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广西巴马小型猪内源性反转录病毒的检测及分子生物学特性的研究

作　者: 潘汉世
导　师: 吴健敏
学　校: 广西大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 猪内源性反转录病毒半定量RT-PCR Env基因克隆
分类号: S852.65
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 46次
引　用: 1次
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内容摘要

猪内源性反转录病毒(PERV)为反转录病毒科(Retroviridae)哺乳动物C型反转录病毒属(Mammalian Type C Retroviridae)成员，它是以前病毒DNA的形式整合进猪细胞基因组中，并随细胞染色体复制而复制。1997年，Patience等发现PERV在体外可以感染人的多种细胞，激起了人们对PERV与猪-人异种移植病原安全性的广泛关注。因此，筛选培育无PERV猪群，为异种移植提供安全可靠的供体源。本研究利用国内已建立的PERV检测方法对广西巴马小型猪中PERV的存在情况进行调查。共采集了114份外周血样，通过PCR检测发现：广西巴马小型猪基因组中普遍存在PERV，其阳性率达100％。其中以A亚型最高(91.4％)，其次为B亚型(87.7％)，但没有发现C亚型。PERV主要结构蛋白基因gag、pol、env不仅在小型猪基因组中存在，而且都能够转录为RNA。广西巴马小型香猪PERV-A和B亚型病毒混合存在的现象十分严重，高达85.1％。为了解PERV-mRNA在广西巴马小型猪各个组织表达丰度情况，本实验对采自两头巴马小型猪的肝、肺、胰、肾、心、脾、胸腺、卵巢、外周血等，进行半定量RT-PCR分析，结果发现PERV-mRNA在肾脏和外周血的表达丰度最高，在胰脏的表达丰度最低，而其它脏器的间没有显著的差异。同时本研究还对巴马小型猪PERV-env基因在不同世系间的变化情况，克隆得到了18株env全长基因(包括7个世系和两组三代亲源关系)，经过遗传进化树分析发现，所克隆得到的env全长基因都属于PERV-A亚型，同时发现在不同世系间某些位点发生了规律性的突变，但它们并没有引起抗原表位发生相应的改变。

全文目录

摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
前言  10-25
  1.EPRV病原  11-14
  2.PERV在异种移植中潜在危害性  14-15
  3、PERV的感染性  15-17
  4.PERV的预防与治疗策略  17-19
  5.PERV检测技术的研究  19-22
  6、小型猪中PEVR存在情况的检测进展概况  22-23
  7、本研究的目的和意义  23-25
第一部分广西巴马小型猪内源性反转录病毒的检测  25-33
  1.材料  25-27
  2.方法  27-28
  3.结果  28-31
  4.讨论  31-32
  5.结论  32-33
第二部分半定量RT-PCR分析PERVmRNA在广西巴马小型猪不同组织的表达  33-41
  1.材料  33-34
  2.方法  34-36
  3.结果  36-39
  4.讨论  39-40
  5.结论  40-41
第三部分广西巴马小型猪PERV的囊膜糖蛋白(env)基因遗传进化分析  41-55
  1.材料  41-44
  2.方法  44-48
  3.结果  48-52
  4.讨论  52-53
  5.结论  53-55
参考文献  55-61
英文缩略词表  61-62
附表  62-65
致谢  65-66
硕士生期间发表的论文  66

广西巴马小型猪内源性反转录病毒的检测及分子生物学特性的研究

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