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NKT细胞在小鼠胚胎着床期母胎免疫耐受中作用的初步研究

作　者: 刘仁平
导　师: 王晶磊
学　校: 南昌大学
专　业: 生理学
关键词: T细胞 NKT细胞 Th1/Th2 胚胎着床 子宫内膜 外周血单核细胞
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:探究着床前后母体子宫蜕膜内T淋巴细胞的变化;通过刺激NKT细胞的增殖活化,检测其分泌的细胞因子变化,分析其在母体子宫内膜免疫微环境中的调节作用,以探明NKT细胞活化与胚胎着床的关系。方法:1、用免疫组化法观察T细胞在围着床期小鼠子宫组织中的定位;2、用淋巴细胞分离液分离小鼠外周血单核淋巴细胞;3、通过腹腔注射不同浓度的抗原α-GalCer刺激NKT细胞活化,用RT-PCR法半定量检测NKT细胞活化后外周血单核细胞和子宫蜕膜组织中的IL-4,IFN-γ分泌的变化;结果:1、免疫组化结果显示在妊娠D1、D2、D3、D4天小鼠子宫内膜仅有少量CD3在T细胞膜上表达;妊娠D5天小鼠子宫内膜CD3表达量明显增多,并且达到高峰;妊娠D6天小鼠子宫内膜CD3表达量下降;2、腹腔注射不同浓度(0、10.3、20.6、41.2ug/ml)的抗原α-GalCer组中,用RT-PCR技术检测不同组别外周血单核淋巴细胞和子宫蜕膜中IFN-γ的mRNA的表达。结果显示实验组各组中IFN-γ的mRNA表达明显低于空白对照组,差异有显著性(P<0.05);而不同浓度药物的实验组间IFN-γ的mRNA表达量差异无显著性(P>0.05);3、腹腔注射不同浓度(0、10.3、20.6、41.2ug/ml)的抗原α-GalCer组中,用RT-PCR技术检测不同组别外周血单核淋巴细胞和子宫蜕膜中IL-4的mRNA的表达。结果显示在外周血单核淋巴细胞,实验组各组中IL-4的mRNA表达明显低于空白对照组,差异有显著性(P<0.05);不同浓度药物的实验组间IL-4的mRNA表达量差异无显著性(P>0.05)。而在子宫内膜,剂量为20.6ug/ml组IL-4的mRNA表达较其他组明显升高,差异有显著性(P<0.05);其他各组间无显著性差异(P>0.05);4、通过分析外周血单核细胞和子宫内膜IFN-γ/IL-4的相对光密度比值,结果显示在外周血中10.3ug/ml、41.2ug/ml组IFN-γ/IL-4较空白组和20.6ug/ml组明显降低(P<0.05),20.6ug/ml组与空白组相比,差异无显著性(P>0.05)。而在子宫内膜,10.3ug/ml、20.6ug/ml组IFN-γ/IL-4与空白组相比,明显减少,差异有显著性(P<0.05);41.2ug/ml组IFN-γ/IL-4与空白组相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:1、CD3 T细胞在小鼠胚胎植入母体过程中增多,提示CD3 T细胞可能参与胚胎着床免疫微环境的调节;2、着床期子宫内膜中活化的NKT细胞可能通过产生更多的IL-4使子宫蜕膜局部免疫反应朝体液免疫应答方向调节;3、着床期外周活化的NKT细胞使外周单核细胞中IFN-γ/IL-4向Th1漂移,而子宫内膜中活化的NKT细胞使IFN-γ/IL-4的比值向Th2漂移,有利于局部子宫内膜形成免疫耐受微环境。

全文目录


摘要  3-5
ABSTRACT  5-9
第1章 引言  9-11
第2章 材料和方法  11-16
  2.1 材料  11-13
    2.1.1 实验动物  11
    2.1.2 主要试剂和液体的配制  11-12
    2.1.3 主要仪器  12-13
  2.2 方法  13-15
    2.2.1 动物模型的制备  13
    2.2.2 免疫组化 CD3~+T 细胞在围着床期子宫组织中的表达  13
    2.2.3 RT-PCR 检测外周血、子宫内膜中 IFN-γ,IL-4 mRNA 的表达  13-15
  2.3 统计处理  15-16
第3章 结果  16-25
  3.1 围着床期小鼠子宫内膜 CD3 的表达  16-17
  3.2 NKT细胞活化后外周血和子宫蜕膜中IFN-γ的表达  17-20
  3.3 NKT 细胞活化后外周血和子宫蜕膜中 IL-4 的表达  20-22
  3.4 NKT细胞活化后外周血和子宫蜕膜中IFN-γ/IL-4 变化  22-25
第4章 讨论  25-29
  4.1 CD3~+T 细胞在围着床期母胎免疫调节中的作用  25-26
  4.2 NKT细胞在母胎免疫耐受中的作用  26-27
  4.3 Th1/Th2 免疫平衡在母胎免疫耐受中的作用  27-29
第5章 结论  29-30
致谢  30-31
参考文献  31-36
攻读学位期间研究成果  36-37
附带综述  37-43

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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