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硫氧还蛋白结合蛋白-2与乳腺癌的相关性
作 者: 党英男
导 师: 白洁
学 校: 昆明理工大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 乳腺癌 硫氧还蛋白 硫氧还蛋白结合蛋白-2 紫杉醇 SB203580
分类号: R737.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
乳腺癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率占人体各种恶性肿瘤的10-22.7%,是危害女性健康的重要疾病。我国每年约有4万多人死于乳腺癌,仅次于子宫癌。目前研究表明,乳腺癌是机体内、外多因素共同作用的结果,但其发病机制还不完全清楚。现阶段乳腺癌的主要治疗方法有手术治疗、放射治疗、化学治疗和生物治疗等,但各种治疗手段均受到一定程度的限制,因此有必要进一步研究乳腺癌的发病机理,以进行早期预防,减轻乳腺癌给患者带来的病痛及死亡硫氧还蛋白是氧化还原调节蛋白,普遍存在于各种组织细胞,它具有抗氧化、抗凋亡、促进细胞生长和免疫调节等功能。硫氧还蛋白结合蛋白-2是硫氧还蛋白的负调控蛋白,它能与硫氧还蛋白的活性位点结合,抑制硫氧还蛋白的氧化还原作用。在多种癌症组织中,硫氧还蛋白表达增高,而硫氧还蛋白结合蛋白-2表达减少或者缺失。环氧合酶是花生四烯酸代谢中的一种限速酶,环氧合酶-2具有抑制细胞凋亡,上调血管内皮生成因子的作用,在癌症组织中表达明显增高。本研究主要通过蛋白免疫印迹法和荧光实时定量PCR扩增方法,检测了临床乳腺癌组织及癌旁组织中硫氧还蛋白、硫氧还蛋白结合蛋白-2及环氧合酶-2的表达情况;并且使用紫杉醇作用乳腺癌细胞株MCF-7细胞,证明紫杉醇诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2表达的信号途径。结果显示:与癌旁组织相比乳腺癌组织中,硫氧还蛋白与环氧合酶-2表达增高,而硫氧还蛋白结合蛋白-2表达降低;p38丝裂原激活蛋白激酶抑制剂SB203580抑制了紫杉醇诱导的MCF-7细胞中硫氧还蛋白结合蛋白-2的表达增高。以上实验结果说明硫氧还蛋白、硫氧还蛋白结合蛋白-2与环氧合酶-2之间存在密切的关系,并且三者均与乳腺癌发生相关;硫氧还蛋白结合蛋白-2在紫杉醇抗癌作用中起重要的作用,紫杉醇通过p38丝裂原激活蛋白激酶途径诱导MCF-7细胞中硫氧还蛋白结合蛋白-2表达,从而抑制肿瘤细胞生长。该研究进一步明确了紫杉醇抑制乳腺癌细胞生长的分子机制,为硫氧还蛋白结合蛋白-2作为一种新的乳腺癌治疗靶点提供了理论依据。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-10 插图和附表清单 10-12 第一章 绪论 12-30 1.1 乳腺癌 12-18 1.1.1 乳腺癌概述 12 1.1.2 乳腺癌的致病因素 12-13 1.1.3 乳腺癌发病的分子机制 13-15 1.1.4 乳腺癌的分类、症状及诊断 15-16 1.1.5 乳腺癌的治疗 16-18 1.2 紫杉醇 18-19 1.2.1 紫杉醇的理化性质 18-19 1.2.2 紫杉醇的作用机理 19 1.3 实验涉及的蛋白分子介绍 19-26 1.3.1 硫氧还蛋白 19-22 1.3.2 硫氧还蛋白结合蛋白-2 22-25 1.3.3 环氧合酶-2 25-26 1.4 荧光实时定量PCR技术及其应用 26-27 1.4.1 荧光实时定量PCR的技术原理 26-27 1.4.2 荧光实时定量PCR的荧光材料 27 1.4.3 荧光实时定量PCR的应用 27 1.5 蛋白免疫印迹法原理及应用 27-28 1.6 本论文研究的目的意义和研究策略 28-30 1.6.1 本论文研究的目的和意义 28-29 1.6.2 本论文研究策略 29-30 第二章 检测乳腺组织中硫氧还蛋白结合蛋白-2及相关蛋白的表达 30-53 2.1 引言 30-31 2.2 实验技术路线 31-32 2.3 实验材料和方法 32-40 2.3.1 实验材料 32 2.3.2 主要试剂 32-33 2.3.3 主要试剂的配制 33-34 2.3.4 仪器设备 34 2.3.5 实验方法 34-40 2.4 实验结果 40-49 2.4.1 硫氧还蛋白在乳腺癌组织中表达增加 40-41 2.4.2 硫氧还蛋白结合蛋白-2在乳腺癌组织中表达降低 41-42 2.4.3 环氧合酶-2在乳腺癌组织中表达增加 42-43 2.4.4 硫氧还蛋白mRNA在乳腺癌组织中表达增加 43-46 2.4.5 硫氧还蛋白结合蛋白-2 mRNA在乳腺癌组织中表达减少 46-49 2.5 讨论 49-52 2.6 本章小结 52-53 第三章 硫氧还蛋白结合蛋白一2在紫杉醇抗癌机制中的作用 53-70 3.1 引言 53-54 3.2 实验技术路线 54-55 3.3 实验材料和方法 55-60 3.3.1 实验材料 55 3.3.2 主要试剂 55-56 3.3.3 主要试剂的配制 56 3.3.4 仪器设备 56-57 3.3.5 实验方法 57-60 3.4 实验结果 60-68 3.4.1 紫杉醇诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2启动子活性增高 60-61 3.4.2 MCF-7细胞在紫杉醇作用下增殖减少 61-62 3.4.3 紫杉醇诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2 mRNA表达增加 62-65 3.4.4 紫杉醇通过P38信号通路诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2表达 65-68 3.5 讨论 68-69 3.6 本章小结 69-70 第四章 结论 70-72 4.1 乳腺癌组织中硫氧还蛋白及硫氧还蛋白mRNA表达增高 70 4.2 乳腺癌组织中硫氧还蛋白结合蛋白-2及硫氧还蛋白结合蛋白-2mRNA表达降低 70 4.3 乳腺癌组织中环氧合酶-2蛋白表达增高 70 4.4 紫杉醇抑制MCF-7细胞增殖 70 4.5 紫杉醇诱导MCF-7细胞中硫氧还蛋白结合蛋白-2mRNA表达增加 70-71 4.6 SB203580抑制紫杉醇诱导的硫氧还蛋白结合蛋白-2 mRNA表达 71-72 致谢 72-74 参考文献 74-80 附录A 80
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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