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甲基苯丙胺在家兔体内死后再分布规律的研究

作　者: 李学博
导　师: 莫耀南
学　校: 河南科技大学
专　业: 法医学
关键词: 法医毒理学 死后再分布 甲基苯丙胺 固相微萃取 气相色谱质谱
分类号: D919
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


死后再分布(postmortem redistribution PMR)是指死后体内毒(药)物在组织、器官以及体液间发生移动的现象。在机体死后不久毒(药)物的扩散作用就开始了,以致于死后不同时间不同组织、器官内的毒药物浓度不尽相同,传统的检材选取方法可靠性值得怀疑。PMR的发生机制十分复杂,目前提出的主要有:梯度浓度扩散,死后血液的流动,体内药物代谢动力学作用,腐败作用等。死后再分布的机制十分复杂,同一种毒物中毒,在不同的体液及组织器官内PMR可能同时涉及多种机制。由于甲基苯丙胺(Methamphetamine MA)滥用现象极为严重,中毒及致死的案件时有发生,根据其化学性质推断,理论上MA存在PMR的可能,因此本课题选取MA做研究对象。目的拟建立生物检材中MA快速、灵敏的提取、检测方法,研究MA在家兔体内是否存在PMR现象,并阐述其PMR的变化趋势,为此类毒品中毒案件的法医学检验鉴定提供理论依据和有效检验方法。方法选择30只实验家兔分6组,以MA溶液按照30mg/kg的量灌胃1~4组、以60mg/ml的MA乙醇溶液按照30mg/kg的量液灌胃5、6组,以窒息方式处死后以仰卧位置于15℃环境内,分别于死后0h、6h、24h、48h取心血、外周血、尿液及肺组织、肝组织、脑组织待测1~4组,于死后6h、48h检验5、6组。以SPME-GC-MS法检测家兔不同体液及组织中的MA,使用100μm聚二甲基硅氧烷萃取头萃取,1-萘胺(1-Naphthylamine)作为内标,以气相色谱质谱选择离子法进行检测。所得数据用SPSS13.0软件进行方差分析和多样本均数多重比较的t检验。结果MA在急性中毒家兔体内存在PMR现象,家兔死亡后0h~48h内心血、外周血、肝组织内MA浓度逐渐出现不同程度的升高(P<0.01),肺组织内浓度先升高后下降(P<0.05),尿液内的浓度轻度下降(P<0.05),脑组织浓度变化较小(P>0.05),死后早期浓度变化较晚期明显。MA合并乙醇组家兔死亡后6h、48hMA在急性中毒家兔心血、肝组织中有升高趋势(P<0.05),PMR现象较单独使用MA时明显增强。结论1.建立了生物检材中MA的SPME-GC-MS快速提取、检测方法。2.急性中毒家兔死后体液及组织中MA出现死后再分布现象,MA含量随死后时间的延长,出现不同程度死后再分布变化,脑组织浓度变化较小。3.要准确地判断死亡当时的体液和组织中的MA含量,取材检测时应考虑死后再分布因素的影响。

全文目录


摘要  2-4
ABSTRACT  4-6
符号表  6-10
第1章 生物检材中 MA 快速检测方法的建立  10-21
  1.1 概述  10
  1.2 材料与试剂  10-11
    1.2.1 仪器  10-11
    1.2.2 实验动物  11
    1.2.3 药品及试剂  11
  1.3 GC/MS 检测条件  11
  1.4 溶液的配制  11-12
    1.4.1 MA 标准储备液的配制  11
    1.4.2 内标1-萘胺储备液的配制  11-12
    1.4.3 MA 标准工作液的配制  12
    1.4.4 内标1-萘胺工作液的配制  12
    1.4.5 氢氧化钾/氯化钠溶液的配制  12
  1.5 检材的处理  12-13
    1.5.1 血样的处理  12
    1.5.2 尿样的处理  12-13
    1.5.3 组织的处理  13
  1.6 结果  13-18
    1.6.1 色谱图与质谱图  13-14
    1.6.2 标准曲线的制作  14-15
    1.6.3 回收率的检测  15-16
    1.6.4 精密度的检测  16-17
    1.6.5 萃取平衡时间的选择  17-18
    1.6.6 pH 值及盐离子浓度的选择  18
  1.7 SPME-GC-MS 法实际案例应用  18
  1.8 讨论  18-21
    1.8.1 SPME 萃取的优越性  18-19
    1.8.2 SPME-GC-MS 法检测生物检材中MA 的优点  19-20
    1.8.3 SPME-GC-MS 检测方法的不足  20-21
第2章 MA 在家兔体内的死后再分布  21-31
  2.1 概述  21-22
  2.2 材料与试剂  22
    2.2.1 仪器  22
    2.2.2 实验动物  22
    2.2.3 药品及试剂  22
  2.3 溶液的配制  22-23
    2.3.1 MA 标准品储备液的配制  22
    2.3.2 内标1-萘胺储备液的配制  22-23
    2.3.3 MA 标准品工作液的配制  23
    2.3.4 内标1-萘胺工作液的配制  23
    2.3.5 氢氧化钾/氯化钠溶液的配制  23
  2.4 GC/MS 检测条件  23-24
    2.4.1 色谱图与质谱图  23
    2.4.2 标准曲线的制备  23-24
  2.5 实验用冰毒的浓度检测  24
  2.6 动物模型的建立  24-25
  2.7 检材的处理  25
    2.7.1 血样的处理  25
    2.7.2 尿样的处理  25
    2.7.3 组织的处理  25
  2.8 数据处理  25-26
  2.9 结果  26-28
    2.9.1 不同时间点MA 在不同组织的浓度  26
    2.9.2 MA 在家兔体内的浓度变化趋势  26-28
  2.10 讨论  28-31
    2.10.1 扩散作用  28-29
    2.10.2 血液运动及状态的改变  29-30
    2.10.3 腐败及微生物的作用  30
    2.10.4 毒（药）物的代谢动力学  30
    2.10.5 其他因素  30-31
第3章 乙醇对 MA 死后再分布的影响  31-35
  3.1 概述  31
  3.2 材料与试剂  31
  3.3 GC/MS 检测条件  31
  3.4 溶液的配制  31-32
    3.4.1 实验用MA 的配制  31-32
    3.4.2 其他溶液的配制  32
  3.5 乙醇与MA 中毒模型的建立  32
  3.6 检材的处理方法  32-33
    3.6.1 血样的处理  32
    3.6.2 尿样的处理  32-33
    3.6.3 组织的处理  33
  3.7 数据的处理  33
  3.8 结果  33-34
  3.9 讨论  34-35
第4章 结论  35-37
  4.1 建立了生物检材中MA 的快速定量检测方法  35
  4.2 MA 在急性中毒家兔体内的存在PMR 现象  35
  4.3 乙醇对MA 的PMR 现象有所加强  35
  4.4 本文对PMR 研究的创新与不足  35
  4.5 PMR 对取材的指导意义  35-37
参考文献  37-39
缩略语词汇表  39-40
附录 综述 苯丙胺的研究进展  40-52
致谢  52-53
攻读硕士学位期间的研究成果  53

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