学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

普萘洛尔对映体葡醛酸化立体选择性代谢研究

作　者: 马剑茵
导　师: 栾连军；邵青
学　校: 浙江大学
专　业: 药物分析
关键词: 普萘洛尔普萘洛尔葡醛酸苷立体选择性葡醛酸转移酶对映体高效液相色谱
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
下　载: 103次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目前，临床应用的许多药物都具有光学活性，其中相当部分以外消旋体方式给药。体内大分子如酶、受体、血浆蛋白等都具有手性特征，手性对映体药物在吸收、分布、代谢与排泄过程中，通过与体内大分子的不同立体结合，导致了对映体间可能具有不同的药理作用和不良反应。因此，建立手性药物及其代谢产物的分离分析方法，对于手性药物的药动学、药效学和毒理学研究具有重要意义。普萘洛尔（propranolol,PROP）是临床上常用的一种非选择性β-受体阻断剂，有R-（+）和S-（-）型两种光学异构体。本文建立了普萘洛尔光学异构体葡醛酸化代谢物高效液相色谱测定方法，采用体外方法，研究了经苯巴比妥诱导的鼠肝微粒体酶动力学特性及催化立体选择性，同时测定了健康志愿者尿样中的普萘洛尔对映体葡醛酸化代谢物的排泄分布，探索普萘洛尔对映体人体内代谢的立体选择性。 1、苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体酶对普萘洛尔葡醛酸化立体选择性代谢的影响普萘洛尔为一种非选择性β-受体阻断剂，临床上常以外消旋体给药。本文采用反相高效液相色谱法，测定大鼠肝微粒体孵育液中普萘洛尔对映体葡醛酸化产物，研究了其代谢的立体选择性。色谱条件：色谱柱：ALLTIMA C₁₈ 250mm×4.6mmID（5μm）；流动相：67mmol.L^-1磷酸二氢钾缓冲液-甲醇（55∶45）；pH3.5；柱温：35℃；检测波长：290nm；流速：1.0ml.min^-1；进样量：20μl。测定方法：大鼠肝微粒体孵育液体积0.5ml，加入R／S-普萘洛尔，37℃水浴预孵育5min，然后加入适量UDPGA（3mmol／L）启动反应，恒温振摇孵育一定时间，加入内标液（对硝基苯甲酸），同时加Zmol/L三氯醋酸适量终止反应，用2 mol/L氢氧化钠液调节pH至近中性，8000rpm离心10min。取上清液20“l作HPLC分析。结果:R/S一普蔡洛尔葡醛酸昔分离良好，孵育液杂质不干扰R/S一普蔡洛尔葡醛酸昔的测定。R一（+）普蔡洛尔葡醛酸昔标准曲线方程:As左七军0.04125c+l .834x 10-s，r=0.9998，线性范围0.2439⁷3.17pmol/L，平均回收率为99.40士1.04%，日内精密度RSD小于3 .32%，日间精密度RSD小于4.52%。与空白组相比，PB诱导微粒体酶动力学参数发生明显变化:以R一（+）一PROP为底物时，Vmax、Clin:显著增大，分别为空白组的4.3、9.8倍，Km为空白组的0.4倍，显著减小，表明PB诱导后，酶对R一（+）一PROP的亲和力、催化能力显著增强:以S一（一）一PROP为底物时，Vmax、Clint显著增大，分别为空白组的10.6、6.9倍，Km为空白组的1.5倍，表明PB诱导后，酶对S一（一）一PROP的催化能力显著增强，但亲和力降低。另外，普蔡洛尔对映体之间对代谢有相互抑制作用，浓度越高抑制越明显。2、普蔡洛尔对映体人体内代谢的立体选择性研究建立了人尿中普蔡洛尔对映体葡醛酸化代谢产物的反相高效液相色谱测定方法，并研究了体内代谢立体选择性。目前，普蔡洛尔对映体在人体内葡醛酸化的立体选择性研究尚未见报道。色谱条件:色谱柱:钻石CI。色谱柱（迪马公司）25Omlnx4.6InmID（spm）;流动相:67mlnol/L磷酸二氢钾缓冲液一甲醇（60:40）;pH3.5:柱温:30℃;流速:1.0ml/min;进样量:20 pl。荧光检测器，Ex:310nm，Em:339nm。测定方法:取受试者尿样lml，离心，取上清液20“l作HPLC分析。结果:尿样中的R一（+）普蔡洛尔葡醛酸营与S一C)普蔡洛尔葡醛酸普分离良好，且空白尿液无干扰，保留时间分别为14.4 min和18.4 min。以R一（+）普蔡洛尔葡醛酸昔的峰面积（A）与浓度（C）进行线性回归，得线性方程为:A== 41559238.6C一527455，r=0.9999，线性范围为0.02320⁵.800 p mol/L。平均回收率为96.8士0.51%，日内精密度RSD小于1 .08%，日间精密度RSD小于2.64%，定量限为0.02320 p mol/L，（RSD为0.95%，n=5），检测限为9.280nmol/L。测定16名健康志愿者服用20mg普蔡洛尔后各个时段尿样中R一（+）普蔡洛尔葡醛酸昔和S一（一）普蔡洛尔葡醛酸昔的量。结果表明，R（+）一普蔡洛尔葡醛酸昔与S（一）-普蔡洛尔葡醛酸昔的消除速率常数（k）分别为0.2833士0.058与0.1946士0.040h一，，达峰时（t.:）分别为1.75士0.33与2.21士0.45h，24h累积尿药量（X。）分别为2.952士0.6巧与5.648士0.977 p mol。累积排泄总量S一（一）普蔡洛尔葡醛酸昔大于凡（+）普蔡洛尔葡醛酸昔，呈代谢立体选择性。

全文目录

一、中文摘要  4-7
二、英文摘要  7-10
三、正文普萘洛尔对映体葡醛酸化立体选择性代谢研究  10-38
  (一) 前言  10-11
  (二) 苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体酶对普萘洛尔葡醛酸化立体选择性代谢的影响  11-18
  (三) 普萘洛尔对映体人体代谢的立体选择性研究  18-37
  (四) 参考文献  37-38
四、综述  38-55
  综述一手性药物的色谱分离方法  38-48
  综述二药物代谢与药物的相互作用  48-55
五、在读期间的科研论文  55-56
六、致谢  56

普萘洛尔对映体葡醛酸化立体选择性代谢研究

内容摘要

全文目录

相似论文