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呋喃丹的法医毒物动力学研究

作　者: 吴苗苗
导　师: 贠克明
学　校: 山西医科大学
专　业: 法医学
关键词: 法医毒理学 呋喃丹 呋喃酚 死后分布 毒物分解动力学 埋葬动力学
分类号: D919
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的1.建立呋喃丹的死后分布、保存检材和埋葬尸体（犬）中的分解动力学研究动物模型;2.研究呋喃丹在大鼠、犬体内的死后分布以及其在保存检材、埋葬尸体（犬）中的分解动力学规律,为呋喃丹中毒（死）案件的法医学鉴定提供实验依据。方法1.死后分布雄性大鼠12只,随机分为2组。经灌胃分别匀速注入2LD50（22mg/kg）和4LD50（44mg/kg）呋喃丹。待呼吸和心跳全部消失时,迅速解剖动物,取心血、心、肝、脾、肺、肾、脑冷冻保存,待检。GC/MS法定性,GC法定量检测其中呋喃丹含量。健康犬9只,随机分为3组,4LD50（13.50mg/kg）呋喃丹灌胃,观察动物反应。3组动物分别于死亡当时、室温放置1d、7d解剖取心、肝、脾、肺、肾、脑、右前肢肌、右后肢肌、胸肌、胃组织、心血、胆汁、玻璃体液。酸性二氯甲烷提取,GC/MS法定性定量检测其中呋喃丹、呋喃酚含量。2.保存检材中的分解动力学2.1染毒犬血、肝中呋喃丹分解动力学:健康犬6只,4LD50（13.50mg/kg）呋喃丹灌胃,观察动物反应。待心跳、呼吸、脉搏消失后,立即解剖,取其心血和肝。每只犬心血和肝分三等份,分别置于20℃、4℃、-20℃保存。分别于0h、1d、2d、3d、4d、7dGC/MS法定性,GC法定量检测其中呋喃丹含量。健康犬3只,4LD50（13.50mg/kg）呋喃丹灌胃,观察动物反应。实验犬心跳、呼吸、脉搏消失后,立即解剖,取其心血和肝。心血中加氟化钠至1%,肝脏加4%甲醛溶液固定,20℃保存。分别于0h、2d、4d、7dGC/MS法定性,GC法定量检测其中呋喃丹含量。2.2尸血中添加呋喃丹的分解动力学:尸血1000mL,添加80mg呋喃丹,分为四等份,其中三份分别置于20℃、4℃、-70℃保存;另一份添加1%的氟化钠。分别于0h、2d、5d、8d、32d、64d、96d、152d提取检材,GC/MS法定性定量检测呋喃丹和呋喃酚。3.埋葬尸体中的分解动力学3.1埋葬尸体中呋喃丹分解动力学:健康犬12只,4LD50剂量呋喃丹灌胃染毒。待心跳、呼吸、脉搏消失后,装入塑料袋,不封口,埋于太原市东山实验基地。分别于14d、40d、62d、153d挖出后,解剖,取材,GC/MS法定性定量检测呋喃丹和呋喃酚。3.2埋葬方式对呋喃丹在埋葬尸体中分解动力学的影响:健康犬9只,4LD50剂量呋喃丹灌胃染毒。待心跳、呼吸、脉搏消失后,随机分成3组,分别装入塑料袋、编织袋和木箱（棺材）中埋于实验基地，62d后挖出解剖取材，GC/MS法定性定量检测呋喃丹和呋喃酚。3.3染毒剂量对呋喃丹在埋葬尸体中分解动力学的影响：健康犬12只，随机分为4组，分别以LD50、2LD50、4LD50、8LD50灌胃染毒。待心跳、呼吸、脉搏消失后，分别装入塑料袋中，埋于实验基地，62d后挖出，解剖，取材，GC/MS法定性定量检测呋喃丹和呋喃酚。结果1．动物表现实验组大鼠在经口灌胃后出现中毒症状，染毒10±30min内实验大鼠死亡，临床表现与有机磷农药中毒相似，即抽搐、流涎、流泪、湿毛、大小便失禁，然后死亡。实验犬染毒0.25±0.10h出现症状，于1.0±0.5h死亡，中毒症状表现为：流涎、反胃、口吐白沫、大小便失禁、肌束震颤、抽搐。2．GC和GC/MS检测3．