学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

诱导型一氧化氮合酶抑制剂对大鼠烟雾吸入性损伤保护作用的实验研究

作　者: 吴勇
导　师: 刘群
学　校: 天津医科大学
专　业: 外科学
关键词: 烟雾吸入性损伤 NO 诱导型一氧化氮合酶 细胞凋亡 Bax Bcl-2
分类号: R644
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 44次
引　用: 2次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：吸入性损伤是早期烧伤患者死亡的主要原因之一,其病理生理学机制与细胞凋亡密切相关,本实验以大鼠为研究对象,观察烟雾吸入性损伤后大鼠肺组织病理改变,以及肺组织一氧化氮(Nitric oxide NO)和诱导型一氧化氮合酶(inducible Nitric-oxide synthase iNOS)含量的时程性变化,研究诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍(Aminoguanidine AG)对烟雾吸入性损伤大鼠肺组织细胞凋亡和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响,探讨iNOS抑制剂对吸入性损伤肺脏保护机制,为临床治疗吸入性损伤提供一定的理论依据。方法：第一部分：将36只健康SD大鼠随机分为2组,正常对照组6只(简称对照组)和吸入性损伤组30只(简称致伤组)。致伤组分别设2 h、6 h、12 h、24 h、48 h共5个时段,每时段6只大鼠,予以吸入性损伤造模后,每组分别于伤后各时点活杀,观察肺组织大体变化情况,常规病理切片HE染色光学显微镜下肺组织病理损伤评分变化,肺组织匀浆测NO、iNOS含量变化。第二部分：将66只健康的SD大鼠随机分为3组,空白对照组6只(简称空白组)、吸入性损伤+AG治疗组30只(简称治疗组)、吸入性损伤组30只(简称损伤组),治疗组和损伤组每组分别设2h、6h、12h、24h、48h共5个时段,每时段6只大鼠,予以吸入性损伤造模后,治疗组立即给予腹腔注射AG 100mg/kg,损伤组予等容量生理盐水。每组分别于伤后各时点活杀,剖胸取肺脏组织,常规病理切片,免疫组化方法观察Bcl-2及Bax表达变化,原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测肺脏细胞凋亡情况,计算各时相点相应凋亡指数(apoptosis index AI)。结果：第一部分1.大体观察：致伤组大鼠伤后气管、支气管内有粘液或泡沫状分泌物,粘膜充血肿胀,肺表面湿润,胸膜下有散在出血斑,肺组织充血肿胀呈暗红色,伤后2h时变化较局限,12h时变化最明显。’2.HE染色光学显微镜下观察：致伤组各级支气管壁水肿,肺间质充血水肿,肺泡间隔增厚,肺泡萎陷甚至完全闭塞,部分肺泡可见出血,与对照组比较,致伤组肺组织损伤病理评分在2h开始升高,24h时差异具有显著性。伤后12h到24h病理损伤发展最快。3.肺组织匀浆NO、iNOS水平：与对照组相比较,致伤组大鼠的肺组织匀浆NO含量在损伤2h后即有升高,在12h时达到峰值。致伤后2h肺组织匀浆iNOS含量既开始出现升高,6h至12h之间升高的速度最快,至致伤后12h, iNOS含量达到峰值,12h至24h呈显著下降趋势。第二部分1.HE染色：与损伤组比较,治疗组大鼠肺组织充血水肿有所减轻,肺泡壁较光滑,肺泡中可见少量中性粒细胞、淋巴细胞浸润,肺组织淤血水肿较轻。2.免疫组化Bax、Bcl-2以及Bcl-2/Bax比值变化：与空白组比较,损伤组大鼠肺组织Bax表达显著升高,进行性升高至24小时达到最大值,之后其表达有所下降,但仍显著高于正常对照组,而治疗组与损伤组比较,从6h开始各时间点均可见Bax表达下降。与对照组比较,损伤组Bcl-2表达较恒定,而治疗组上调Bcl-2的水平。损伤组Bcl-2/Bax比值随时间推移一直下降,而治疗组的Bcl-2/Bax比值同样下降,但下降程度低于损伤组。3.肺脏细胞的凋亡变化：TUNEL法显示,与空白组比较,损伤组在2h后各时间点均可见凋亡指数的升高。损伤后6h和24h治疗组AI低于损伤组,12h和48h,两组AI值无显著差异。结论：大鼠烟雾吸入性损伤后,NO、iNOS均表达上升,参与肺组织的损伤。iNOS抑制剂通过减少NO的产生,能减轻烟雾吸入性损伤后肺组织的损伤,而其可能机制是通过抑制肺组织细胞凋亡来减轻损伤,也有可能是通过上调凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,从而增加Bcl-2/Bax比值来实现。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-11
缩略语/符号说明  11-12
前言  12-15
  研究现状、成果  12-13
  研究目的、方法  13-15
一、烟雾吸入性损伤大鼠肺组织NO、iNOS含量时程性变化的实验研究  15-31
  1 对象和方法  15-21
    1.1 主要仪器  15-16
    1.2 实验药品及试剂  16
    1.3 主要材料  16-17
    1.4 模型制备方法  17-18
    1.5 评价指标测定  18-21
    1.6 统计学方法  21
  2 结果  21-26
    2.1 肺组织病理学改变  22-23
    2.2 肺组织病理评分变化  23-24
    2.3 肺组织匀浆NO含量变化  24
    2.4 肺组织匀浆iNOS含量变化  24-26
  3 讨论  26-30
    3.1 致伤模型的评估  26-27
    3.2 NO在吸入性损伤中的作用  27-29
    3.3 NO及iNOS表达的时程性变化  29-30
  4 小结  30-31
二、诱导型一氧化氮合酶抑制剂对吸入性损伤大鼠肺组织细胞凋亡的影响  31-43
  1 对象和方法  31-34
    1.1 主要仪器  31
    1.2 实验药品及试剂  31-32
    1.3 实验方法  32-34
    1.4 统计学方法  34
  2 结果  34-39
    2.1 治疗组与损伤组大鼠病理组织变化比较  34-35
    2.2 吸入性损伤后大鼠肺组织Bax、Bcl-2、Bcl-2/Bax及AI的变化  35-38
    2.3 治疗组与损伤组大鼠肺组织Bax、Bcl-2、Bcl-2/Bax及AI比较  38-39
  3 讨论  39-41
  4 小结  41-43
结论  43-44
参考文献  44-50
发表论文和参加科研情况说明  50-51
附录  51-60
综述 吸入性损伤药物治疗的研究进展  60-72
  综述参考文献  67-72
致谢  72

