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茯苓乙酸乙酯提取物抗肿瘤活性成分研究
作 者: 邬兰
导 师: 杨敏
学 校: 湖北中医药大学
专 业: 药物分析学
关键词: 茯苓 化学成分 抗肿瘤 结构鉴定 细胞凋亡
分类号: R286.0
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等,为多孔菌科(Polyporaceae)真菌茯苓的干燥菌核。我国资源丰富,主产于湖北、湖南、安徽等省,其中以湖北罗田九资河所产茯苓品质优良。茯苓为历史悠久的传统中药,其性平,味甘、淡,具有利水渗湿、健脾和胃、宁心安神的作用;临床用于小便不利,水肿,脾胃气虚,食少便溏,体倦乏力以及心神不宁,惊悸,失眠等症。其主要化学成分为多糖、三萜、脂肪酸、甾醇等。现代药理学研究表明,茯苓具有抗肿瘤、调节免疫功能、抗炎、抗衰老等药理作用。本实验室前期研究表明,茯苓乙酸乙酯提取物具有抗肿瘤生物活性。本论文通过学科交叉的研究方法,对茯苓乙酸乙酯提取物抗肿瘤活性成分进行了研究。采用色谱法对茯苓乙酸乙酯提取物进行了较系统的分离纯化,从中分离得到4个单体成分,分别为茯苓酸(Pachymic acid,B1)、去氢茯苓酸(Dehydropachymic acid,B2)、薯蓣皂苷(Dioscin,H1)、三角叶薯蓣皂苷(Deltonin,H2)。其中,化合物薯蓣皂苷(Dioscin,H1)和三角叶薯蓣皂苷(Deltonin,H2)为首次从茯苓中发现。采用MTT法检测上述分离的化合物对肝癌(HepG2)、宫颈癌(Caski)、肺癌(H460)、乳腺癌(MDA-MB-231)细胞株体外增殖的影响,并筛选出敏感的肿瘤细胞株。研究结果表明,化合物H1和H2对肝癌细胞株HepG2.宫颈癌细胞株Caski、肺癌细胞株H460、乳腺癌细胞株MDA-MB-231均有明显的抑制增殖作用,并呈剂量依赖性和时间依赖性;其中药物高浓度对肝癌细胞株HepG2、肺癌细胞株H460、乳腺癌细胞株MDA-MB-231处理48h和72h抑制率均高达90%以上,尤其是对乳腺癌细胞株MDA-MB-231更为明显。比较半数抑制浓度可知,经化合物H1和H2处理乳腺癌细胞(MDA-MB-231)24h、48h、72h的IC50分别为6.17μg/ml、1.82μg/ml、1.45μg/ml和1.73μg/ml、0.515μg/ml、0.171μg/ml。通过Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学变化,初步探讨了化合物H1和H2的抗肿瘤机制。研究结果表明,乳腺癌细胞(MDA-MB-231)经化合物H1和H2(2-15μg/ml)处理24h后,Hoechst33258染色呈现明显的细胞凋亡形态特征,表明化合物H1和H2具有诱导MDA-MB-231细胞凋亡作用。综合分析本论文的研究结果,对于诠释茯苓的抗肿瘤药效物质基础具有重要意义。
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全文目录
摘要 4-6 Abstract 6-8 前言 8-9 第一章 文献综述 9-18 1 茯苓化学成分的研究 9-14 2 茯苓药理作用研究 14-18 第二章 茯苓乙酸乙酯提取物化学成分的分离与鉴定 18-29 1 仪器与试药 18 2 茯苓乙酸乙酯提取物及各成分的分离 18-21 3 结构鉴定 21-28 4 讨论 28-29 第三章 茯苓抗肿瘤活性成分的药理筛选及其作用机理初探 29-43 第一节 茯苓抗肿瘤活性成分筛选研究 29-40 1 仪器和试药 29-30 2 抗肿瘤活性成分筛选 30-33 3 筛选化合物H1、H2的敏感细胞株 33-40 第二节 茯苓中化合物H1和H2抗肿瘤作用机理的初步研究 40-43 1 实验材料和仪器 40 2 实验内容与方法 40-41 3 实验结果 41-42 4 讨论 42-43 结语与创新 43-44 参考文献 44-50 附图 50-57 已发表和待发表论文 57-58 致谢 58
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药品 > 药品鉴定
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