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环磷酰胺LDM联合MTD在乳腺癌抗血管生成、诱导凋亡方面的研究

作 者: 陈伶
导 师: 李丽
学 校: 大连医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 环磷酰胺 抗血管生成 乳腺癌 节律化疗 最大耐受剂量
分类号: R737.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:观察环磷酰胺最大耐受量(MTD)联合低剂量节律化疗(LDM)对裸鼠人乳腺癌MCF-7细胞皮下移植瘤的抑瘤效果,并进一步探讨其对血管生成及肿瘤细胞凋亡的影响。方法:1、建立裸鼠人乳腺癌移植瘤模型:将人乳腺癌细胞株MCF-7细胞接种于含10%胎牛血清的IMDM培养基中,于对数生长期将其调至细胞浓度为6×107/ml的MCF-7细胞悬液,按0.2ml/只接种于裸鼠右侧胸壁乳垫下,待肿瘤体积达到150~200mm3时开始分组用药。2、实验分组及用药:将20只荷瘤裸鼠随机(随机数字表法)分成4组,每组5只,A组(LDM单药组) CTX20mg/kg,qd,ip;B组(LDM+MTD联合组)CTX150mg/kg,qod,ip (共3次)CTX20mg/kg,qd,ip;C组(MTD单药组)CTX150mg/kg,qod,ip (共3次);D组(生理盐水组)NS等体积,qd,ip。3、用药期间观察小鼠一般状况、隔日用游标卡尺测量移植瘤的体积及每周尾静脉采血计数外周血细胞。4、组织取材及病理切片检查:治疗结束后颈椎脱臼法处死裸鼠,在无菌条件下将肿瘤组织完整剥离, 15分钟内浸泡于10%的中性福尔马林液,常温下固定8~24h,常规石蜡包埋后,2μm连续切片,免疫组织化学检测MVD、TSP-1,TUNEL法检测凋亡。结果:1、抑制肿瘤生长:实验结果显示在用药第14天各用药组瘤体积较NS对照组均有统计学差异(P=0.008),第21天联合用药组的瘤体积明显小于低剂量节律组(PAB=0.008)和最大耐受量组(PBC=0.038)。以联合用药组瘤质量最小,明显抑制了肿瘤细胞生长,瘤质量抑瘤率达69.15%。2、毒副作用:小鼠用药前后一般状况良好,NS组饮食减少、消瘦严重,治疗组饮食、行动正常,未见腹泻、皮下淤血。本实验经统计学分析各组间白细胞数目均无差异。3、免疫组化结果(1)微血管密度(MVD):NS对照组微血管阳性表达明显高于各用药组,与联合用药组之间差异最显著(PBD=0.001)。联合用药组较MTD组间有统计学意义(PBC=0.012),而LDM组与联合用药组、MTD组与NS组均无统计学意义(PAB= 0.525,PCD=0.208)。(2)血小板反应蛋白-1(TSP-1):联合用药组TSP-1阳性表达的评分最高,NS组评分最低。经统计学分析,联合用药组TSP-1阳性表达高于MTD、NS两组(PBC=0.004,PBD=0.001),LDM组也高于MTD、NS两组(PAC=0.021,PAD=0.004)。LDM组与联合用药组间未见明显差异(PAB=0.548>0.05)。4、细胞凋亡结果:联合用药组凋亡细胞数目明显多于其他各实验组。经统计学分析结果显示:NS组与各用药组之间均存在差别,联合用药组较其它两种用药方法(MTD、LDM)均有统计学意义(PAB=0.004,PBC=0.013),但最大耐受量组和低剂量节律化疗组之间未见差别(PAC=0.666)。结论:环磷酰胺最大耐受量联合低剂量节律化疗可抑制肿瘤组织生长、抗肿瘤血管生成、促进肿瘤细胞凋亡,不增加毒副作用。

全文目录


摘要  6-8Abstract  8-10前言  10-11材料与方法  11-15  一、材料  11-12  二、方法  12-15结果  15-20  (一) CTX 对肿瘤体积生长的抑制作用  15-16  (二) 瘤重与抑瘤率  16-17  (三)、毒副作用  17-18  (四)、病理切片检测结果  18-20讨论  20-24结论  24-25参考文献  25-27综述  27-36  参考文献  33-36附录  36-37附图  37-40致谢  40

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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