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小麦PGIP的部分结构分析及与双子叶植物PGIP的比较研究

作　者: 万琳
导　师: 周立
学　校: 四川大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 小麦PGIP 去糖基化一级结构二级结构二硫键
分类号: S512.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
下　载: 73次
引　用: 1次
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内容摘要

本文从去糖基化、部分一级结构分析、二级结构和二硫键分析四个方面对小麦PGIP进行了部分结构的研究，并与双子叶植物PGIP作了比较。用TFMS将小麦PGIP去糖基化，结果表明小麦PGIP的糖含量为22％，与双子叶植物PGIP相似。去糖基化的小麦PGIP不能与纯化的天然PGIP产生的抗体发生免疫学反应，可能是由于小麦PGIP中寡糖链为抗原决定部位。用Edman降解法测得小麦PGIP的N端序列为：Lys-Pro-Leu-Leu-Thr-Lys-Ile-Thr-Lys-Gly-Ala-Ala-Ser-Thr，这不仅是小麦PGIP也是单子叶植物PGIP一级结构的首次报道。双子叶植物PGIP N端序列同源性为36％，但将小麦PGIP包括在内时同源性降低到9％。用小麦PGIP的N端序列和双子叶植物PGIP C端保守序列设计的引物不能扩增小麦PGIP基因，表明双子叶植物PGIP中的保守序列在单子叶植物小麦中可能不存在。N端和C端序列分析结果都反映了单、双子叶植物PGIP一级结构可能存在差异。用CD谱首次获得了小麦PGIP的二级结构。小麦PGIP在天然状态下，含有43.7％的β-折叠和13.1％的α-螺旋，是一种高β-折叠的蛋白。对pH和温度引起小麦PGIP二级结构和活性变化分析表明β-折叠与小麦PGIP的活性有密切关系。双子叶植物菜豆PGIP也是高β-折叠的蛋白，决定活性的氨基酸位于β-折叠。小麦PGIP经NR／R双向对角线SDS-PAGE分析，表明它是带有链内二硫键的蛋白，与双子植物菜豆PGIP相一致。由此可见，小麦PGIP与双子叶植物PGIP在糖含量上一致，端区一级结构_卜有差异，而二级结构和二硫键相似。小麦PGIP的结构研究为进一步弄清其作用机理打下了基础，抗赤霉病基因工程具有重要意义。在N端区和C同时对于植物

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-7
1 引言  7-8
2 材料和方法  8-12
  2.1 材料  8
  2.2 方法  8-12
3 结果  12-24
  3.1 小麦PGIP的去糖基化分析  12-13
  3.2 小麦PGIP部分一级结构分析  13-21
  3.3 小麦PGIP的二级结构及与生物活性关系  21-23
  3.4 小麦PGIP的二硫键分析  23-24
4 讨论  24-27
5 结论  27-28
参考文献  28-31
综述: 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白研究进展  31-51
  1 植物抗真菌研究进展  31-32
  2 真菌PG  32-33
  3 PGIP休外对PG的抑制作用和休内生物学功能  33-34
  4 PGIP结构  34-40
  5 PGIP基因家族  40
  6 PGIP的表达与表达调控  40-41
  7 PGIP在植物抗真菌墓因工程中的应用  41-42
  8 结束语  42-43
  综述参考文献  43-51
致谢  51-52

小麦PGIP的部分结构分析及与双子叶植物PGIP的比较研究

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