溶血卵磷脂(Lysohosphatidylcholine,LPC)是卵磷脂(Phosphatidylcholine,PC)失去一个脂肪酸酰基的产物,具有独特的化学结构和生理功能,是一种优良的乳化剂。本论文以卵磷脂为原料,采用在溶剂体系(正己烷)中通过两种不同的脂肪酶(Novozym 435和Lipozyme " />

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脂肪酶催化卵磷脂醇解制备溶血卵磷脂的研究

作　者: 王梦华
导　师: 杨国龙
学　校: 河南工业大学
专　业: 粮食、油脂与植物蛋白工程
关键词: 溶血卵磷脂卵磷脂醇解脂肪酶
分类号: O643.32
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

卵磷脂的学位论文">溶血卵磷脂(Lysohosphatidylcholine,LPC)是卵磷脂(Phosphatidylcholine,PC)失去一个脂肪酸酰基的产物,具有独特的化学结构和生理功能,是一种优良的乳化剂。本论文以卵磷脂为原料,采用在溶剂体系(正己烷)中通过两种不同的脂肪酶(Novozym 435和Lipozyme RM IM)催化卵磷脂醇解的方法制备溶血卵磷脂。结果表明:反应过程中有甘油磷酸胆碱(GPC)的生成,在PC醇解反应的同时也有LPC的醇解反应的发生。另外,脂肪酶和醇的种类对PC和LPC的醇解反应均有影响。在Novozym 435催化PC醇解过程中,就PC醇解反应而言,五种醇的反应活性强弱顺序为1,2-丙二醇≈乙二醇>正丁醇>乙醇>丙三醇;对LPC醇解反应而言,五种醇的反应活性强弱顺序为1,2-丙二醇>乙二醇>正丁醇≈丙三醇>乙醇;在Lipozyme RM IM催化PC醇解过程中,就PC醇解反应而言,五种醇的反应活性强弱顺序为乙二醇>1,2-丙二醇>丙三醇>乙醇>正丁醇;对LPC的醇解反应而言,实验中各种醇的反应活性强弱顺序为乙二醇>丙三醇>1,2-丙二醇>乙醇>正丁醇。论文讨论了温度、酶用量、溶剂比(PC:正己烷,m/v)、底物比(磷脂:醇中羟基,mol/mol)等因素对Novozym 435催化卵磷脂醇解制备溶血卵磷脂的影响。在单因素实验的基础上,通过响应面实验的设计和优化,得到了Novozym 435催化卵磷脂醇解反应的最佳条件为:温度60℃,酶用量10%(以PC质量计),溶剂比1:5(PC:正己烷,m/v);底物比1:2(PC:醇中羟基,mol/mol),时间5h。在该条件下进行实验的LPC生成量为63.6%,LPC转化率为93.5%。论文对温度、酶用量、溶剂比(PC:正己烷,m/v)、底物比(PC:醇中羟基,mol/mol)等因素对Lipozyme RM IM催化卵磷脂醇解反应制备溶血卵磷脂的影响也进行了讨论。在单因素实验的基础上,得到了脂肪酶Lipozyme RM IM催化卵磷脂醇解反应可能的最佳条件为:温度55℃,酶用量15%(以PC质量计),溶剂比1:5(PC:正己烷,m/v);底物比1:3(PC:醇中羟基,mol/mol),时间24h。溶血卵磷脂粗产物通过正己烷萃取、乙醇萃取,脱溶后产品中LPC含量可达89%左右;经过A/B溶液萃取3次后,再经乙醇萃取一次,脱溶后精制产品中LPC含量为92.7%。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-11
第一章前言  11-17
  1.1 课题研究意义  11-13
  1.2 国内外研究现状  13-16
    1.2.1 磷脂酶水解制备溶血磷脂的研究现状  13-14
    1.2.2 脂肪酶水解制备溶血磷脂的研究现状  14-15
    1.2.3 脂肪酶醇解制备溶血磷脂的研究现状  15-16
  1.3 本课题的研究目的及研究内容  16-17
    1.3.1 本课题的研究目的  16
    1.3.2 本课题的研究内容  16-17
第二章醇的种类对酶促卵磷脂醇解制备溶血卵磷脂的影响  17-33
  2.1 引言  17
  2.2 实验材料与仪器  17-18
    2.2.1 实验原料及主要试剂  17-18
    2.2.2 主要实验仪器  18
