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生鲜牛奶中布鲁氏菌和单增李斯特菌双重PCR检测与汉中市四种动物疫病免疫抗体的检测

作　者: 李艳明
导　师: 张彦明；韦选民
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 生鲜牛奶布鲁氏菌单核增多李斯特菌双重PCR 动物疫病抗体检测
分类号: R155.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

布鲁氏菌(Brucella)是一种革兰氏阴性球杆状,其致病性很强,感染范围很广。奶牛感染布鲁氏菌后,虽然没有临床症状,但是仍然可以通过乳汁等途径排菌,通过乳与乳制品给消费者带来很大的食品安全风险。单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM,简称单增李斯特菌)是一种革兰氏阳性菌,分布广,通过污染的食品对人类健康威胁很大。近年来,国内外的动物疫病形式和防控难度越来越大。应该及时掌握疫病动态和预测疫病发展趋势,评估疫情发生的概率。鉴于此,按照规范化的实验室诊断方法,对汉中市高致病性禽流感等4种动物疫病进行临床血清的抗体检测。(1)用建立的生鲜牛奶布鲁氏菌和单增李斯特菌双重PCR检测方法,对云南、甘肃、天津3省(市)不同采样地点的牛奶进行了布鲁氏菌和单增李斯特菌检测。在采集的787份生鲜牛奶样品中检出布鲁氏菌阳性样品6份,阳性率为0.76%;未检出单增李斯特菌阳性样品。(2)应用规范化的抗体检测方法对汉中市O型口蹄疫、猪瘟、H5亚型禽流感和新城疫4种动物疫病进行了抗体检测。共收集检测血清样品695份,其中猪血清246份,牛血清130份,羊血清110份,鸡血清209份。检测结果如下:O型口蹄疫:共检测血清360份,其中猪120份,牛130份,羊110份。检出合格抗体276份,其中猪77份、牛114份、羊85份。抗体合格率分别为64.2%、87.7%、77.3%。猪瘟:共检测246份,检出合格抗体210份,抗体合格率为85.4%。H5亚型禽流感:共检测206份,检出合格抗体152份,抗体合格率为73.8%。新城疫:共检测209份,检出合格抗体155份,抗体合格率为74.2%。抗体合格率除了猪口蹄疫略低外,其他3种疫病免疫抗体水平都达到农业部规定的要求。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-9
文献综述  9-24
  第一章布鲁氏菌和单增李斯特菌研究进展  9-16
    1.1 布鲁氏菌研究进展  9-13
      1.1.1 布鲁氏菌的毒力因子  10
      1.1.2 布鲁氏菌的检测方法  10-12
      1.1.3 布鲁氏菌疫苗研究进展  12-13
    1.2 单增李斯特菌研究进展  13-15
      1.2.1 单增李斯特菌的毒力因子  13-14
      1.2.2 单增李斯特菌检测技术  14-15
      1.2.3 单增李斯特菌疫苗研究进展  15
    1.3 布鲁氏菌病和单增生李斯特菌病的综合防控  15-16
  第二章双重PCR 技术对生鲜牛奶布鲁氏菌和单增李斯特菌的检测  16-20
    2.1 材料  16
      2.1.1 材料  16
      2.1.2 菌株  16
      2.1.3 主要试剂及培养基  16
      2.1.4 主要仪器设备  16
    2.2 方法  16-17
      2.2.1 引物的设计与合成  16
      2.2.2 模板的制备  16-17
    2.3 结果  17
      2.3.1 双重 PCR 扩增条件优化  17
      2.3.2 样品测定结果  17
    2.4 讨论  17-20
  第三章汉中市禽流感等四种动物疫病免疫抗体检测  20-24
    3.1 材料  20
      3.1.1 血清  20
      3.1.2 主要诊断试剂  20
    3.2 方法  20-21
      3.2.1 抗体检测方法  20-21
      3.2.2 结果判定  21
    3.3 结果  21-23
      3.3.1 抗体检测结果  21
      3.3.2 汉中市2007—2010 年四种动物疫病抗体检测总体情况及总体趋势  21-23
    3.4 讨论  23-24
结论  24-25
参考文献  25-28
致谢  28-29
作者简介  29

生鲜牛奶中布鲁氏菌和单增李斯特菌双重PCR检测与汉中市四种动物疫病免疫抗体的检测

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