相似论文

  1. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  2. CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
  3. 锰—铁催化剂低温催化氧化NO研究,X701
  4. 厌氧条件下初始NO3-含量对土壤反硝化气体（N2、N2O和NO）和CO2排放的影响,X131.3
  5. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
  6. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  7. 酸肉中产一氧化氮乳酸菌的筛选及其对发酵香肠发色的影响,TS251.65
  8. ABA诱导的玉米叶片ZmCCaMK活性研究及亚细胞定位,S513
  9. 姜黄素对运输应激状态下生长猪海马NO-NOS系统的影响,S858.28
  10. 组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,S828
  11. 外加低压稳恒直流电场对兔腹主动脉球囊损伤后舒张功能的影响及其机制研究,R541.4
  12. sCD40L对白血病HL-60细胞株生物学行为的影响及机制,R733.7
  13. 常规化疗联合节拍化疗对乳腺癌裸鼠移植瘤的实验研究,R737.9
  14. 凋亡调控因子Survivin、XIAP以及c-Jun、NF-κB在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义,R737.31
  15. 骨髓间充质干细胞血肿周边移植对大鼠脑出血的治疗作用及相关机制的探究,R743.34
  16. 蟾蜍灵对血管内皮细胞EAhy926增殖和诱导凋亡的研究,R285
  17. 右旋柠烯通过线粒体途径诱导人白血病细胞凋亡,R733.7
  18. 商陆皂苷甲对BXSB小鼠肾组织PCNA、Caspase-3、Fas和FasL表达的影响,R285.5
  19. 大承气汤对多器官功能障碍综合征大鼠小肠平滑肌细胞Bcl-2和Bax表达的影响,R285.5
  20. 丁香胃灵合剂对慢性萎缩性胃炎大鼠胃泌素（GAS）水平及Bc1-2蛋白表达的影响,R285.5
  21. 丹参酮ⅡA微乳抗H22小鼠肝癌的研究,R285.5

中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 创伤外科学 > 烧伤及烫伤（灼伤）
© 2012 www.xueweilunwen.com