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河蚬多糖的分离提取及抗氧化活性研究

作　者: 王宇
导　师: 刘东红
学　校: 浙江大学
专　业: 食品安全
关键词: 河蚬多糖提取纯化单糖组成抗氧化
分类号: TS254.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

河蚬是重要的经济水产品之一,因品质优良、味道鲜美、营养丰富等特点在国内外(韩日)市场享有很高的声誉。我国河蚬养殖面积大、产量高,其开发利用具有巨大的潜力。目前,国内外学者对动物活性多糖的研究报道很多,但很少涉及河蚬多糖。本文重点对河蚬多糖的不同提取方法、单糖组成及抗氧化活性进行了初步的研究,主要研究内容和结果如下：1.研究了酶法提取河蚬多糖的较优工艺以河蚬为原料、多糖提取率为响应值,在单因素实验的基础上,通过正交试验优化工艺参数。试验结果表明,4个因素影响多糖提取率的大小顺序为：酶解温度>酶解pH>加酶量>料液比,其中,酶解温度对河蚬多糖提取率的影响程度达显著水平(p<0.05)。经优化后的河蚬多糖提取工艺参数为：料液比1:30,酶解温度55℃,加酶量1.5%,酶解pH7.5。在此条件下,河蚬多糖的提取率为4.53%。2.研究了超声辅助酶法提取河蚬多糖的较优工艺通过单因素和正交实验结果得出,超声辅助酶法提取河蚬多糖,4个因素影响多糖提取率的大小顺序为：超声时间>料液比>酶解时间>超声功率,其中,超声时间对河蚬多糖提取率的影响程度达较显著水平(p<0.1)。优化后提取工艺参数为：超声时间40min、超声功率80W、料液比1:30、酶解时间90min。在此条件下,河蚬多糖的提取率为4.86%。3.初步研究了河蚬多糖的单糖组成采用PMP柱前衍生高效液相色谱法分析酶法提取河蚬多糖CFPS1的单糖组成。分析结果显示：河蚬多糖至少由甘露糖、葡糖胺、葡糖醛酸、半乳糖胺、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖等7种单糖组成,其中以葡糖胺、葡萄糖和岩藻糖为主。4.研究了河蚬多糖的体外抗氧化性采用DPPH和ABTS两种不同的体外抗氧化体系,以抗坏血酸为对照,比较了CFPS1和CFPS2的体外抗氧化活性,两种体系测定结果基本一致,抗氧化能力强弱依次为：Vc＞CFPS2> CFPS1,河蚬多糖表现了一定的抗氧化效果,但要低于阳性对照。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
目录  8-12
第1章绪论  12-22
  1.1 动物多糖的研究进展  12-18
    1.1.1 概述  12
    1.1.2 动物多糖的提取  12-13
    1.1.3 动物多糖的分离、纯化  13-14
      1.1.3.1 除蛋白质  13-14
      1.1.3.2 脱色  14
      1.1.3.3 纯化  14
    1.1.4 动物多糖的含量测定  14-15
    1.1.5 动物多糖的分子量测定  15
    1.1.6 动物多糖的结构分析  15-16
    1.1.7 动物多糖的生物活性  16-18
      1.1.7.1 抗肿瘤、提高免疫力作用  16
      1.1.7.2 抗凝、抗血栓作用  16-17
      1.1.7.3 降血糖、降血脂作用  17
      1.1.7.4 抗氧化、抗衰老作用  17
      1.1.7.5 抗炎、抗疲劳作用  17-18
  1.2 河蚬综合开发利用及功能成分研究现状  18-20
    1.2.1 综合开发利用  18
    1.2.2 河蚬的营养功能成分及功效  18-20
      1.2.2.1 活性糖蛋白  19
      1.2.2.2 金属硫蛋白  19
      1.2.2.3 活性多糖  19-20
      1.2.2.4 脂类  20
      1.2.2.5 微量元素  20
  1.3 立题背景和意义  20-21
  1.4 本论文的主要研究内容  21-22
第二章酶法提取河蚬多糖的研究  22-31
  2.1 材料与方法  22-25
    2.1.1 材料仪器  22
    2.1.2 主要试剂  22