  2.3 主要实验方法  18-21
    2.3.1 水分及挥发物的测定  18
    2.3.2 丙酮不溶物的测定  18
    2.3.3 乙醚不溶物的测定  18
    2.3.4 色泽的测定  18-19
    2.3.5 酸价的测定  19
    2.3.6 碘价的测定  19
    2.3.7 乙醇可溶物的测定  19
    2.3.8 乳化稳定性的测定  19
    2.3.9 10mg/m L 溶血卵磷脂溶液的制备  19
    2.3.10 高纯度蛋黄卵磷脂的制备~([46-53])  19-20
    2.3.11 蛋黄卵磷脂的脂肪酸组成分析  20
    2.3.12 脂肪酶催化蛋黄卵磷脂的醇解  20-21
    2.3.13 卵磷脂、溶血卵磷脂、甘油磷酸胆碱及其他物质含量的测定  21
  2.4 结果与讨论  21-32
    2.4.1 蛋黄卵磷脂理化指标及其主要脂肪酸组成分析  21-23
    2.4.2 脂肪酶催化卵磷脂醇解反应  23-25
    2.4.3 醇解反应体系溶剂的选择  25
    2.4.4 脂肪酶Novozym 435 催化卵磷脂的醇解  25-29
    2.4.5 脂肪酶Lipozyme RM IM 催化卵磷脂的醇解  29-32
  2.5 小结  32-33
第三章脂肪酶Novozym 435 催化卵磷脂醇解制备溶血卵磷脂  33-56
  3.1 实验材料与仪器  33
    3.1.1 实验原料及主要试剂  33
    3.1.2 主要实验仪器  33
  3.2 主要实验方法  33-34
    3.2.1 10mg/ml 溶血卵磷脂溶液的制备  33
    3.2.2 脂肪酶催化蛋黄卵磷脂醇解反应方法  33
    3.2.3 卵磷脂、溶血卵磷脂、甘油磷酸胆碱及其他物质含量的测定  33-34
  3.3 结果与讨论  34-54
    3.3.1 反应条件对醇解反应的影响  34-43
    3.3.2 实验的优化及分析~([70])  43-54
  3.4 小结  54-56
第四章 Lipozyme RM IM 催化卵磷脂醇解制备溶血卵磷脂  56-67
  4.1 实验材料与仪器  56
    4.1.1 实验原料及主要试剂  56
    4.1.2 主要实验仪器  56
  4.2 主要实验方法  56-57
    4.2.1 10mg/ml 溶血卵磷脂溶液的制备  56
    4.2.2 脂肪酶催化蛋黄卵磷脂醇解反应方法  56
    4.2.3 卵磷脂、溶血卵磷脂、甘油磷酸胆碱及其他物质含量的测定  56-57
  4.3 结果与讨论  57-65
    4.3.1 温度对醇解反应的影响  57-59
    4.3.2 加酶量对醇解反应的影响  59-61
    4.3.3 底物比对醇解反应的影响  61-63
    4.3.4 溶剂比对醇解反应的影响  63-65
  4.4 小结  65-67
第五章溶血卵磷脂的精制  67-74
  5.1 实验材料与仪器  67-68
    5.1.1 实验材料  67
    5.1.2 主要实验试剂  67
    5.1.3 主要实验仪器  67-68
  5.2 实验方法  68-69
    5.2.1 溶血卵磷脂产品的组成分析  68
    5.2.2 溶血卵磷脂粗产物的精制  68-69
  5.3 结果与讨论  69-73
    5.3.1 溶血卵磷脂粗产物分析  69-70
    5.3.2 溶血卵磷脂粗产物精制方案I 的精制效果  70-71
    5.3.3 溶血卵磷脂粗产物精制方案II 的精制效果  71-72
    5.3.4 溶血卵磷脂粗产物精制方案III 的精制效果  72-73
    5.3.5 溶血卵磷脂精制产品分析  73
  5.4 小结  73-74
第六章结论  74-76
  6.1 结论  74
  6.2 展望  74-75
  6.3 创新点  75-76
参考文献  76-80
致谢  80-81
个人简介  81

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