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垂子买麻藤和一株放线菌代谢产物分离纯化、结构鉴定及生物氯化转化特性研究

作　者: 姜冰
导　师: 向文胜
学　校: 东北农业大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 垂子买麻藤放线菌新化合物生物卤化
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 151次
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内容摘要

从天然产物中筛选发现新型结构的活性化合物是天然产物研究的重点领域。传统的天然产物化学研究内容主要为通过萃取、层析以及色谱制备等手段进行分离纯化,获得达到一定纯度的单体化合物,测定其UV、IR、MS、NMR等谱学数据,确定化合物的结构;再进行体外或体内生物活性及作用机理研究。本文运用经典的植化研究方法对垂子买麻藤(Gnetum pendulum)中的化合物进行提取分离以及结构鉴定。应用萃取、正相硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析多种分离手段,一共分离得到四个化合物,应用现代波谱技术鉴定了化合物的结构。最终确定来自此植物的四个化合物是:3,5-二羟基-4-甲氧基均二苯代乙烯(Ⅰ)、银松素(Ⅱ)、丹叶大黄素(Ⅲ)、射干乙素(Ⅳ)。其中化合物Ⅰ为首次报道的一全新的化合物。此外本研究以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和藤黄微球菌(Sarcina lutea)为活性检测菌,利用活性跟踪的办法对一株放线菌发酵液的活性成分进行分离以及化合物的结构鉴定。应用正相硅胶柱层析、反相柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析以及反相HPLC(High Performance Liquid Chromatography)制备等多种层析技术,一共分离得到七个化合物,应用现代波谱技术鉴定化合物的结构。这几个化合物分别为:8-氯-染料木素(1)、染料木素(2)、大豆苷元(3)、3’,4’,7-三羟基异黄酮(4)、芒柄花黄素(5)、5-羟基-5甲基-2-己烯酸(6)和腺苷(7)。其中化合物5-羟基-5-甲基-2-己烯酸(6)和腺苷(7)具有很好的抗菌活性。在分离得到的化合物中,发现8-氯-染料木素(1)可能是由染料木素(2)由放线菌经过生物氯化得到的,为了证实这一观点,对不同发酵期间两种物质的含量进行了研究,发现在发酵达到第三天时,染料木素大量减少,与此同时8-氯-染料木素的含量增加,说明此放线菌具有生物氯化的特性。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
1 引言  7-14
  1.1 天然药物在现代药物中的地位  7-8
  1.2 未来天然药物研发的重点  8-10
  1.3 天然产物的研究新方法  10-11
    1.3.1 高速逆流色谱分离技术  10
    1.3.2 液-质、液-核、液-质-核联用技术  10-11
  1.4 生物卤化的研究进展  11-13
  1.5 本研究的内容和意义  13-14
2 垂子买麻藤化学成分的研究  14-23
  2.1 实验部分  14-17
    2.1.1 仪器、材料与试剂  14
    2.1.2 材料的来源、鉴定及处理  14-15
    2.1.3 化合物的提取和分离  15-16
    2.1.4 分离流程图  16-17
  2.2 研究结果  17-23
    2.2.1 化合物的结构鉴定  17-20
    2.2.2 理化与光谱数据  20-21
    2.2.3 化合物结构  21-23
3 放线菌发酵液中具有生物活性成分的研究  23-33
  3.1 实验部分  23-28
    3.1.1 仪器、材料与试剂  23
    3.1.2 生物活性检测方法的建立  23-24
    3.1.3 化合物的提取和分离  24-26
    3.1.4 分离流程  26-28
  3.2 研究结果  28-33
    3.2.1 化合物的结构鉴定  28-31
    3.2.2 理化与光谱数据  31-32
    3.2.3 化合物结构  32-33
4 放线菌生物氯化特性的研究  33-37
  4.1 仪器、材料与试剂  33
  4.2 实验方法  33-34
    4.2.1 菌株的斜面培养  33
    4.2.2 菌株的发酵培养  33
    4.2.3 样品分析  33-34
  4.3 研究结果与讨论  34-37
致谢  37-38
参考文献  38-42
附录  42-61
攻读硕士学位期间发表的学术论文  61

垂子买麻藤和一株放线菌代谢产物分离纯化、结构鉴定及生物氯化转化特性研究

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