    2.1.3 试验方法  22-25
      2.1.3.1 最大吸收波长的确定  22-23
      2.1.3.2 吸光度范围的选择  23
      2.1.3.3 标准曲线的绘制  23-24
      2.1.3.4 河蚬多糖提取工艺流程  24
      2.1.3.5 多糖含量测定  24
      2.1.3.6 单因素实验  24
      2.1.3.7 正交实验设计  24-25
  2.2 结果与分析  25-29
    2.2.1 单因素实验结果  25-28
      2.2.1.1 料液比对河蚬多糖提取率的影响  25
      2.2.1.2 酶解时间对河蚬多糖提取率的影响  25-26
      2.2.1.3 酶解温度对河蚬多糖提取率的影响  26-27
      2.2.1.4 加酶量对河蚬多糖提取率的影响  27
      2.2.1.5 酶解pH对河蚬多糖提取率的影响  27-28
    2.2.2 正交实验结果与分析  28-29
    2.2.3 正交实验方差分析结果  29
  2.3 结论  29-31
第三章超声辅助酶法提取河蚬多糖的研究  31-37
  3.1 材料与方法  31-32
    3.1.1 材料仪器  31
    3.1.2 主要试剂  31
    3.1.3 试验方法  31-32
      3.1.3.1 标准曲线的绘制  31
      3.1.3.2 河蚬多糖提取工艺流程  31
      3.1.3.3 多糖含量测定  31-32
      3.1.3.4 单因素实验  32
      3.1.3.5 正交实验设计  32
  3.2 结果与分析  32-36
    3.2.1 单因素试验结果  32-35
      3.2.1.1 超声时间对河蚬多糖提取率的影响  32-33
      3.2.1.2 超声功率对河蚬多糖提取率的影响  33-34
      3.2.1.3 料液比对河蚬多糖提取率的影响  34
      3.2.1.4 酶解时间对河蚬多糖提取率的影响  34-35
    3.2.2 正交实验结果与分析  35-36
    3.2.3 正交实验方差分析结果  36
  3.3 结论  36-37
第四章河蚬多糖的分离纯化及其单糖组成分析  37-42
  4.1 材料与方法  37-39
    4.1.1 材料仪器  37
    4.1.2 主要试剂  37-38
    4.1.3 试验方法  38-39
      4.1.3.1 河蚬多糖的提取纯化  38
      4.1.3.2 河蚬多糖的单糖组成分析  38-39
        4.1.3.2.1 河蚬多糖的水解  38
        4.1.3.2.2 样品的衍生  38
        4.1.3.2.3 标样的配制  38
        4.1.3.2.4 色谱条件  38-39
        4.1.3.2.5 流动相  39
  4.2 结果与分析  39-41
    4.2.1 纤维素离子交换柱层析纯化结果  39
    4.2.2 混合单糖标准品的HPLC色谱  39-40
    4.2.3 河蚬多糖的HPLC色谱  40-41
  4.3 结论  41-42
第五章河蚬多糖的体外抗氧化活性研究  42-46
  5.1 材料与方法  42-44
    5.1.1 材料仪器  42
    5.1.2 主要试剂  42
    5.1.3 试验方法  42-44
      5.1.3.1 ABTS自由基清除率的测定  42-43
      5.1.3.2 DPPH自由基清除率的测定  43-44
  5.2 结果与分析  44-45
    5.2.1 河蚬多糖对ABTS~+·的清除作用  44
    5.2.2 河蚬多糖对DPPH·的清除作用  44-45
  5.3 结论  45-46
第六章总结与展望  46-48
  6.1 全文总结  46-47
  6.2 展望  47-48
参考文献  48-53
致谢  53-54
作者简介  54
攻读硕士学位期间发表论文  54

河蚬多糖的分离提取及抗氧化活性研究

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