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青钱柳多糖对高脂血症小鼠FAS基因表达影响的研究

作　者: 陈婷婷
导　师: 王文君
学　校: 江西农业大学
专　业: 农产品加工与贮藏工程
关键词: 青钱柳多糖 高脂血症 脂肪酸合成酶(FAS) 基因多态性 基因表达 蛋白质表达
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 64次
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内容摘要


青钱柳是我国特有的珍稀植物资源,具有多种生理活性功能。本研究以青钱柳叶为原料,以实验性高脂血症小鼠为研究对象,通过建立高脂血症小鼠动物模型,采用青钱柳多糖降脂动物实验,观察青钱柳多糖对小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、FFA、LPS含量及肝脏组织病理学改变的影响,采用PCR-RFLP技术检测脂肪酸合成酶(FAS)基因多态性,RT-PCR法检测组织中FAS mRNA表达水平,VVestern-blotting法检测FAS蛋白质表达差异。得到如下结论：(1)青钱柳多糖具有显著的降血脂效果,能极显著的降低高脂血症小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平和LPS活力(P<0.01),且能极显著提高血清中HDL-C水平(P<0.01)。青钱柳多糖降脂呈现一定的量效关系,以高剂量(400 mg/kg/d)最佳。(2)青钱柳多糖对高脂血症小鼠肝脏脂肪变性有一定的改善作用,能明显减少肝细胞内脂滴空泡。(3)不同FAS基因型小鼠对其血脂水平和部分器官性状的影响均有一定的差异。FAS基因不同基因型显著影响高脂血症小鼠心重、脂肪重、脂肪重/体重(P<0.05)；不同FAS基因型小鼠心重/体重差异极显著(P<0.01)。(4)青钱柳多糖能显著抑制高脂血症小鼠部分器官组织中FAS mRNA表达水平(P<0.05)。(5)青钱柳多糖能显著抑制高脂血症小鼠肝脏组织中FAS蛋白表达水平(P<0.05)。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-9
第一章 文献综述  9-19
  1 高脂血症研究进展  9-12
    1.1 高脂血症病因  9-10
    1.2 高脂血症症状  10
    1.3 高脂血症治疗  10-12
  2 分子营养学  12-15
    2.1 分子营养学研究进展  12-13
    2.2 营养素与基因表达的相互调控  13-15
  3 脂肪酸合成酶(FAS)基因研究进展  15-16
    3.1 脂肪酸合成酶基因结构  15
    3.2 脂肪酸合成酶基因生理功能  15-16
  4 植物多糖研究进展  16-19
    4.1 植物多糖生理活性研究进展  16-17
    4.2 青钱柳多糖研究进展  17-19
第二章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂代谢的影响  19-29
  1 实验材料与仪器  19-20
    1.1 实验动物  19
    1.2 实验药物  19
    1.3 主要试剂  19-20
    1.4 主要仪器  20
  2 实验方法  20-22
    2.1 青钱柳多糖组分制备  20
    2.2 动物实验  20-21
    2.3 实验标本制备  21
    2.4 观察指标及检测方法  21-22
    2.5 统计方法  22
  3 结果与分析  22-27
    3.1 青钱柳多糖对高脂血症小鼠生长及体重变化情况影响  22-23
    3.2 青钱柳多糖对高脂血症小鼠血脂的影响  23-27
  4 讨论  27-28
  5 小结  28-29
第三章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠肝脏病理形态学的影响  29-37
  1 实验材料与仪器  29-30
    1.1 实验动物组织  29
    1.2 主要试剂  29
    1.3 主要仪器  29-30
  2 实验方法  30-31
    2.1 小鼠肝脏取材  30
    2.2 固定  30
    2.3 洗涤  30
    2.4 脱水、透明和浸蜡  30
    2.5 包埋  30
    2.6 切片  30
    2.7 贴片、展片与烤片  30-31
    2.8 染色  31
    2.9 封片  31
    2.10 Canon数码显微系统进行拍照  31
  3 结果与分析  31-36
    3.1 肉眼观察  32
    3.2 光镜结果  32-36
  4 讨论  36
  5 小结  36-37
第四章 脂肪酸合成酶(FAS)基因多态性与小鼠诱导性高脂血症敏感性的相关性分析  37-45
  1 实验材料与仪器  37
    1.1 实验动物组织  37
    1.2 主要试剂  37
    1.3 主要仪器  37
  2 实验方法  37-40
    2.1 小鼠尾组织DNA提取  37-38
    2.2 DNA浓度和纯度检测  38
    2.3 FAS基因PCR-RFLP多态性检测  38-40
    2.4 数据统计分析  40
  3 结果与分析  40-43
    3.1 基因组DNA提取  40
    3.2 FAS基因的PCR-RFLP检测  40-41
    3.3 FAS基因的多态性分析  41-43
  4 讨论  43-44
  5 小结  44-45
第五章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂肪酸合成酶(FAS)基因mRNA表达的影响  45-56
  1 实验材料与仪器  45-46
    1.1 实验动物组织  45
    1.2 主要仪器  45
    1.3 主要试剂  45-46
  2 实验方法  46-48
    2.1 缓冲液及主要试剂配制  46
    2.2 组织总RNA提取  46
    2.3 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)  46-48
    2.4 电泳  48
    2.5 统计分析  48
  3 结果与分析  48-55
    3.1 小鼠组织总RNA提取  48
    3.2 青钱柳多糖对实验性高脂血症小鼠各组织脂肪酸合成酶(FAS)mRNA表达的影响  48-55
  4 讨论  55
  5 小结  55-56
第六章 青钱柳多糖对高脂血症小鼠脂肪酸合成酶(FAS)基因蛋白质表达的影响  56-64
  1 实验材料与仪器  56-57
    1.1 实验动物组织  56
    1.2 主要仪器  56
    1.3 主要试剂  56-57
  2 实验方法  57-60
    2.1 小鼠肝脏组织,脂肪组织蛋白提取  57
    2.2 考马斯亮蓝法测蛋白含量  57-58
    2.3 蛋白样品变性  58
    2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)  58-59
    2.5 转移印迹  59
    2.6 免疫染色  59-60
    2.7 图像分析与统计  60
  3 结果与分析  60-62
    3.1 青钱柳多糖对实验性高脂血症小鼠肝脏组织中FAS基因蛋白质表达的影响  60-61
    3.2 青钱柳多糖对实验性高脂血症小鼠脂肪组织中FAS基因蛋白质表达的影响  61-62
  4 讨论  62-63
  5 小结  63-64
结论  64-66
  1 本研究初步成果  64
  2 研究不足之处  64-66
参考文献  66-71
在校期间学习成果  71-72
致谢  72

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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