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靶向siRNA阻断Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜异位症裸鼠模型异位子宫内膜VEGF和MMP-9表达及血管生成的影响

作　者: 郑婷婷
导　师: 刘义
学　校: 华中科技大学
专　业: 妇产科学
关键词: siRNA Wnt/β-catenin信号通路 VEGF MMP-9 MVD 裸鼠模型 子宫内膜异位症
分类号: R711.71
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的利用siRNA载体介导的RNA干扰技术靶向沉默β-catenin以阻断Wnt/β-catenin信号通路,观察对子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型异位子宫内膜血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达及血管生成的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路促进异位内膜组织粘附、侵袭和血管生成的作用。方法采用人子宫内膜异体移植方法构建子宫内膜异位症(内异症)裸鼠模型,将18只内异症裸鼠随机分为3组(n=6):siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,每日分别腹腔注射100μl siRNA转染复合物(含β-catenin siRNA 3 ug和转染试剂7.5 ug)、阴性对照转染复合物(含阴性对照siRNA 3ug和转染试剂7.5 ug)和空白对照组混合液(含转染试剂7.5 ug)一次,共注射5次。末次腹腔注射后24h断颈处死裸鼠,观察盆、腹腔病灶形成情况,取异位病灶标本。Real time RT-PCR和免疫组织化学检测异位内膜组织β-catenin、VEGF和MMP-9 mRNA和蛋白的表达。免疫组织化学检测裸鼠模型异位内膜组织微血管密度(microvessel density, MVD)。结果实验裸鼠共20只,18只成模成活。Real time RT-PCR结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,siRNA干扰组β-catenin、VEGF和MMP-9表达明显低于阴性对照组和空白对照组(p<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(p>0.05)。免疫组化结果显示, siRNA干扰组β-catenin、VEGF和MMP-9表达明显减弱,并低于阴性对照组和空白对照组(p<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(p>0.05)。siRNA干扰组MVD低于阴性对照组和空白对照组(p<0.05)。结论阻断Wnt/β-catenin信号通路能明显抑制子宫内膜异位症裸鼠模型异位内膜组织VEGF和MMP-9表达及血管生成。从整体水平证实Wnt/β-catenin信号通路可促进异位子宫内膜的粘附、侵袭和血管生成。

全文目录


英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-13
材料与方法  13-21
结果  21-27
讨论  27-32
结论  32-33
参考文献  33-37
综述1  37-49
  参考文献  45-49
综述2  49-56
  参考文献  54-56
附录  56-57
致谢  57

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 妇科学 > 女性生殖器其他疾病 > 子宫内膜异位症
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