  22-23
  1.9 中药的抗氧化作用与应用  23-25
第2章朱砂七粗多糖的提取、分离及纯化  25-31
  2.1 材料、试剂及仪器  25-26
    2.1.1 药材与试剂  25-26
    2.1.2 仪器  26
  2.2 实验方法  26-27
    2.2.1 朱砂七多糖的提取  26
    2.2.2 多糖含量的测定:苯酚硫酸法  26-27
    2.2.3 朱砂七粗多糖的初步纯化  27
    2.2.4 脱除小分子化合物  27
  2.3 结果与讨论  27-29
    2.3.1 多糖的提取  27
    2.3.2 朱砂七多糖含量的测定  27-28
    2.3.3 朱砂七多糖的脱色  28-29
  2.4 结论  29-31
第3章朱砂七多糖体外抗氧化活性研究  31-41
  3.1 试剂和仪器  32
    3.1.1 试剂  32
    3.1.2 仪器  32
  3.2 实验方法  32-35
    3.2.1 溶液的配置  32-33
    3.2.2 PCCP对·OH的清除能力  33-34
    3.2.3 PCCP对O_2~(-·)的清除能力  34
    3.2.4 PCCP对DPPH·的清除能力  34-35
    3.2.5 对脂质过氧化抑制作用的研究  35
  3.3 实验结果  35-39
    3.3.1 PCCP对·OH的清除能力  35-36
    3.3.2 PCCP对超氧离子的清除能力  36-37
    3.3.3 PCCP对DPPH·的清除能力  37-38
    3.3.4 PCCP对脂质过氧化的抑制作用  38-39
  3.4 讨论  39-41
第4章朱砂七粗多糖的体内抗氧化活性研究  41-55
  4.1 材料、试剂及仪器  42
    4.1.1 药材与试剂  42
    4.1.2 仪器  42
  4.2 实验方法  42-46
    4.2.1 溶液的配置  42-43
    4.2.2 动物的处理与分组  43-44
    4.2.3 各种指标的测试方法  44-46
  4.3 统计方法  46
  4.4 结果与讨论  46-53
    4.4.1 小鼠注射CY和灌PCCP后的反应  46-47
    4.4.2 PCCP对模型小鼠肝指数、脾指数以及胸腺指数的影响  47-48
    4.4.3 PCCP对模型小鼠心、肝以及肾T-AOC活力的影响  48-49
    4.4.4 PCCP对模型小鼠心、肝以及肾MDA生成的影响  49-50
    4.4.5 PCCP对模型小鼠心、肝以及肾CAT活力的影响  50-51
    4.4.6 PCCP对模型小鼠心、肝以及肾SOD活力的影响  51-52
    4.4.7 PCCP对模型小鼠心、肝以及肾GSH-Px活力的影响  52-53
  4.5 结论  53-55
第5章朱砂七粗多糖的体外抗肿瘤活性研究  55-59
  5.1 实验材料  55
    5.1.1 药材与试剂  55
    5.1.2 仪器  55
  5.2 实验方法  55-56
  5.3 结果与讨论  56
  5.4 讨论  56-59
第6章结论  59-61
参考文献  61-73
致谢  73-75
攻读学位期间研究成果  75

朱砂七粗多糖的提取及其生物活性研究

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