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内蒙古地区土壤放线菌的分离及其发酵产物农用活性研究

作　者: 李利
导　师: 王永宏
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 农药学
关键词: 放线菌 分离 发酵液 杀虫活性 抑菌活性
分类号: S154.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


本研究采用选择性分离方法，从采自内蒙古地区的耕作地、沙土、煤矿土、盐碱地、沼泽地的土壤样品中共分离得到183株放线菌，并对分离得到的放线菌发酵液进行杀虫和抑菌活性的筛选。主要结果如下：以番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）和黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporumf.sp.Cucumerinum）为供试病原菌，采用抑制菌丝生长速率法和活体组织法对183株放线菌的抑菌活性进行筛选。结果表明，12-09-4和12-09-11菌株具有较高的抑菌活性，其对黄瓜枯萎病菌菌丝生长的抑制率分别为82.36%和82.27%，对番茄灰霉病菌活体组织的防治效果分别为92.91%和92.09%；抑菌活性系统测试表明，12-09-4和12-09-11菌株具有较广的抑菌谱和较强的抑菌活性。两菌株发酵液对油菜菌核病菌、玉米大斑病菌、番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制率在90%以上，对玉米大斑病菌、烟草赤星病菌、黄瓜枯萎病菌和番茄灰霉病菌孢子萌发的抑制率在75%以上，其中对黄瓜枯萎病菌和番茄灰霉病菌孢子的抑制率达到了95%以上。12-09-11和12-09-4菌株抑制番茄灰霉病菌孢子萌发的EC50分别为0.0936mg·mL-1和0.1092mg·mL-1，抑制黄瓜枯萎病菌孢子萌发的EC50分别为0.2163mg·mL-1和0.2429mg·mL-1；菌株12-09-11和12-09-4发酵液对小麦白粉病菌的盆栽药效试验表明，保护作用下的防治效果分别为76.95%和72.67%，治疗效果较差，仅为50%左右。以卤虫（Artemia salina）I期无节幼体为供试生物，对分离得到的183株放线菌的杀虫活性进行初步筛选，结果表明，23株放线菌发酵液对卤虫表现出一定的毒杀活性；在此基础上，以淡色库蚊（Culex pipiens pallens）3龄幼虫为试虫，对23株放线菌进行杀虫活性复筛，结果表明，12-09-10、11-09-3和11-09-49菌株具有较高的杀虫活性，3菌株对淡色库蚊3龄幼虫12h的毒杀活性均在90%以上；以朱砂叶螨（Tetranychuscinnabarinus）成虫、小菜蛾（Plutella xylostella）3龄幼虫、粘虫（Mythimna separate）3龄幼虫为试虫进一步测定了12-09-10、11-09-3和11-09-49菌株的杀虫活性，结果表明，3菌株发酵液对小菜蛾48h的毒杀活性分别为96.67%、90.00%和65.49%，对朱砂叶螨24h的毒杀活性分别为93.10%、86.67%和88.67%。11-09-3和12-09-10菌株对小菜蛾的LC50分别为18.89mg/mL，22.7489mg/mL；11-09-3菌株发酵液粗提物杀虫活性测定显示，发酵液正丁醇提取物对卤虫有较高的毒杀活性（92.34%）；11-09-3菌株发酵液中杀虫活性物质稳定性测定表明，温度和pH对其杀虫活性有较大的影响，在25-50℃、pH4.0～6.0的条件下，杀虫活性稳定。11-09-3菌株杀虫活性发酵条件优化表明，以小米发酵培养基为基础，在培养基装量为125ml，发酵时间为5d，初始pH值为7.5，发酵温度30℃，接种量为培养基装量的20%的条件下，11-09-3菌株发酵液的杀虫活性最好。通过形态与生理生化特性的鉴定，将菌株11-09-3初步归为链霉菌属的吸水类群。

全文目录


摘要  6-8
ABSTRACT  8-12
第一章 文献综述  12-23
  1.1 放线菌概述  12-18
    1.1.1 放线菌研究进展  13-14
    1.1.2 放线菌的多样性和分类学发展  14
    1.1.3 放线菌研究动态  14-18
  1.2 放线菌的分离方法学概述  18-19
    1.2.1 分离源的选择  18
    1.2.2 分离培养基  18
    1.2.3 预处理技术  18-19
    1.2.4 抑制剂的选择  19
  1.3 放线菌资源的开发利用  19-20
    1.3.1 次生代谢产物的的应用  19
    1.3.2 放线菌的生防作用及生态功能  19-20
  1.4 农用抗生素研究进展  20-22
    1.4.1 杀虫抗生素  21
    1.4.2 杀菌抗生素  21
    1.4.3 除草抗生素  21
    1.4.4 抗病毒抗生素  21-22
  1.5 本论文设计思路  22-23
第二章 内蒙古地区不同生境土壤放线菌选择性分离  23-29
  2.1 材料与方法  23-25
    2.1.1 试验材料  23-24
    2.1.2 试验方法  24-25
  2.2 结果与分析  25-28
    2.2.1 不同土样放线菌的分离  25
    2.2.2 培养基对放线菌分离的影响  25-26
    2.2.3 土样预处理对放线菌分离的影响  26-27
    2.2.4 抑制剂对放线菌分离的影响  27-28
  2.3 小结与讨论  28-29
第三章 具杀虫、抑菌活性土壤放线菌的筛选  29-35
  3.1 材料与方法  29-31
    3.1.1 试验材料  29
    3.1.2 试验方法  29-31
  3.2 结果与分析  31-33
    3.2.1 不同菌株发酵液对卤虫的毒杀活性  31
    3.2.2 放线菌发酵液对淡色库蚊 3 龄幼虫的毒杀活性  31-32
    3.2.3 不同菌株发酵液对番茄灰霉病的抑制活性测定  32-33
    3.2.4 不同菌株发酵液对黄瓜枯萎病的抑制活性  33
  3.3 小结与讨论  33-35
    3.3.1 小结  33-34
    3.3.2 讨论  34-35
第四章 放线菌发酵产物杀虫、抑菌活性的初步研究  35-49
  4.1 试验材料与方法  35-40
    4.1.1 试验材料  35-37
    4.1.2 试验方法  37-40
  4.2 结果与分析  40-48
    4.2.1 3 株放线菌对不同植物病原菌菌丝生长的抑制活性  40-41
    4.2.2 3 株放线菌对不同植物病原菌孢子萌发的抑制作用  41-42
    4.2.3 1 2-09-11 和 12-09-4 菌株对小麦白粉病的防治效果  42
    4.2.4 3 株放线菌发酵液对 3 种农业害虫的毒杀活性  42
    4.2.5 3 株放线菌发酵液粗提物对小菜蛾的毒力测定  42-43
    4.2.6 1 1-09-3 菌株发酵液杀虫活性物质的理化性质  43-44
    4.2.7 1 1-09-3 菌株发酵条件优化  44-45
    4.2.8 验证试验  45-46
    4.2.9 菌株鉴定  46
    4.2.10 菌株生理生化鉴定  46-48
  4.3 小结与讨论  48-49
    4.3.1 小结  48
    4.3.2 讨论  48-49
第五章 结论  49-50
参考文献  50-56
附图  56-57
致谢  57-58
作者简介  58

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中图分类: > 农业科学 > 农业基础科学 > 土壤学 > 土壤生物学 > 土壤微生物学
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