死后分布3.1呋喃丹在大鼠体内死后分布各组织脏器呋喃丹含量由高到低分别为（LSD-t检验，P<0.05）：（1）2LD50组：肺、肝>心血、脑、心、肾、脾；（2）4LD50组：肺、肝、肾>心血、心、心血、脑、脾。呋喃丹在含血丰富的器官如肺、肝中含量较其它组织和血液高，脾脏中含量最低。4LD50组各脏器呋喃丹的含量普遍比2LD50组中各脏器呋喃丹的含量低。3.2呋喃丹在犬体内死后分布及在尸体中的稳定性死亡当时，各脏器组织中呋喃丹含量由高到低分别为：胃＞心血、肝、肺＞脾、心、右前肢肌、肾、玻璃体液、脑＞胸肌、右后肢肌、胆汁（LSD-t检验，P<0.05）。呋喃酚在各脏器组织中的含量从高到低依次为：胃＞肝＞心血、心＞肾、脾，其余脏器均未检出。室温放置1d、7d后，心血、心、肝、脾、肺、肾、胃中呋喃丹含量较死亡当时未见明显减少（t检验P＜0.05），玻璃体液、肌肉、脑中未检出呋喃丹。随放置时间延长死亡当时未检出呋喃酚的胆汁、肺组织中可检出呋喃酚，死亡当时检出呋喃酚的胃、肝、心血、心、肾、脾中呋喃酚含量呈升高趋势。4．保存检材中的分解动力学4.1染毒致死犬（血、肝）呋喃丹的分解动力学：不同条件保存血和肝中呋喃丹含量均呈下降趋势。保存第7d，不同温度条件下血中均检测不出呋喃丹，常温下肝脏中也未检测出呋喃丹。在不同温度条件下，-20℃保存犬血、肝呋喃丹含量相对20℃、4℃下降慢（t检验，P＜0.05）。20℃和20℃（1％NaF）保存条件下血中呋喃丹含量在2d分别下降至最初浓度的63.9％和49.5％，4d，分别下降至最初浓度的29.5％和14.8％。20℃和20℃（4%甲醛）保存条件下，肝中呋喃丹含量在2d分别下降至最初浓度的31.5％和45.7％，4d，分别下降至最初浓度的2.8％和18.2％，7d，分别下降至最初浓度的0％（未检出）和7.4％。4.2保存尸体血中呋喃丹的分解动力学：不同保存条件下尸体血中添加呋喃丹含量均呈下降趋势，20℃、4℃、-70℃和20℃（1%NaF）条件下分别于2d、2d、5d、2d显著下降至最初浓度的79.7％、72.6％、82.1％、79.5％，于152 d，分别下降至最初浓度的22.9％、39.0％、62.3％、0％（未检出），呋喃丹的分解符一室开放模型一级速率过程，可用CT=C0e-KeT表示，其分解半衰期分别为61.4d、135.3d、190.9d和150.3d。0h，添加呋喃丹尸体血中即可检测出呋喃酚，且呋喃酚含量随时间呈增加趋势（t检验，P＜0.05），20℃、4℃、-70℃和20℃（1% NaF）条件下，0h呋喃酚含量2.06±0.39μg/mL，152d，分别增加到26.97±4.28μg/mL、25.47±8.88μg/mL、18.49±4.84μg/mL、15.99±3.00μg/mL。5．埋葬尸体的分解动力学埋葬0d、14d、40d、62d，153d呋喃丹含量呈先升高后下降趋势，除右前肢肌肉和胃外，其余脏器呋喃丹含量均在14d升至最高。埋葬后40d，右后肢肌肉、胸肌、肺、脑中未检测出呋喃丹。62d，右前肢肌肉、右后肢肌肉、胸肌、肝、肺、脑中未检测出呋喃丹。153d，只有胃中可检出呋喃丹及呋喃酚。0h，心血、心、肝、脾、肾、胃中均检出呋喃酚，且呋喃酚含量随时间呈增加趋势。40d时，在未检出呋喃丹的心血中检测出呋喃酚。62d时，在未检出呋喃丹的右前肢肌肉和肝中检出了呋喃酚。不同埋葬方式研究显示，埋葬62d时，塑料袋埋葬方式下，心、脾、肾、胃中可检出呋喃丹，而编织袋条件下肾、胃中可检出，木箱（棺材）条件下只有胃可检出。塑料袋和编织袋条件下心、肝、脾、肾、胃可检出呋喃酚，木箱（棺材）条件下心、肝、脾、胃可检出呋喃酚。不同染毒剂量的研究结果显示，埋葬62d时，1LD50和2LD50剂量组各脏器中均未检出呋喃丹、呋喃酚。