学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

慢病毒介导RNA干扰沉默蛋白激酶Cgamma基因对大鼠吗啡耐受的影响

作　者: 刘峰
导　师: 田玉科
学　校: 华中科技大学
专　业: 麻醉学
关键词: 慢病毒载体 吗啡耐受 PKCγ RNA干扰
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 16次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的蛋白激酶Cgamma(PKCγ)是参与吗啡耐受的重要细胞内信号分子,它能激活NMDA受体和使mu受体脱敏。本实验观察大鼠鞘内注射PKCγ短发夹干扰RNA慢病毒对PKCγ和NMDA受体基因表达及对急性和慢性吗啡耐受的影响,从而探索吗啡耐受基因治疗的新策略。方法包装和浓缩PKCγ短发夹RNA干扰序列的慢病毒,并用293T细胞转染法测定慢病毒滴度。250-300g雄性Sprague-Dowley大鼠鞘内置管。12只大鼠随机分为盐水对照组和实验组,分别鞘内注射盐水10ul和PKCγRNA干扰慢病毒10ul,一周后观察不同剂量吗啡皮下注射对大鼠甩尾潜伏期(TFL)的变化,计算出最大可能效应(%MPE),评价两组吗啡镇痛效应。分别构建急性和吗啡耐受模型,通过测量大鼠TFL,计算%MPE评价PKCγ沉默对大鼠吗啡耐受的影响。通过免疫组织化学方法检测慢性吗啡耐受大鼠脊髓PKCγ和NMDA受体表达变化。结果成功包装和浓缩慢病毒,测定滴度为1.25×109/ml。在吗啡镇痛效应实验中实验组比盐水对照组%MPE差异有统计学意义(p<0.05),实验组吗啡镇痛效应增强。大鼠急性和慢性吗啡耐受模型构建稳定:在急性吗啡耐受模型中,PKCγ沉默大鼠%MPE明显增加(p<0.05);在慢性吗啡耐受模型中,PKCγ沉默大鼠%MPE明显增加(p<0.05)。免疫组织化学显色发现慢性吗啡耐大鼠脊髓PKCγ和NMDAR1受体灰度值增加(p<0.05),而PKCγ沉默大鼠脊髓PKCγ和NMDAR1受体灰度值减少(p<0.05)。结论鞘内注射PKCγ小发夹干扰RNA慢病毒能增强吗啡镇痛效应并能减轻急性和慢性吗啡耐受。

全文目录


中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
前言  8-9
材料和方法  9-15
结果  15-21
讨论  21-28
结论  28-29
参考文献  29-36
附录 攻读硕士学位期间发表的论文  36-37
PKCγ功能综述  37-46
  参考文献  42-46
致谢  46-47

相似论文

  1. 甜菜夜蛾信息素结合蛋白的表达动态及其受交配和钟基因沉默的影响,S433.4
  2. 棉铃虫NADPH-细胞色素P450还原酶基因的克隆、时空表达及RNA干扰,S435.622.3
  3. 马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因的克隆、表达分析及其dsRNA的发酵生产,S435.32
  4. 几种新型杀虫剂对马铃薯甲虫的毒力及两类靶标的分子克隆,S435.32
  5. 慢病毒载体介导的RNAi特异性沉默猪Myostatin基因的研究,S828
  6. MCFP对肝癌细胞生物行为学影响初步研究,R735.7
  7. 灰飞虱功能基因的克隆及其RNAi致死效应,S435.112.3
  8. RNA干扰抑制ERCC1对非小细胞肺癌化疗敏感性的影响（体外实验）,R734.2
  9. 短发夹RNA表达载体对2型单纯疱疹病毒UL54干扰效应的研究,R346
  10. RNA干扰抑制EphB4基因表达对胰腺癌PANC-1细胞的影响,R735.9
  11. 家蚕ovo及otu基因的研究,S881.2
  12. HBV x siRNA抑制HepG2.2.15细胞的实验研究,R512.62
  13. RNA干扰抑制硫氧还蛋白基因增强人脑胶质瘤U251对三氧化二砷敏感性的研究,R739.4
  14. 脂质体介导的VEGF-C siRNA治疗肺癌体外实验研究,R734.2
  15. 靶向Bcl-xl的RNAi对胰腺癌细胞增殖凋亡及对吉西他滨化疗敏感性影响的实验研究,R735.9
  16. 飞蝗几丁质酶基因的功能研究,S433.2
  17. B7-H3在前列腺癌中表达的临床意义及作用机制初探,R737.25
  18. 淋巴细胞来源的儿茶酚胺对T辅助细胞分化的影响,R392
  19. 缺氧条件下HIF-1α促进CD133阳性胰腺癌肿瘤干细胞增殖的研究,R735.9
  20. 绿僵菌磷酸甘露糖异构酶基因的克隆及功能分析,S476

中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
© 2012 www.xueweilunwen.com