学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

甲氨蝶呤柔性纳米脂质体凝胶的构建及其治疗湿疹的临床疗效观察

作　者: 盛小茜
导　师: 姚瑶；丁劲松
学　校: 中南大学
专　业: 药剂学
关键词: 甲氨蝶呤 柔性纳米脂质体 凝胶 外用 湿疹
分类号: R94
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 66次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


一、目的甲氨蝶呤(Methotrexate, MTX)是一种叶酸类似物,可竞争性抑制二氢叶酸还原酶,使四氢叶酸产生受阻而干扰细胞DNA及RNA的合成。小剂量口服MTX无免疫抑制活性而有抗炎效应,可用于治疗特应性湿疹、老年泛发性湿疹、迟发性特异性皮炎或原发性湿疹及成人中重度湿疹等,但其明显的肝毒性严重影响了其广泛使用。考虑皮肤疾病主要是局部的炎性病变,局部给药应具有更好的应用前景。本文通过对MTX基本理化性质的研究,构建并初步评价MTX柔性纳米脂质体(Flexible Nano-liposomes,FNL)凝胶,比较其与同浓度普通凝胶在降低药物渗透量,提高皮肤滞留量方面的优势；观察MTX-FNL凝胶对临床上湿疹治疗的有效性及安全性,探索其局部外用治疗湿疹的可行性及合理的施药形式,为MTX外用治疗湿疹的开发奠定基础。研究结果也将为MTX外用治疗银屑病等其他皮肤疾病提供参考。二、方法与结果1.MTX理化性质及包封率测定方法的研究建立MTX含量的测定方法并测定25℃时,MTX在不同pH水溶液中的溶解度及油/水分配系数。结果,MTX的溶解度及油/水分配系数均受pH影响。25℃时微溶于水,略溶于pH7.4的PBS溶液中(10.856±0.127mg·ml-1),亲脂性较差,logP均小于-1.43(pH=6.8)。2. MTX-FNL的构建及表征采用逆向蒸发法制备MTX-FNL,以包封率及粒径为评价指标,通过单因素考察筛选了磷脂用量、磷脂-CH比(w/w)、膜软化剂用量、油水体积比、水化时间等处方工艺因素,通过正交设计确定处方工艺并制得粒径为212.70+3.93 nm,包封率为25.62±0.18%的MTX-FNL混悬液。该混悬液于室温及4℃放置10 d,基本稳定。3. MTX-FNL体外经皮渗透性研究建立了HPLC法测定体外经皮渗透试验中接收液及皮肤中MTX的浓度的方法,该方法专属性高,皮肤中的内源性物质不干扰测定。采用改良Franz扩散池研究了两种膜软化剂的用量对MTX-FNL在离体乳猪皮肤中的体外经皮渗透行为的影响。结果表明,Doc-Na及KG的用量对脂质体的经皮渗透行为都有明显影响,随着膜软化剂用量的增加,24 h单位面积累积渗透量(Q24)变化无显著性差异(P>0.05)24 h单位质量皮肤滞留量(Qskin)则随之增加(P>0.05)。结合处方筛选结果,当磷脂-KG比(w/w)为10：1时,脂质体包封率较高,且MTX渗透量较低,皮肤滞留量较高。故在后续的脂质体凝胶剂的构建中,选用KG(与磷脂比(w/w)为10：1)作为膜软化剂。4. MTX-FNL凝胶的构建及质量评价构建了0.25%MTX-FNL凝胶、0.0625%MTX-FNL凝胶(采用微柱离心法除去脂质体混悬液中游离药物后制备FNL凝胶)及同浓度的普通凝胶,考察其在离体乳猪皮肤中的体外经皮渗透行为。结果显示,同浓度的FNL凝胶的Q24明显较普通凝胶低(P<0.05), Qskin均高于普通凝胶,约为后者的2倍,且差异均有显著性(P<0.05)。FNL凝胶可明显减少MTX的Q24,提高Qskin,提示其可能对湿疹具有更好的治疗效果。选择0.25%MTX-FNL凝胶进行临床湿疹治疗的有效性及安全性考察。5. MTX-FNL的皮肤刺激性及初步临床疗效观察单次、多次给予0.25%MTX-FNL凝胶对家兔正常及破损皮肤均无刺激性。观察0.25%MTX-FNL凝胶与疗效确切的卤米松三氯生软膏(即新适确得软膏)治疗湿疹的有效性及安全性,结果治疗组与对照组治疗后的EASI评分及瘙痒程度评分均无显著性差异(P>0.05),表明治疗组几乎可达到与对照组相当的治疗效果,且两组在治疗期内均未观察到不良反应。但MTX-FNL是否通过滞留皮肤局部发挥药效还有待进一步证实。三、结论MTX的水溶性及经皮渗透能力较差,FNL技术可提高MTX的经皮渗透能力,同时可明显减小其渗透量,提高皮肤滞留量；单次、多次给予0.25%MTX-FNL凝胶对家兔正常及破损皮肤均无刺激性；0.25%MTX-FNL凝胶与已上市的卤米松三氯生软膏对湿疹几乎具有相当的治疗效果,且在观察期内无不良反应。但MTX-FNL在皮肤内的滞留位置和量与治疗湿疹疗效间的关系还有待进一步研究。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
目录  10-14
英文缩写词表  14-15
前言  15-19
第一章 甲氨蝶呤理化性质及包封率测定方法的研究  19-33
  1 仪器与试剂  19-20
    1.1 仪器  19
    1.2 试剂  19-20
  2 方法与结果  20-30
    2.1 分析方法的建立  20-27
      2.1.1 检测波长  20
      2.1.2 色谱条件  20
      2.1.3 样品处理  20
      2.1.4 专属性  20-21
      2.1.5 标准曲线及线性范围  21-22
      2.1.6 最低检测限及最低定量限  22
      2.1.7 定量下限  22
      2.1.8 准确度与精密度  22-25
      2.1.9 提取回收率  25-26
