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SD大鼠神经祖细胞体外培养及EGF、bFGF、LIF的作用

作　者: 潘鲁
导　师: 盛伟斌
学　校: 新疆医科大学
专　业: 外科学
关键词: SD大鼠神经祖细胞表皮生长因子成纤维细胞生长因子白血病抑制因子增殖
分类号: R651.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:通过对新生Sprague-Dawley(SD)大鼠海马组织进行体外培养扩增,获得一定数量的神经祖细胞(Neural progenitor cells, NPCs),观察NPCs的生长情况,分析表皮生长因子(EGF)、成纤维生长因子(bFGF)、白血病抑制因子(LIF)独立或联合应用对NPC增殖的作用。方法:机械法分离新生SD大鼠海马组织后培养3代获得EGF/bFGF敏感的NPCs,等分为6个实验组分别添加EGF、bFGF、EGF+LIF、bFGF+LIF、bFGF+EGF、bFGF+EGF+LIF继续培养,第9代末(60 d)细胞鉴定并计数,对细胞数量进行比较。结果:(1)机械法分离得到的NPCs可以在体外以悬浮神经球的方式长期培养扩增;(2)EGF、EGF+LIF组NPCs培养到第6代末无法继续传代培养;其余4组继续传代培养到第9代末仍可见Nestin抗体阳性的神经球形成,并且有分化为三种神经终末细胞的潜能;(3)细胞培养第9代末,EGF+bFGF组较bFGF组细胞数量多,但bFGF、bFGF+LIF组之间和EGF+bFGF、EGF+bFGF+LIF组之间细胞数量的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:SD大鼠NPCs可以在体外长期增殖传代,其以悬浮神经球的形式生长,并有分化潜能;对体外培养的SD大鼠NPC,EGF和bFGF联合应用的增殖刺激作用大于单独应用EGF或bFGF,单独应用bFGF的作用大于单独应用EGF;LIF对体外培养的SD大鼠NPC增殖无作用。

全文目录

摘要  7-8
ABSTRACT  8-9
前言  9-12
材料与方法  12-19
  1. 材料  12-15
    1.1 实验动物  12-13
    1.2 主要实验试剂及设备  13-15
  2. 方法  15-19
    2.1 细胞培养  15-16
    2.2 细胞标记  16
    2.3 细胞HE 染色  16-17
    2.4 免疫细胞荧光染色  17
    2.5 统计学方法  17-18
    2.6 技术路线图  18-19
结果  19-30
讨论  30-35
小结  35-36
致谢  36-38
参考文献  38-42
综述  42-53
攻读硕士学位期间发表的学术论文  53-54
导师评阅表  54

SD大鼠神经祖细胞体外培养及EGF、bFGF、LIF的作用

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