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川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型P-选择素、中性粒细胞弹性蛋白酶表达的影响

作　者: 黎俊豪
导　师: 胡建中；吕红斌
学　校: 中南大学
专　业: 外科学
关键词: 急性脊髓损伤(ASCI) 川芎嗪(TMP) P-选择素(P-sel) 中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 34次
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内容摘要


目的:利用大鼠急性脊髓损伤模型,观察损伤段脊髓组织中P-选择素的表达和中性粒细胞弹性蛋白酶的含量,以及川芎嗪干预对损伤段脊髓组织中P-选择素的表达和中性粒细胞弹性蛋白酶含量的影响。探讨川芎嗪对急性脊髓损伤的保护作用及可能机制。材料和方法:正常成年Sprague Dawley（SD）大鼠99只,体重250～300g,随机分成三组:（1）空白组（S组,n=9）;（2）对照组（C组,n=45）;（3）治疗组（T组,n=45）。治疗组和对照组大鼠按术后动物存活的时间各分为1小时组,3小时组,6小时组,12小时组、1天组、3天组、5天组、7天组和14天组,共9个亚组,每个亚组5只大鼠。利用90只大鼠,采用改良Allen’s重物打击法制作胸10水平急性脊髓中度损伤模型。治疗组大鼠伤后30分钟后开始予川芎嗪注射液经腹腔内注射200mg/kg,每天给药一次,存活时间少于5天者用药至死,多于5天者用药5天。对照组大鼠给予等量的生理盐水经腹腔内注射,给药次数和治疗组相同。采用改良Rivilin斜板试验、BBB评分（the Basso,Beattie,Bresnahan locomotor rating scale）和联合行为评分（combined behaviour scores,CBS）对各组大鼠脊髓功能进行行为学评分。根据分组,在建模后相应时间点处死对应大鼠获取脊髓标本,每只大鼠取以损伤点为中心的长约2cm的脊髓组织。在受损段脊髓标本中心横行切开两半,一半作P-选择素的免疫组化染色,观察脊髓灰质中P-选择素阳性血管表达情况并计数;一半用酶联免疫吸附试验检测中性粒细胞弹性蛋白酶的含量。使用SPSS15.0统计分析软件对对照组和治疗组进行两独立样本t检验,分析比较两组行为学评分是否存在统计学差异,两组大鼠脊髓标本不同时间点P-选择素的表达和中性粒细胞弹性蛋白酶的含量是否有统计学差异。结果:随着时间推移,术后改良Rivlin斜板试验显示斜板临界度数均值逐渐升高,治疗组较对照组斜板临界度数高,术后7天及14天时,两组间斜板临界度数比较有统计学差异（P＜0.05）。术后BBB评分均值逐渐升高,治疗组较对照组评分值高,术后5天、7天和14天时,治疗组和对照组有统计学差异（P＜0.05）。术后CBS评分均值逐渐下降,治疗组较对照组评分值低,术后5天、7天和14天时,治疗组和对照组有统计学差异（P＜0.05）。术后1小时脊髓灰质P-选择素表达阳性血管计数开始升高,对照组和治疗组均在术后1天达到高峰。术后1天、3天、5天和7天4个时间点上,阳性血管计数,治疗组较对照组少,有统计学差异（P＜0.05）。术后1小时脊髓中性粒细胞弹性蛋白酶含量升高,术后24小时达最高;术后6小时、12小时、1天、3天和7天5个时间点上,治疗组中性粒细胞弹性蛋白酶含量少于对照组,有统计学差异（P＜0.05）。结论:川芎嗪对大鼠急性继发性损伤的脊髓有保护作用,能促进其功能恢复;川芎嗪能够抑制大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织中P-选择素的表达、减少中性粒细胞弹性蛋白酶的含量。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
第一章 前言  10-12
第二章 材料与方法  12-23
  2.1 主要设备和试剂  12-13
  2.2 大鼠分组和饲养  13-14
  2.3 大鼠急性脊髓损伤模型的制作  14
  2.4 大鼠的给药  14
  2.5 脊髓运动功能的行为学评分  14-18
  2.6 大鼠脊髓标本的获取  18
  2.7 大鼠脊髓组织行病理形态学检测  18-21
  2.8 大鼠脊髓组织行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NE含量  21-22
  2.9 统计学处理  22-23
第三章 结果  23-36
  3.1 行为学评分  23-29
  3.2 一般组织形态学检测结果(HE染色)  29-30
  3.3 P-sel的表达结果  30-33
  3.4 NE在受损脊髓组织中含量的测定  33-36
第四章 讨论  36-47
  4.1 急性脊髓损伤模型  36-37
  4.2 实验动物的给药  37-38
  4.3 行为学评分  38-39
  4.4 P-选择素和脊髓损伤  39-43
  4.5 NE和脊髓损伤  43-45
  4.6 基冈芎嗪与脊髓损伤  45-46
  4.7 展望  46-47
第五章 结论  47-48
参考文献  48-54
综述  54-66
致谢  66

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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