      2.1.10 稳定性  26
      2.1.11 FNL含量测定  26-27
    2.2 MTX的理化性质  27-28
      2.2.1 饱和溶解度  27
      2.2.2 表观油/水分配系数  27-28
    2.3 MTX-FNL包封率的测定  28-30
      2.3.1 微柱的制备  28-29
      2.3.2 洗脱曲线  29-30
      2.3.3 MTX-FNL包封率的测定  30
  3 讨论  30-32
    3.1 破乳剂的选择及用量  30
    3.2 MTX的理化性质  30-31
      3.2.1 饱和溶解度  30-31
      3.3.2 表观油水分配系数  31
    3.3 稳定性  31-32
    3.4 包封率的测定  32
  4 小结  32-33
第二章 甲氨蝶呤柔性纳米脂质体的构建及表征  33-45
  1 仪器与试剂  33-34
    1.1 仪器  33-34
    1.2 试剂  34
  2 方法与结果  34-43
    2.1 制备方法  34
      2.1.1 制备工艺  34
    2.2 处方筛选  34-41
      2.2.1 处方单因素考察  34-37
      2.2.2 工艺因素考察  37-39
      2.2.3 正交设计  39
      2.2.4 试验结果  39-41
    2.3 FNL质量评价  41-43
      2.3.1 外观  41
      2.3.2 形态  41-42
      2.3.3 平均粒径及其分布  42
      2.3.4 Zeta电位  42
      2.3.5 包封率  42
      2.3.6 载药量  42
      2.3.7 初步稳定性考察  42-43
  3 讨论  43-44
    3.1 制备方法  43
    3.2 包封率  43-44
    3.3 稳定性  44
  4 小结  44-45
第三章 甲氨蝶呤柔性纳米脂质体体外经皮渗透性研究  45-59
  1 仪器与试剂  45-46
    1.1 仪器  45
    1.2 试剂  45-46
    1.3 实验动物  46
  2 方法与结果  46-56
    2.1 体外经皮渗透方法的建立  46-52
      2.1.1 渗透屏障  46
      2.1.2 接收液  46
      2.1.3 离体乳猪皮肤的获取与处理  46
      2.1.4 接收液及皮肤中MTX浓度的测定  46-52
    2.2 体外经皮渗透性试验  52-53
      2.2.1 试验方法  52
      2.2.2 数据处理与统计  52-53
    2.3 膜软化剂的用量对MTX-FNL体外经皮渗透的影响  53-56
      2.3.1 Doc-Na  53-55
      2.3.2 KG  55-56
  3 讨论  56-58
    3.1 给药方式  56-57
    3.2 膜软化剂的作用机理  57-58
      3.2.1 DoC-Na  57
      3.2.2 KG  57-58
  4 小结  58-59
第四章 甲氨蝶呤柔性纳米脂质体凝胶的构建及质量评价  59-68
  1. 仪器与试剂  59-60
    1.1 仪器  59
    1.2 试剂  59-60
  2. 方法与结果  60-66
    2.1 处方筛选  60-61
      2.1.1 凝胶基质  60
      2.1.2 保湿剂  60-61
      2.1.3 MTX-FNL凝胶制备工艺  61
    2.2 MTX-FNL凝胶的体外经皮渗透性研究  61-63
      2.2.1 样品的制备  61-62
      2.2.2 体外经皮渗透性试验  62-63
    2.3 FNL凝胶质量评价  63-66
      2.3.1 外观  63
      2.3.2 离心稳定性  63
      2.3.3 粒径及其分布  63
      2.3.4 Zeta电位  63-64
      2.3.5 含量测定  64-65
      2.3.6 初步稳定性考察  65-66
  3 讨论  66-67
    3.1 MTX-FNL可能的体外经皮渗透机理  66
    3.2 MTX-FNL的皮肤靶向性  66-67
    3.3 MTX-FNL凝胶的载药量  67
  4 小结  67-68
第五章 甲氨蝶呤柔性纳米脂质体凝胶的皮肤刺激性及初步临床疗效观察  68-80
  1 仪器与材料  68
    1.1 仪器  68
    1.2 试剂  68
  2 方法与结果  68-78
    2.1 皮肤刺激性试验  68-71
      2.1.1 实验动物  68
      2.1.2 受试动物的处理  68-69
      2.1.3 单次给药刺激性试验  69
      2.1.4 多次给药刺激性实试验  69
      2.1.5 评价方法  69-70
      2.1.6 结果与讨论  70-71
    2.2 初步临床疗效观察  71-78
      2.2.1 资料与方法  71-73
      2.2.2 试验结果  73-78
  3 讨论  78-79
    3.1 皮肤刺激性试验  78
    3.2 初步临床药效观察  78-79
  4 小结  79-80
全文结论  80-81
参考文献  81-90
综述  90-101
  参考文献  95-101
致谢  101-102
论文发表情况  102

