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酒花多酚的提取纯化及其降脂、抗氧化作用研究

作　者: 罗正明
导　师: 杨小兰
学　校: 山西大学
专　业: 食品科学
关键词: 多酚 酒花 纯化 抗氧化 降脂
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


植物多酚是植物体内的次级代谢产物,部分多酚类化合物兼有抗氧化和降血脂作用,越来越多的研究证实多酚类物质具有多种生物学活性,对人类的健康具有积极作用。啤酒花用于啤酒酿造中的主要有效成分是酒花树脂及酒花油。超临界CO2可以实现对这些成分的有效萃取,制备的啤酒花浸膏因质量稳定,易于储存和利用率高等特点在啤酒酿造中的使用量正在逐年增加,但是酒花中含量丰富的多酚类物质由于具有一定的极性,不能被超临界CO2萃取出来。酒花中的多酚类物质被保留在超临界CO2萃取后的萃余物中,而其萃余物基本上作为废弃物,未得到有效利用。因此,本文对超临界CO2萃取酒花后的萃余物中的多酚类物质进行了研究。以超临界CO2酒花萃余物为研究对象,对废酒花中的酒花多酚进行了提取和纯化,并对酒花多酚抗氧化和降血脂生物功效进行系统的研究,为降血脂和预防动脉粥样硬化提供新药来源,可为废酒花的再利用提供理论基础。主要研究内容及结果如下(1)超临界CO2萃取制备废酒花的工艺条件：CO2流量25 L/h,萃取压力25 MPa,萃取温度50℃,分离柱压为10 MPa,分离温度60℃,萃取时间1.5 h。此条件下,酒花中94%的多酚残留在酒花萃余物中,只有4%的多酚在酒花浸膏中(2)本实验中对超声波、热回流和恒温水浴振荡三种提取方式进行了对比,提取量大小关系为：超声波>热回流>恒温振荡,所以最终采用超声波辅助提取,其工艺条件为；料液比1：20,温度60℃,提取溶剂为50%乙醇,提取时间30 min,提取两次。此条件下,酒花多酚的提取量达到43.4 mg/g废酒花。(3)采用静态吸附与解吸试验对3种树脂(SP850、HP20、HP2GML)纯化多酚粗提液进行筛选。结果筛选出SP850树脂(吸附率和解析率分别为87.4%和78.4%)为最佳分离纯化酒花多酚的树脂。SP850树脂纯化酒花多酚的工艺条件为：上样多酚粗提液浓度为7.3 mg/mL,上样体积6 BV,吸附速率为3 BV/h,采用60%的乙醇洗脱,洗脱速率为2 BV/h,洗脱体积4 BV,水洗速率2BV/h,水洗体积为选择5 BV。此条件下制备的酒花多酚纯化物多酚含量可达75.1%。(4)测定了酒花多酚纯化物中总酚含量达75.1%,原花青素含量55.18%,鉴定出10种酚类成分,其中主要成分为芦丁和金丝桃苷,其含量分别为82.10 mg/g和78.10 mg/g,分别占总酚含量的10.89%和10.36%,其次表儿茶素、紫云英苷含量也比较高,占总酚含量分别为4.96%和3.51%,其余含量较低。(5)通过高脂血症模型小鼠体内试验得出,啤酒多酚可以降低高脂血症小鼠血清中TC、TG和LDL-C含量,升高HDL-C含量,还可以降低肝脏中TC和TG的含量,说明其具有降血脂和肝脂的功效。酒花多酚还可以提高小鼠血细胞SOD活力、全血GSH-Px活力、血清CAT活力和降低血清中MDA含量,以及提高肝脏中GSH-Px、SOD、CAT活力,降低MDA含量,说明其也具有体内抗氧化生物活性,可以作为预防AS的新药来源。

全文目录


中文摘要  10-12
ABSTRACT  12-14
第一章 文献综述  14-22
  1.1 植物多酚的研究现状  14-18
    1.1.1 植物多酚简介  14
    1.1.2 植物多酚的结构和分类  14-15
    1.1.3 植物多酚的生理功能  15-17
    1.1.4 植物多酚的提取和分离纯化方法  17-18
  1.2 啤酒花概述  18-20
    1.2.1 啤酒花简介  18
    1.2.2 啤酒花的主要成分  18-20
  1.3 本课题研究目的与研究内容  20-22
    1.3.1 本课题研究目的与意义  20
    1.3.2 本课题的研究内容  20-22
第二章 废酒花多酚的提取与纯化工艺研究  22-36
  2.1 材料与仪器  22-23
    2.1.1 实验材料  22
    2.1.2 实验试剂  22
    2.1.3 实验仪器  22-23
  2.2 实验方法  23-28
    2.2.1 酒花多酚的提取与纯化工艺流程  23
    2.2.2 超临界CO_2萃余物(废酒花)的制备方法  23-24
    2.2.3 酒花多酚的提取工艺的研究  24
    2.2.4 酒花多酚的纯化工艺研究  24-27
    2.2.5 酒花多酚含量的测定方法  27-28
  2.3 结果与分析  28-35
    2.3.1 酒花多酚测定标准曲线  28
    2.3.2 超临界CO_2萃取制备废酒花  28-29
    2.3.3 酒花多酚提取工艺研究结果  29-31
    2.3.4 酒花多酚的纯化工艺研究结果  31-35
  2.4 小结  35-36
第三章 酒花多酚对实验性高脂血症小鼠降脂、抗氧化作用的研究  36-45
  3.1 材料与仪器  36-37
    3.1.1 实验材料  36
    3.1.2 实验动物  36
    3.1.3 小鼠饲料  36
    3.1.4 试剂  36
    3.1.5 实验仪器  36-37
  3.2 方法与步骤  37-39
    3.2.1 动物饲养及处理  37
    3.2.2 实验动物分组  37
    3.2.3 样品的制备  37-38
    3.2.4 肝匀浆蛋白质含量测定  38
    3.2.5 小鼠饲养过程体重变化测定  38
    3.2.6 小鼠体内血脂和肝脂指标测定  38
    3.2.7 小鼠体内抗氧化指标测定  38
    3.2.8 数据处理  38-39
  3.3 实验结果  39-43
    3.3.1 小鼠饲养期间体重变化  39
    3.3.2 酒花多酚对实验型高血脂症小鼠血脂水平的影响  39-40
    3.3.3 酒花多酚对实验型高血脂症小鼠肝脂水平的影响  40-41
    3.3.4 酒花多酚对小鼠体内血清中抗氧化酶活力和MDA含量的影响  41-42
    3.3.5 酒花多酚对小鼠肝脏中抗氧化酶活力和MDA含量的影响  42-43
  3.4 小结  43-45
第四章 酒花多酚组分分析  45-54
  4.1 材料与仪器  45
    4.1.1 实验材料  45
    4.1.2 实验试剂  45
    4.1.3 实验仪器  45
  4.2 实验方法  45-48
    4.2.1 多酚含量的测定  45-46
    4.2.2 原花青素的测定  46
    4.2.3 HPLC对酒花多酚组分的分析  46-48
  4.3 实验结果  48-52
    4.3.1 原花青素测定标准曲线  48
    4.3.2 酒花多酚组分的HPLC测定结果  48-51
    4.3.3 酒花多酚纯化物中各组分含量测定结果  51-52
  4.4 小结  52-54
参考文献  54-62
攻读学位期间取得的研究成果  62-63
致谢  63-64
个人简况及联系方式  64-66

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 制药化学工业 > 中草药制剂的生产
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