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RNA干扰STAT3基因促进人结肠癌细胞sw620凋亡及分子机制的实验研究

作　者: 施露
导　师: 张献全
学　校: 重庆医科大学
专　业: 急诊医学
关键词: STAT3 RNA干扰 shRNA sw620
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：信号转导和转录活化因子3（STAT3）是一个核转录因子，被证明是多个肿瘤致发生的相关信号通路的汇集点，对肿瘤细胞凋亡、增殖、以及肿瘤组织新生血管生成等都具有调控作用。结直肠癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，在美国40-79岁的人群中，它是第二位导致死亡的恶性肿瘤。RNA干扰（RNAi）技术是一种能特异的沉默转录后基因的机制，能有效的抑制目的mRNA的表达，从而抑药物开发和疾病治疗等研究领域。本论文将利用RNAi技术特异性抑制人结肠癌sw620细胞中STAT3基因的表达，然后对细胞水平上的抗肿瘤作用和机理进行研究。方法：将针对STAT3基因的干扰短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）克隆到pGenesil-1质粒表达载体中，命名为p-shSTAT3。P-shSTAT3质粒转染sw620细胞48h后，利用RT-PCR和Western blot技术检测STAT3基因mRNA和蛋白水平上的表达情况。利用Hochest33258染色对转染p-shSTAT3后sw620细胞的凋亡情况进行检测；利用Western blot技术对p53、Caspase3、Bax、Bcl-xL和Bcl-2等凋亡相关蛋白的表达情况进行了检测。结果：转染p-shSTAT3质粒能在细胞水平上有效抑制sw620细胞中STAT3基因在mRNA和蛋白水平上的表达。Hochest33258染色表明在sw620细胞中干扰掉STAT3基因的表达能显著诱导细胞凋亡的发生(P <0.05)，乱序对照p-shSc无明显的促凋亡作用。对作用机理进行研究后发现，在sw620细胞中干扰掉STAT3基因的表达促进了p53、Caspase3和Bax三个凋亡诱导蛋白的表达；同时抑制了凋亡抑制蛋白Bcl-xL和Bcl-2的表达。结论：利用RNA干扰技术抑制掉sw620细胞中STAT3基因的表达能有效诱导p53、Caspase3和Bax的表达；抑制Bcl-xL和Bcl-2的表达，进而产生促进sw620细胞凋亡发生的抗肿瘤作用，为结肠癌治疗提供了新的研究思路和作用靶点。

全文目录


英汉缩略语名词对照  5-6
摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-11
1 材料与方法  11-24
2 实验结果  24-27
3 讨论  27-29
全文小结  29-30
参考文献  30-32
文献综述  32-37
  参考文献  35-37
致谢  37-38
攻读硕士学位期间发表的文章  38-39

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 结肠肿瘤
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