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真菌寡聚糖的制备、分离及诱导抗性活性机理的初步研究

作　者: 石瑛
导　师: 杜昱光
学　校: 中国科学院大连化学物理研究所
专　业: 化学工程
关键词: 寡聚糖制备分离结合位点诱导抗性
分类号: O636.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
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内容摘要

来源于真菌和植物的寡聚糖，在调节植物生长、发育及诱导植物抗病性方面，有着重要的作用。本文在实验室已有研究成果的基础上，对以DL603菌为原料的寡聚糖进行了制备、分离及诱导抗性机理的初步研究。通过离子交换层析及凝胶过滤层析的方法，对DL603菌的酶解产物进行了分离；并结合大豆子叶法测定了分离产物的活性，确定了其中具有诱导植物抗病性的活性寡聚糖成分。建立起高效液相色谱分析寡聚糖的方法，并对分离得到的寡聚糖进行了纯度组成的分析；同时测定了诱导活性最高的寡聚糖的单糖组成为氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖，提供了该寡聚糖基本的结构信息。将荧光标记技术与蔗糖密度梯度离心技术结合，应用于寡聚糖与植物细胞结合的研究；并且证明了DL603菌来源的寡聚糖与棉花细胞的结合位点是在细胞的质膜上。测定了寡聚糖处理引起的棉花抗性相关酶活性的变化；结合棉花黄萎病毒素的处理，初步分析了寡聚糖与毒素在诱导抗病性上的关系。

全文目录

第一章文献综述  8-21
  1-1．引言  8-10
  1-2．寡糖素的研究概况  10-14
  1-3．寡糖素诱导的植物抗性反应  14-21
第二章寡聚糖的制备  21-30
  引言  21
  2-1．实验材料  21
  2-2．实验仪器与试剂  21-22
  2-3．实验方法  22-25
    2-3-1．寡聚糖激发子的制备  22-23
    2-3-2．定量方法  23-24
    2-3-3．寡聚糖激发子活性测定方法——大豆子叶法  24-25
  2-4．结果与讨论  25-29
    2-4-1．离子强度对G603酶降解DL603菌的影响  25-26
    2-4-2． pH值对G603酶降解DL603菌的影响  26-27
    2-4-3．温度对G603酶降解DL603细胞壁的影响  27-28
    2-4-4．酶解时间的测定  28-29
  2-5．小结  29-30
第三章寡聚糖的分离及其鉴定  30-43
  引言  30
  第一节寡聚糖的分离  30-37
    3-1-1．实验材料  30
    3-1-2．实验仪器与试剂  30-31
    3-1-3．实验方法  31
    3-1-4．结果与讨论  31-36
      3-1-4-1． DL603菌酶解产物的离子交换层析分离及生物活性测定  31-33
      3-1-4-2．寡聚糖混合物的凝胶过滤层析分离及生物活性测定  33-36
    3-1-5．小结  36-37
  第二节寡聚糖的高效液相色谱分析  37-43
    3-2-1．实验仪器与试剂  37
    3-2-2．实验方法  37
    3-2-3．实验结果  37-42
      3-2-3-1．寡聚糖纯度及种类分析  37-40
      3-2-3-2．活性寡聚糖的单糖组成分析  40-42
    3-2-4．小结  42-43
第四章寡聚糖诱导抗性机理的初步研究  43-58
  引言  43
  第一节寡聚糖与植物细胞作用的初步研究  43-49
    4-1-1．实验材料  43
    4-1-2．实验仪器及试剂  43-44
    4-1-3．实验方法  44-46
      4-1-3-1．寡聚糖的荧光标记  44-45
      4-1-3-2．蔗糖密度梯度离心  45
      4-1-3-3．离心后的分装  45-46
    4-1-4．结果与讨论  46-47
    4-1-5．小结  47-49
  第二节寡聚糖激发子诱导的棉花抗性反应  49-58
    4-2-1．实验材料  49
    4-2-2．实验仪器与试剂  49
    4-2-3．实验方法  49-52
      4-2-3-1．棉花黄萎病毒素溶液的制备  49-50
      4-2-3-2．棉花抗性相关酶的测定  50-52
    4-2-4．结果与讨论  52-57
      4-2-4-1．棉花幼苗经浸根处理后发生的萎蔫现象  52-53
      4-2-4-2．苯丙氨酸解氨酶活性的测定  53-54
      4-2-4-3．过氧化物酶活性的测定  54-56
      4-2-4-4．过氧化氢酶活性的测定  56
      4-2-4-5．多酚氧化酶活性的测定  56-57
    4-2-5．小结  57-58
结论  58-60
参考文献  60-70
名词对照表  70-72
作者简介  72
发表文章  72-73
致谢  73

真菌寡聚糖的制备、分离及诱导抗性活性机理的初步研究

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