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治伤巴布剂的镇痛作用及对大鼠背根神经节辣椒受体表达的影响

作　者: 贺渊哲
导　师: 熊辉
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 中医骨伤科学
关键词: 治伤巴布剂福尔马林炎性疼痛辣椒素受体背根神经节
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

目的：从治伤巴布剂干预大鼠炎性疼痛模型背根神经节辣椒素受体表达的角度进行深入探讨,可望阐明治伤巴布剂缓解疼痛可能的调控机制环节,并且可能提供各种炎性疼痛的新的镇痛方法及新的药物靶点。方法：选择健康成年的清洁级SD(Sprangue-Dawley系)大鼠36只,随机分为3组,即空白组(n=12)、模型组(n=12)及治疗组(n=12),空白组大鼠不予任何处理,模型组左后足底注射O.1m15%福尔马林,治疗组大鼠造模前1天于左后足外敷治伤巴布剂,后左后足底注射O.1m15%福尔马林,再一直外敷治伤巴布剂,观察造模后大鼠疼痛行为学反应,并以Dubuisson评分方法进行记录比较。各组大鼠在指定时间点在其左足踝上约0.5CM处剪下左足,去皮后取肌肉组织约50mg左右,运用酶联免疫吸附试验检测前列腺素E2,再取出L3-6节段背根神经节,运用实时荧光定量(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)检测辣椒素受体在大鼠背根神经节中的表达水平。结果：1、模型组及治疗组呈典型的双相伤害性行为反应,但治疗组大鼠疼痛反应积分低于模型组,两者比较(P<0.05),有统计学意义；2、酶联吸附免疫试验空白组与模型组比较,模型组高于空白组的,治疗组进过治疗后前列腺素E2的水平低于模型组,三组组间比较(P<0.05),有统计学意义,但三组组内三个时相点的相对表达量差异都无统计学意义；3、实时荧光定量检查结果显示模型组辣椒素受体mRNA相对表达量大于治疗组,治疗组辣椒素受体mRNA相对表达量大于空白组,三组组间比较(P<0.05),有统计学意义,三组组内三个时相点的相对表达量差异都无统计学意义；4、蛋白质印迹法灰度扫描显示模型组辣椒素受体相对表达量大于治疗组,治疗组辣椒素受体相对表达量大于空白组,三组组间比较(P<0.05),有统计学意义,三组组内三个时相点的相对表达量差异都无统计学意义。结论：治伤巴布剂能缓解大鼠炎性疼痛反应,对大鼠炎性疼痛具有一定的镇痛作用；治伤巴布剂能减轻福尔马林炎性疼痛模型大鼠局部肌肉组织中前列腺素E2的表达水平；各组大鼠背根神经节中辣椒素受体均有稳定表达,而在福尔马林炎性疼痛模型中辣椒素受体表达量明显增加,治伤巴布剂对福尔马林足底炎性疼痛大鼠模型背根神经节中辣椒素受体的表达水平有影响。

全文目录

缩写对照表  5-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
引言  11-13
第一部分材料与方法  13-24
  1. 实验材料  13-15
    1.1 实验动物  13
    1.2 药物制备  13
    1.3 主要实验仪器及实验用品  13-14
    1.4 主要实验试剂  14
    1.5 主要试剂配制  14-15
  2. 实验方法  15-18
    2.1 实验动物的分组、建立模型及药物干预  16-18
    2.2 大鼠疼痛行为的观察及评分  18
    2.3 组织标本的取材和处理  18
  3. 观察指标  18-23
    3.1 肌肉组织前列腺素E2的检测  19
    3.2 辣椒素受体蛋白翻译水平的表达的测定  19-20
    3.3 测定辣椒素受体(VR)基因转录的表达水平  20-23
  4. 统计学处理  23-24
第二部分实验结果  24-30
  1. 观察大鼠的疼痛行为和治伤巴布剂对它的治疗作用  24-25
  2. 大鼠左足肌肉组织前列腺素E2(pg/g)的检测  25
  3. 大鼠福尔马林炎性疼痛模型的背根神经节中辣椒素受体(VR)的表达变化  25-27
  4. 治伤巴布剂对大鼠福尔马林炎性疼痛模型背根神经节中辣椒素受体(VR)的影响  27-30
第三部分分析与讨论  30-38
  1. 中医学对疼痛的认识  30-31
  2. 现代医学学对疼痛的认识  31-32
  3. 中医学对疼痛的治疗  32-34
  4. 现代医学对疼痛的治疗  34-35
  5. 关于福尔马林炎性疼痛模型  35
  6. 关于前列腺素E2  35-36
  7. 实验结果的分析推理  36-38
第四部分：结论  38-39
第五部分：存在的问题及展望  39-40
致谢  40-41
参考文献  41-44
附录  44-54
  附录A：文献综述  44-54
  附录B：在读期间发表论文他参加科研工作情况  54

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