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1、两种蜘蛛毒素的结构与功能研究　2、2D-胶上银染点蛋白质的内部顺序的Edman降解微量测定方法学研究

作　者: 黄仁槐
导　师: 梁宋平；谢锦云
学　校: 湖南师范大学
专　业: 生物化学
关键词: 蜘蛛毒素 Huwentoxin-III Hainantoxin-I 一级结构 Selenocosmia huwena,Selenocosmia hainana
分类号: Q51
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
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内容摘要

第一部分、蜘蛛毒素的结构与功能研究蜘蛛毒液中发现含有丰富的肽类神经毒素。至今已有近百种蜘蛛神经毒素的一级结构被测定，除黑寡妇蜘蛛毒素为高分子量毒素外，其它蜘蛛神经毒素的分子量在3-12KDa之间，不同种属来源的毒素同源性很小，序列中含有较多的半胱氨酸。这些毒素功能多样，可与细胞膜上的Na⁺、K⁺或Ca²⁺等离子通道相互作用。由于它们对离子通道的选择性，这些毒素在神经生物学和药理学研究上已得到了广泛的应用。虎纹捕鸟蛛（Selonocosmia huwena）是我国西南部山区发现的蜘蛛新种，属于捕鸟蛛科（Theraphosidae）。该蛛穴居地下，个体大，毒性强。粗毒中含有多种酶类及使小鼠致死的活性成分。应用离子交换色谱及反相色谱从该粗毒中已分离了两种神经毒素Huwentoxin-Ⅰ（HWTX-Ⅰ）和Huwentoxin-Ⅱ（HWTX-Ⅱ）及一种凝集活性肽SHL-Ⅰ。本文报道从虎纹捕鸟蛛（Selenocosmia huwena）毒液中纯化的一种新型肽类神经毒素，虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅲ（Huwentoxin-Ⅱ，HWTX-Ⅲ）的生物化学性质及基本生物学功能研究。该毒素由33个氨基酸残基组成，分子中含6个半胱氨酸残基，并形成三对二硫键，分子量为3853.69 Da。其一级结构已测定为NH2-DCAGY MRECK EKLCC SGYVC SSRWK WCVLP APW-COOH。该毒素含有六个半胱氨，与同种蜘蛛毒液中纯化的凝集活性肽SHL-Ⅰ及墨西哥红膝Tarantula蜘蛛（Brachypelma smithii）毒液中纯化的TxP5具有较高的同源性，分别为60％和48.5％。HWTX-Ⅲ不能使人血红细胞凝集，对小鼠腹腔注射及脑室注射均未引起异常反应，腹腔注射后该毒素对美洲蜚蠊具有较弱的运动麻痹作用，ED₅₀为192.95±120.84μg／g（P=0.95）。电生理学实验表明HWTX-Ⅲ明显加强大鼠输精管平滑肌对电刺激神经引起的肌肉收缩。中文摘要第111页此外对海南捕鸟蛛(‘召彻，^”iah^刃粗毒与虎纹捕鸟蛛粗毒的色谱行为进行了比较。并测定了海南捕鸟蛛毒素一（…Hainantoxin一I， HNTX^l）的一级结构，结果为:NHZ.ECKGF GKSCV pGKNE CCSGY ACNSR DKWCE VLL.COOH。与虎纹捕鸟蛛毒液中分离的HW毛哈I具有51%的序列同源性，但初步生物学研究结果表明，小鼠及蜚镰腹腔气注射后HNTx一I后没有引起异常反应。

全文目录

缩写表  3-4
中文摘要  4-7
英文摘要  7-11
第一部分两种蜘蛛毒素的结构与功能研究  11-54
  第一章前言--蜘蛛多肽神经毒素研究新进展  12-27
  第二章虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅲ的一级结构测定与基本生物学功能研究  27-47
  第三章海南捕鸟蛛毒素-Ⅰ的分离纯化及一级结构测定  47-52
  第四章进一步研究设想  52-54
第二部分 2D-胶上银染点蛋白质的内部顺序的Edman降解微量测定方法学研究  54-97
  第五章前言--蛋白质组学方法学研究进展综述  55-75
  第六章 2D胶上银染点蛋白质的内部顺序的Edman降解微量测定  75-96
  第七章进一步研究设想  96-97
致谢  97

1、两种蜘蛛毒素的结构与功能研究 2、2D-胶上银染点蛋白质的内部顺序的Edman降解微量测定方法学研究

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