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μ链转基因小鼠中抗体合成的机理

作　者: 韩骅
导　师: 王成济
学　校: 第四军医大学
专　业: 生物化学
关键词:
分类号: Q78
类　型: 博士论文
年　份: 1994年
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内容摘要

在B淋巴细胞发生的过程中，来自一个前体细胞的B细胞克隆可将其产生的免疫球蛋白的恒定区类型由IgM转为IgG、IgA或IgE，而保持其可变区相同。这一过程称为免疫球蛋白重链类型转换，是通过一个称为S_S重组的过程实现的。S_S重组发生于各个C基因(除Cδ外)前的S区中。可通过DNA重组使已形成的V_H区基因连接于新的、将被表达的C_H基因前并缺失掉二者之间的其它序列。这种缺失模型从许多实验中得到了支持，如关于骨髓瘤，杂交瘤及正常B细胞的研究，特别是最近分离到了S_S重组的副产品——重组环。另一方面，关于B细胞的分析还表明有些B细胞可在同一个细胞表面表达一种以上的免疫球蛋白。这类B细胞被称为双重或多重携带者(double or multipie bearers)。这种现象与上述缺失模型不符合，因为在表达的第二个C_H位点没有检测到DNA重排发生。同样因为这种原因，人们认为RNA加工也许与同时表达有相同V区的几种C_H基因有关。到目前为止，至少已证明IgM与IgD的同时表达与长RN A转录物的差异拼接有关。最近许多研究表明体外一些细胞因子和多克隆B细胞激活物诱导的免疫球蛋白类型转换发生之前总有起始于S区5′端并包含下游C_H基因的转录物产生。由此事实，以前有人建议反式拼接

全文目录

缩写字表  4-5
摘要  5-7
Abstract  7-10
前言  10-12
第一章文献回顾  12-28
  Ⅰ.重链恒定区的基因结构  12-18
  Ⅱ.S-S重组的分子机理—缺失模型  18-21
  Ⅲ.class-switch的调节  21-25
  Ⅳ.double bearer现象及其研究进展  25-28
第二章材料与方法  28-47
  Ⅰ.主要材料  28-29
    1.动物品系  28
    2.主要试剂  28-29
    3.菌种  29
    4.主要仪器  29
  Ⅱ.主要实验方法  29-47
    1.淋巴细胞培养  29-30
    2.RNA提取  30-31
    3.cDNA合成  31
    4.基因组DNA的提取  31-32
    5.PCR  32-36
    6.PCR扩增片段的克隆  36-42
    7.DNA序列分析  42-44
    8.Southern blotting及分子杂交  44-47
第三章.实验结果  47-74
  Ⅰ.转基因小鼠TG.SA中白细胞介素4与LPS诱导的IgG表达  47-54
    1.用PCR法检测trans-mRNA  47-48
    2.IL4及LPS诱导的IgG表达的类型  48-54
    3.γ1型trans-mRNA和sterlle transcrlpts诱导的时间顺序  54
  Ⅱ.LPS+IL4在H4小鼠中诱导的trans-mRNA表达  54-59
  Ⅲ.TGF-β+LPS诱导的α型trans-mRNA表达及其allele选择性  59-69
    1.α型trans-mRNA的表达  59-63
    2.TG.SA小鼠781号个体在Cα位点的基因背景  63-66
    3.两个allele在α型trans-mRNA中的应用  66-69
  Ⅳ.表达trans-mRNA的脾细胞中转基因的状态的观察  69-74
第四章讨论  74-87
  Ⅰ.PCR反应  74-77
  Ⅱ.IL4和LPS对class switch的诱导作用  77-80
  Ⅲ.TGF-β对转基因小鼠中class switch的影响  80-84
  Ⅳ.trans-mRNA的产生机理  84-85
  Ⅴ.免疫球蛋白基因trans-spllcing的意义  85-87
第五章结论  87-88
致谢  88-89
参考文献  89-91

μ链转基因小鼠中抗体合成的机理

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