4LD50剂量组心、脾、肾、胃中检测出呋喃丹，右前肢肌肉、心、肝、脾、肾、胃中检出了呋喃酚。8LD50剂量组右后肢肌肉、心、肝、脾、肺、肾、胃中检测到呋喃丹，右前肢肌肉、右后肢肌肉、心、肝、脾、肺、肾、脑、胃中检测出呋喃酚。结论1．本实验采用不同剂量呋喃丹灌胃染毒，建立了呋喃丹的死后分布、保存检材和埋葬尸体中的分解动力学动物（研究）模型，可应用于呋喃丹中毒（死）的法医学检验和法医毒物动力学研究。2．本研究建立了生物检材中呋喃丹的提取和GC-NPD、GC/MS检测方法，提取回收率、线性范围、检测灵敏度均达生物检材中毒（药）物检验要求，可应用于呋喃丹中毒（死）案件的法医学检验和法医毒物动力学研究。3．染毒致死大鼠体内呋喃丹含量由高到低分别为（LSD-t检验，P<0.05）：（1）2LD50组：肺、肝>心血、脑、心、肾、脾；（2）4LD50组：肺、肝、肾>心血、心、心血、脑、脾。提示，在实际中毒案件的法医鉴定中应合理取材，全面分析，以保证鉴定结果的准确。染毒致死犬死亡当时尸体内呋喃丹含量由高到低分别为：胃＞心血、肝、肺＞脾、心、右前肢肌、肾、玻璃体液、脑＞胸肌、右后肢肌、胆汁（LSD-t检验，P<0.05）。呋喃丹的代谢产物呋喃酚在各脏器组织的含量从高到低依次为：胃＞肝＞心血、心＞肾、脾，其余脏器均未检出。室温放置7d，体内仍可检出呋喃丹和呋喃酚。提示呋喃丹在体内代谢较快，但在尸体内有一定的稳定性。呋喃丹中毒死亡案件采取检材时，可提取胆汁、肺、胃、脾、肝，不适宜提取玻璃体液、肌肉、脑，并应当同时检测呋喃丹和呋喃酚含量，为死因判定提供实验依据。4．不同条件保存时，染毒犬血、肝中呋喃丹及尸体血中添加呋喃丹均可发生分解。保存犬血、肝中呋喃丹分解较快，第7d，不同温度条件下血中均检测不到呋喃丹，常温下肝脏中也未检测出呋喃丹。而尸体血添加呋喃丹分解相对较慢，20℃、4℃、-70℃、20℃（加NaF至1%）保存条件下呋喃丹的分解半衰期分别为61.4d、135.3d、190.9d、150.3d。呋喃丹中毒法医学检验中应注意低温保存检材，并同时检测呋喃丹和呋喃酚。5．呋喃丹在保存尸体血中的分解可用一室开放模型一级速率过程描述，可用CT=C0e-KeT表示，根据此方程计算的理论值与实测值符合情况良好。可用尸体血中呋喃丹分解动力学方程和参数推测采取检材当时的血中呋喃丹浓度。6．呋喃丹在埋葬尸体中可发生分解，分解较快。埋葬153d后，只有胃中可检出呋喃丹及呋喃酚。埋葬153d内，除右前肢肌肉和胃外，其余脏器呋喃丹含量呈先升高后下降趋势，14d时最高。不同埋葬方式以及不同染毒剂量对其分解影响较大。在进行呋喃丹中毒（死）埋葬尸体法医学鉴定时，应根据埋葬时间、埋葬方式、服毒剂量等因素对尸体中呋喃丹分解的影响，结合服毒方式和生前抢救情况，综合判断尸体挖掘的价值和可能性，并及早进行尸体挖掘和检验，全面取材，及早进行呋喃丹和呋喃酚的定性、定量分析。

全文目录


中文摘要  5-9
英文摘要  9-15
前言  15-17
第一部分 呋喃丹在动物体内的死后分布研究  17-26
  1 材料与方法  17-18
  2 结果  18-26
第二部分 呋喃丹在保存检材中的分解动力学研究  26-39
  1 材料与方法  26-27
  2 结果  27-39
第三部分 呋喃丹在埋葬犬尸体内的分解动力学研究  39-47
  1 材料与方法  39
  2 结果  39-47
讨论  47-52
小结  52-53
参考文献  53-55
综述  55-69
  参考文献  65-69
个人简介  69-70
致谢  70

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