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治疗奶牛乳房炎中药灌注剂的研制及其安全性与临床疗效研究

作　者: 韩志帅
导　师: 史万玉
学　校: 河北农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 奶牛乳房炎中药灌注剂安全性疗效
分类号: S858.23
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

本试验对采自临床型乳房炎病牛的乳样进行了细菌的分离，将乳汁均匀涂布在麦康凯培养基、伊红美蓝培养基和兔鲜血培养基，选取特征性菌落镜检，然后将疑似大肠杆菌接种到伊红美蓝培养基上；将疑似金黄色葡萄球菌和无乳链球菌接种到兔鲜血平板上纯化培养；并用生化试验进行鉴定，为了确定生化试验的准确性，通过PCR方法进行验证，最终确定了3种主要病原菌（即金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌）。采用琼脂平板扩散法（打孔法），进一步研究了黄芩、益母草、山银花等15味中药对3种奶牛乳房炎主要病原菌的抑菌情况。结果发现，金黄色葡萄球菌对黄芩、地榆、薄荷、蒲公英高度敏感，对青翘、忍冬藤、当归、白头翁、白芷、苦地丁中度敏感；大肠杆菌对黄芩、青翘、蒲公英、地榆中度敏感；无乳链球菌对地榆、黄芩、白头翁、青翘、当归、蒲公英、苦地丁、白芷、忍冬藤、薄荷等中度敏感。从体外抑菌试验结果中选择抑菌效果较好的黄芩、青翘、山银花、益母草和地榆等中药，依据中兽医学“清热解毒，活血通经”的组方原则，组成了6个不同的备选中药组方。利用小鼠耳肿胀模型和醋酸所致小鼠腹腔炎症模型，研究了不同备选组方的抗炎效果。结果发现，组方二和组方三的抗炎效果最为明显。考虑到组方二中地榆在制剂过程中会形成大量沉淀，最终确定组方三为最后组方，并按照一定的工艺制成灌注剂。为了进一步评价该中药灌注剂的安全性，特进行了皮肤急性毒性试验、皮肤刺激性试验和皮肤过敏性试验研究。结果发现，本试验所研制的中药复方灌注剂，对獭兔完整皮肤和破损皮肤均没有毒性，刺激性指数＜0.5，过敏指数为0。表明该中药复方灌注剂是安全的。为了评价该中药灌注剂治疗乳房炎的临床效果，应用奶牛乳房炎病原菌建立了奶山羊临床乳房炎模型。通过对奶山羊临床乳房炎模型的治疗观察，结果发现用药5天后，奶山羊乳头肿胀度显著降低，乳汁颜色显著变浅，LMT检测体细胞数显著变少。表明该灌注剂对临床型乳房炎具有显著的疗效。血液抗氧化指标检测显示，用药后血中的SOD、GSH-Px的活性显著增强，NO、MDA含量显著降低。提示受试中药灌注剂对奶牛乳房炎的治疗作用与其增强机体的抗氧化能力，减少炎性因子的释放有关。

治疗奶牛乳房炎中药灌注剂的研制及其安全性与临床疗效研究

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