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RNA干扰作用对小鼠脾淋巴细胞分泌TNF-α的影响

作 者: 郑宁宁
导 师: 张海鹏
学 校: 中国医科大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: RNA干扰 siRNA 转录后基因沉默 TNF-α LPS
分类号: R392
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
下 载: 71次
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内容摘要


目的 肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)由活化的巨噬细胞和T细胞产生,分跨膜型和分泌型,是一类重要的细胞因子。TNF-α具有广泛的生物学活性,包括对造血、免疫和炎症的调节,对血管和凝血的影响以及对多种器官的作用。早期研究发现TNF-α能诱导肿瘤细胞坏死或凋亡,后来发现TNF-α是介导炎症反应、细胞免疫应答及肿瘤免疫的主要细胞因子。目前已知与TNF-α有关的疾病包括:AIDS、贫血、自身免疫性疾病、肿瘤、出血性休克、移植排斥反应、结核病、白血病、糖尿病、类风湿性关节炎等。TNF-α参与了众多疾病的发生发展过程,因此在不同水平上阻断TNF-α的作用,有可能对与TNF-α有关的疾病产生治疗作用。RNA干扰是利用具有同源互补序列的双链RNA诱发序列特异性的转录后基因沉默现象,它可以通过抑制蛋白表达模拟基因敲除技术。这一天然而古老的生物途径,是多种种属中普遍存在的抵御病毒入侵、调控基因表达的机制。抑制效果的高效性、严格的序列特异性是该技术的突出特点。从利用体外合成双链RNA到通过利用质粒稳定表达小型干扰RNA诱发RNA干扰现象,这项技术被不断完善,并被广泛的应用。在研究哺乳动物基因功能、病毒的防治、肿瘤的基因治疗等方面提供了有力的工具和新的手段。本研究从C57BL/6鼠TNF-α基因序列中筛选出五个靶位点,对其分别进行RNA干扰实验。目的在于通过siRNA对TNF-α靶基因的抑制,实现对TNF-α分泌的调控。并通过分别针对五个靶位点的siRNA的干扰作用,快速筛选敏感的抑制位点,为今后克隆质粒提供最强的干扰序列。本文就位点2的干扰作用加以论述。

全文目录


一、摘要  5-12
  1.中文论著摘要  5-8
  2.英文论著摘要  8-12
二、英文缩略语  12-13
三、论文  13-36
  1.前言  13-14
  2.实验材料与方法  14-21
  3.实验结果(附论文图片)  21-25
  4.讨论  25-31
  5.结论  31-32
  6.本研究创新性的自我评价  32-33
  7.参考文献  33-36
四、附录  36-46
  1.综述  36-45
  2.致谢  45-46
  3.个人简介  46

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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