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天然产物抗微生物、抗氧化及DNA结合性的研究

作　者: 杨博
导　师: 杨光忠
学　校: 中南民族大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 天然产物 抗微生物 抗氧化 DNA的结合性
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


本文主要研究了来源于4种植物的47个天然产物的抗微生物、抗氧化活性和DNA的结合性。通过滤纸片扩散法研究了14个木脂素化合物的抗菌活性,结果表明,在滤纸片吸附化合物的量为200μg下,syringaresinol (9)的活性最大,抑菌圈直径分别为13mm (S. aereus)和16 mm (B. subtilis),化合物de-4’-O-methylyangambin (7)次之,其余的化合物没有表现出抗菌活性。通过微连续液体稀释法,测定了27个口山酮化合物和2个黄酮化合物的抗微生物活性,其中12b-Hydroxy-des-D-garcigerrin A (24)对所测试的三种革兰氏阳性菌的活性最高,其MIC值分别为25.03μM (S. aereus) , 25.03μM (B. subtilis)和12.52μM (B. mucilaginosus),Bigarcinenone A (43)对白色念珠球菌和热带念珠球菌的活性最高,最小抑菌浓度都为16.59μM。通过薄层色谱自显影技术测定了4个生物碱化合物的光活化抗微生物活性,其中,glycoborinine (44)的光活化抗微生物活性最高,同黑暗中相比,其抑制金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的活性分别提高了8倍和4倍。建立和优化了流动注射化学发光测定清除超氧阴离子和羟基自由基的体系。以Co(II)/EDTA-H2O2-鲁米诺体系测定了27个口山酮化合物和2个黄酮化合物清除羟基自由基的活性,其中,化合物27 1,2,5-trihydroxy-6-methoxyxanthone对羟基自由基的清除活性最高其IC50为0.09μM,化合物18, 19, 22, 24-28, 30, 35-39也显示出比抗坏血酸强的抗氧化活性,并对结构和活性的关系进行了初步的讨论。结果表明,人面果中的口山酮化合物是一类潜在的天然抗氧化剂,为进一步开发人面果提供了科学依据。以质粒pET-28a为模板,通过PCR反应获得的1.8kb长度的DNA片段,通过凝胶电泳的方法,研究了四个生物碱类化合物与DNA的结合性,研究表明,化合物glycoborinine (44)经过UVA照射处理,能够插入到含有5′-TpA和5′-ApT的DNA序列中,从而对Nde I,Nco I,Xba I和Bcl I四种酶对其识别位点的切割显示出了一定的抑制活性。尽管其他3个化合物:glybomine B (45),carbalexin A (46)和N-p-coumaroyltyramine (47)表现出了光活化抗微生物的活性,但是没有表现出光活化DNA的结合性,推测DNA不是其作用的靶标。综合文献的分析,咔唑类生物碱是来源于植物中的一类新型的天然光敏剂,

全文目录


摘要  7-8
Abstract  8-10
第1章 绪论  10-19
  1.1 以核酸为靶点的呋喃香豆素的光敏活性  10-13
  1.2 课题提出  13-15
  参考文献  15-19
第2章 天然产物抗微生物活性的研究  19-32
  2.1 实验材料、试剂及仪器  19-25
    2.1.1 植物材料  19
    2.1.2 所用化合物  19-24
      2.1.2.1 木脂素类化合物  19-20
      2.1.2.2 口山酮和黄酮化合物  20-24
      2.1.2.3 生物碱类化合物  24
    2.1.3 供试菌种  24
    2.1.4 主要试剂  24-25
    2.1.5 主要仪器  25
  2.2 实验方法  25-26
    2.2.1 滤纸片扩散法  25
    2.2.2 微稀释液体培养法  25-26
    2.2.3 薄层色谱自显影技术  26
  2.3 结果与讨论  26-31
    2.3.1 木脂素抗微生物活性  26-27
    2.3.2 口山酮和黄酮类化合物抗微生物活性  27-28
    2.3.3 生物碱类化合物抗微生物活性  28-31
  小结  31-32
第3章 天然产物抗氧化活性的研究  32-48
  3.1 实验材料、试剂与仪器  32
    3.1.1 实验所用化合物  32
    3.1.2 主要仪器与试剂  32
  3.2 羟基自由基化学发光体系  32-37
    3.2.1 实验原理及装置  32-34
    3.2.2 羟基自由基化学发光体系优化  34-37
      3.2.2.1 pH 的优化  34-35
      3.2.2.2 流速的选择  35
      3.2.2.3 H_20_2 浓度的选择  35-36
      3.2.2.4 鲁米诺浓度的选择  36-37
  3.3 超氧阴离子自由基化学发光体系  37-40
    3.3.1 实验原理  37
    3.3.2 实验简图  37
    3.3.3 超氧阴离子自由基化学发光体系优化  37-40
      3.3.3.1 pH 的优化  37-38
      3.3.3.2 泵速的优化  38
      3.3.3.3 邻苯三酚浓度的优化  38-39
      3.3.3.4 鲁米诺浓度的优化  39-40
  3.4 结果与讨论  40-47
  小结  47-48
第4章 生物碱光活化DNA 结合性的研究  48-56
  4.1 实验材料、试剂与仪器  48-49
    4.1.1 实验所用化合物  48
    4.1.2 主要试剂  48
    4.1.3 主要仪器  48-49
  4.2 实验方法  49-51
    4.2.1 质粒的提取  49-50
    4.2.2 PCR 反应  50-51
    4.2.3 光活化DNA 的结合性  51
  4.3 结果与讨论  51-55
  小结  55-56
参考文献  56-59
致谢  59-60
附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录  60

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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