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乙型肝炎病毒核心基因的PCR-RELP图案对中国肝细胞癌和肝硬化人群的临床意义

作　者: 扎那可
导　师: 胡丽华
学　校: 华中科技大学
专　业: 临床医学检验科
关键词: 乙型肝炎 PCR-RFLP图案肝细胞癌肝硬化
分类号: R735.7;R575.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

简介：乙型肝炎是一种由乙型肝炎病毒所引起的疾病。它通过感染者的血液和体液进行传播。全世界约有4亿人感染乙肝病毒，每年约150万人死亡。仅仅在中国就有1.3亿人感染乙肝病毒。中国每年约有30万人死亡，其中包括18万肝细胞癌患者。乙肝病毒DNA包含4个开放阅读框：核心，表面，x和聚合酶。核心基因编码乙型肝炎e抗原和乙型肝炎核心抗原。乙肝病毒核心基因突变和sNPs与慢性乙肝患者的肝炎活动性有关。目标：1探清肝细胞癌和肝硬化患者乙肝病毒核心区域的PcR．RFLP模式。2评价PCR-RFLP模式在肝细胞癌和肝硬化患者中的临床意义。材料与方法：从2010年1月1日到2010年11月7日共收集了320名肝细胞癌患者和130名肝硬化患者。根据统一的纳入标准选择患者。患者的年龄范围从14岁到82岁。感染艾滋病病毒、丙肝病毒或有甲状腺疾病的患者排除在外。某式PCR是用于扩增HBV-DNA。有关乙肝病毒，肝细胞癌和肝硬化的实验分析分子生物学研究：HBV DNA，PcR-RFLP模式，测序研究结果：有五个典型PcR-RFLP限制性酶裂解_rsp509I模式(c，D，E，G&c/G)被发现。RFLP图案的分布中，E-8．7%，D 2．5%是Cc-62．8%，G-13．7%和C/G mixture-12.2%在320肝细胞癌的病例中被发现；C-57%，E-11．5%G-17%，D-4.6%，和C/Gmixture-10%在130肝硬化病例中被发现。在这两种情况中，显然RFLP图案的D是最低的。PcR-RFLP模式的分布在肝细胞癌和肝硬化之间没有显著性差异。结论：RFLP C模式患者的血清AFP．HBV-DNA，血清ALT显著高于其他模式。尽管HBv DNA处于高水平，但PcR RFLP C/G模式的患者具有低水平的血清AFP和ALT。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
1 Introduction  7-24
  1.1 Chapter introduction  7-8
  1.2 Hepatitis B  8
  1.3 Hepatitis B virus structure, Mode of transmission and age, gender variation  8-11
  1.4 Clinical course of hepatitis B infection  11-14
  1.5 Epidemiology of Hepatitis B infection  14-17
  1.6 Hepatitis B virus serotypes and genotypes  17-19
  1.7 Hepatitis B virus infection and its role in Hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis  19-22
  1.8 Polymerase chain reaction, Restriction fragments Length Polymorphism (PCR- RFLP) of HBV core gene  22-24
2 Materials and methods  24-34
  2.1 Introduction  24
  2.2 Study Design  24-26
  2.3 Study population  26-27
  2.4 Clinical Data Collection  27-28
    2.4.1 Demographic Details  27-28
    2.4.2 Working Diagnosis  28
    2.4.3 History Details  28
  2.5 Sample collection and further procedures  28-31
    2.5.1 Extraction of HBV DNA  29
    2.5.2 Serology and other laboratory investigations  29
    2.5.3 Real-time quantification of serum HBV-DNA  29-30
    2.5.4 HBV Core Gene Specific PCR-RFLP  30-31
  2.6 Data Arrangement and Measurements  31-32
    2.6.1 Data Management  31-32
  2.7 Ethical Issues  32-34
    2.7.1 Ensuring confidentiality  32
    2.7.2 Ensuring consent  32
    2.7.3 Study Permissions  32-34
3 Results  34-38
  3.1 HBV Core Gene Specific PCR-RFLP Patterns  34-35
  3.2 Cleavage sites of Tsp509I on PCR-RFLP patterns  35
  3.3 Serum HBV DNA, ALT and AFP levels in different RFLP patterns  35-36
  3.4 Over all clinical data of HCC and liver cirrhosis patients  36-38
4 Discussion  38
5 Conclusion  38-39
References  39-43
Acknowledgement  43

乙型肝炎病毒核心基因的PCR-RELP图案对中国肝细胞癌和肝硬化人群的临床意义

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