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Wnt5a基因对肝癌细胞生物学行为的影响

作　者: 毕利泉
导　师: 耿明
学　校: 泰山医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 肝细胞癌 Wnt5a Ror2 β-catenin
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 49次
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内容摘要


目的:既往研究显示,Wnt5a基因在肝细胞癌的发生发展中发挥肿瘤抑制基因样作用,为此构建Wnt5a表达载体,观察其对转染肝癌细胞生物学活性的影响,探讨Wnt5a与其下游基因之间的相互作用及作用途径。方法:1.将Wnt5a表达载体转染入人肝细胞L02和人肝癌细胞MHCC97L。2.应用RT-PCR及Western Blot检测转染前后细胞Wnt5a mRNA和蛋白的表达,明确转染体系的建立。3.应用流式细胞仪检测细胞周期,划痕试验检测细胞迁移能力的改变。4.采用RT-PCR和Western Blot检测细胞转染前后Ror2、β-catenin mRNA和蛋白表达的变化。结果:1.转染Wnt5a表达载体的L02细胞和MHCC97L细胞的S期细胞比率分别为20.09%和21.69%,而转染空载体的细胞的S期细胞比率分别为29.63%和29.03%,提示Wnt5a的表达可以抑制细胞的增殖能力。2. Wnt5a表达组较阴性对照组细胞迁移速度明显减慢,当加入Wnt5a抗体阻遏信号通路时,细胞迁移能力增强,提示Wnt5a表达具有抑制细胞迁移的能力。3. Wnt5a表达组细胞较对照组细胞Ror2 mRNA和蛋白呈上调表达,提示Wnt5a在肝细胞癌的发生发展中可能通过下游基因Ror2发挥作用。4. Wnt5a表达组细胞较阴性对照组细胞P-β-catenin蛋白呈上调表达,而β-catenin蛋白呈下调表达,提示Wnt5a可促进β-catenin降解从而发挥拮抗经典Wnt信号通路的作用。结论:1.体外L02肝细胞和MHCC97L肝癌细胞转染Wnt5a表达载体后细胞增殖能力明显受到抑制,细胞迁移能力明显减弱。2. Wnt5a表达导致Ror2、P-β-catenin蛋白上调表达和β-catenin蛋白下调表达,提示Wnt5a触发了Ror2介导的非经典Wnt信号通路从而拮抗经典的Wnt/β-catenin通路。3. Wnt5a基因通过拮抗经典的Wnt/β-catenin通路从而抑制细胞的增殖和迁移能力,在HCC中发挥肿瘤抑制基因的作用,有可能成为肝细胞癌基因治疗的新靶点。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
符号说明  8-9
前言  9-13
材料与方法  13-26
结果  26-33
讨论  33-39
结论  39-40
附图  40-47
参考文献  47-52
综述  52-61
  参考文献  57-61
致谢  61-62
攻读学位期间发表的学术论文  62

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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