相似论文

  1. 钛酸盐光催化剂的制备及光催化分解水性能,O643.36
  2. 溶胶—凝胶AAO模板法制备ITO准一维纳米结构,TB383.1
  3. Bi3.25La0.75Ti3O12（BLT）纳米管/线的合成工艺研究,TB383.1
  4. 钛酸锶钡铁电薄膜的制备及电热效应,TB383.2
  5. 白骨壤果实中黄酮类化合物的提取、分离纯化及抗氧化活性研究,S793.9
  6. 凝胶注模SiC-AlN复相陶瓷的制备工艺与性能研究,TQ174.62
  7. 凝胶—发泡法制备多孔氧化铝隔热材料的研究,TQ174.1
  8. 转基因水稻对肉仔鸡饲用安全性研究,S831.5
  9. 壳聚糖基温敏性复合水凝胶的制备及性能研究,R943
  10. 双重/三重响应性复合微球的制备与性能研究,O631.3
  11. Cu、Mn、Ce改性V2O5-WO3/MOx/CC催化剂的制备及其催化脱硝性能,X701
  12. 兔肌球蛋白热诱导凝胶化学作用力与凝胶结构功能关系的研究,TS251.1
  13. 牛血浆蛋白加工特性及应用研究,TS251.1
  14. 鸡奇异变形杆菌和沙门菌16S rRNA甲基化酶基因的检测及扩散机制,S858.31
  15. 琼脂糖凝胶介质中TiO2和CaCO3仿生矿化过程的研究,O611.3
  16. 肌原纤维蛋白热诱导凝胶形成机制研究,TS251.1
  17. 转基因大豆玉米小麦信息平台建设及转基因大豆对土壤微生物的影响研究,S565.1
  18. 重组毕赤酵母遗传稳定性的研究及其表达产物猪α干扰素的分离与纯化,S828
  19. 铁、镧掺杂纳米TiO2的制备及光催化性能研究,O614.411
  20. MTX保守治疗胎盘植入乳汁及血清浓度监测,R714.22
  21. 氦氖激光治疗炎症性皮损的疗效观察,R751

中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药剂学
© 2012 www.xueweilunwen.com