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卵巢癌淋巴结定向转移与非定向转移差异性基因的分析与验证

作　者: 王菁
导　师: 黎丹戎
学　校: 广西医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 卵巢癌 淋巴结定向转移 荧光定量PCR 免疫组化 integrinα6 MKK4 TIMP3 FLICE FGF2 TRANSIN Maspin MTA1
分类号: R737.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系SKOV3及其在裸鼠体内建立的淋巴结定向高转移亚克隆SKOV3-pm,为卵巢癌转移分子机制的深入研究提供了细胞模型,本实验室已经采用功能分类基因芯片技术,筛选出与卵巢癌淋巴结定向高转移密切相关的基因,为了验证基因芯片结果的准确性,我们选取了其中的integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA、PTEN九个基因,探讨以上基因在卵巢癌不同淋巴结转移能力细胞亚系的表达,以及integrinα6蛋白在卵巢恶性肿瘤组织以及不同淋巴结转移能力细胞系表达以及临床意义。方法采用TRIZOL一步法抽提卵巢癌不同淋巴结转移能力细胞的总RNA,逆转录合成CDNA,应用RT-PCR技术检测PTEN、integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA-1九个基因在不同细胞亚系表达的灰度值,实时荧光定量PCR技术对PTEN、integrinα6、MKK4、TIMP3、FLICE、FGF2、TRANSIN、Maspin、MTA九个基因在不同细胞亚系的表达进行定量分析。选取20例临床病例,针对原发病灶、淋巴结以及不同淋巴结转移能力细胞系进行integrinα6免疫组化检测,分析其与卵巢癌淋巴结转移的关系。结果Integrinα6基因在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3细胞系中的表达呈上升趋势,但在SKOV3-PM4细胞系中的表达低于SKOV3细胞系。FLICE、FGF2、MTA1、Maspin、TRANSIN基因在SKOV3-PM细胞系中的表达均比Skov3细胞系中的表达要高,TIMP3、MKK4基因在SKOV3-PM细胞系中的表达均比Skov3细胞系中的表达要低,且MKK4基因表达量在SKOV3、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3、SKOV3-PM4细胞系呈逐渐下降趋势,PTEN基因在SKOV3表达而在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-PM4细胞系几乎不表达。integrinα6蛋白在不同淋巴结转移能力细胞中的表达与基因表达一致,并且其在卵巢癌原发病灶中的表达低于转移淋巴结。结论Integrinα6、FLICE、FGF2、MTA1、Maspin、TRANSIN表达上调和TIMP3、MKK4、PTEN表达下调与卵巢癌的淋巴结定向高转移过程密切相关,出现integrinα6在SKOV3-PM4细胞系表达的下调的现象,可能存在整合素各亚单位之间的相互调控。

全文目录


致谢  6-7
英文缩略词表  7-9
中文摘要  9-11
英文摘要  11-13
第一章、卵巢癌定向淋巴结高转移与临床研究  13-83
  一、卵巢癌淋巴结转移的研究  13-64
    1.淋巴结转移是卵巢癌的一个独立影响因素  13-15
    2.淋巴结的生理与解剖  15
    3.卵巢癌淋巴结转移的解剖学途径  15-17
    4.卵巢癌转移细胞特性的基础研究  17-18
      4.1 肿瘤细胞的运动性  17
      4.2 肿瘤细胞的粘连性  17-18
      4.3 肿瘤细胞的增殖性  18
    5.卵巢癌的淋巴结转移过程和分子机理  18-31
      5.1 卵巢癌淋巴结转移过程  18-19
      5.2 癌细胞进入淋巴结后的命运和淋巴结的反应  19
      5.3 卵巢癌细胞淋巴结转移的生物学特性  19-20
      5.4 卵巢癌淋巴结转移的分子机理  20-31
    6.卵巢恶性肿瘤淋巴结转移的临床表现及特点  31-36
      6.1 早期卵巢恶性肿瘤的淋巴转移  31-32
      6.2 作为Ⅲ期卵巢癌诊断条件的淋巴转移  32-33
      6.3 卵巢癌淋巴结转移的规律  33
      6.4 卵巢癌淋巴转移的相关因素  33-36
    7.卵巢恶性肿瘤淋巴结转移和预后  36-37
    8.卵巢癌淋巴结转移的诊断  37-50
      8.1 B超检查  38-39
      8.2 CT扫描  39-41
      8.3 MRI扫描  41-42
      8.4 PET-CT检查  42-44
      8.5 淋巴造影  44-47
      8.6 放射性免疫显像(radioimmunoimaging,R Ⅱ)  47-49
      8.7 选择性淋巴结活检及系统性淋巴结清除手术  49-50
    9.淋巴结微转移的检测与临床意义  50-52
    10.卵巢癌淋巴结转移的治疗  52-63
      10.1 淋巴结切除术的范围与方式  52-56
      10.2 药物治疗  56-59
      10.3 放射治疗  59
      10.4 生物治疗  59-63
    11.本研究的目的和意义  63-64
  参考文献  64-83
第二章、卵巢癌淋巴结定向转移与非定向转移细胞间的差异性基因  83-92
  1.本实验室已筛选出卵巢癌淋巴结转移相关基因  83-87
  2.已有卵巢癌转移相关基因的研究  87-89
    2.1 与卵巢癌转移相关的黏附分子  87
    2.2 与卵巢癌转移相关的蛋白水解酶  87-88
    2.3 趋化因子对癌细胞迁移的影响  88-89
  3、结语  89-90
  参考文献  90-92
第三章、应用Real-time-PCR技术对卵巢癌淋巴结定向高转移与非定向转移细胞系间差异性基因的验证  92-144
  一、摘要  92-95
    1、中文摘要  92-93
    2、英文摘要  93-95
  二、前言  95-96
  三、材料与方法  96-108
  四、实验结果  108-132
  五、讨论  132-139
  六、参考文献  139-144
第四章、integrin α6蛋白在卵巢恶性肿瘤组织以及不同淋巴结转移能力细胞系表达以及临床价值  144-158
  一、摘要  144-146
    1、中文摘要  144-145
    2、英文摘要  145-146
  二、前言  146-147
  三、材料与方法  147-151
  四、实验结果  151-155
  五、讨论  155-157
  六、参考文献  157-158
全文小结  158-159

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
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