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虾青素对凡纳滨对虾的免疫防护及对虾养殖的水质监测和WSSV检测

作　者: 王慧春
导　师: 管越强
学　校: 河北大学
专　业: 水生生物学
关键词: 凡纳滨对虾虾青素免疫防护白斑综合症病毒(WSSV) 抗氧化酶基因水体理化因子
分类号: S968.22
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

将虾青素添加到凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)配合饲料中,从抗氧化角度入手,在个体、细胞和分子水平研究虾青素对凡纳滨对虾免疫防护和抗氧化酶基因的影响,以期全面评价虾青素在改善凡纳滨对虾的生理功能和提高凡纳滨对虾抗病力等方面的作用,进而推测虾青素的作用机理。虾青素对感染WSSV的凡纳滨对虾的免疫防护作用。评价指标有：血液免疫指标(血细胞计数、血细胞吞噬百分比、血细胞吞噬指数、血清抗菌活力、血清溶菌活力、血清酚氧化酶活力、血清抗超氧阴离子自由基活力),WSSV感染后的累积死亡率及相对免疫保护率。实验证明：饲料中添加80 mg/kg虾青素可显著提高实验组对虾的血液学指标(p<0.05)；实验组中感染WSSV的凡纳滨对虾累计死亡率为76.3%,免疫保护率为23.7%：虾青素对凡纳滨对虾抗氧化酶基因转录的影响。采用β-actin作为内参,用半定量PCR法研究添加虾青素作为抗氧化剂对凡纳滨对虾肝胰腺MnSOD、CAT和GPX 3种抗氧化酶基因转录水平的影响。结果表明,饲料中添加80mg/kg虾青素能明显提高抗氧化物酶系统包括SOD、CAT、GPX的mRNA水平(p<0.05)。针对养殖对虾病害频发的现状,本实验还初步研究了中国明对虾(Fenaeus chinensis)养殖水体理化因子变化与对虾白斑综合症病毒(WSSV)感染率的相关性。通过对养成池的水质监测及对虾WSSV检测,发现在WSSV感染率较高的的8月份,水体溶解氧迅速下降,温度处于WSSV易感的温度范围,pH值变化剧烈,,铵盐和硝酸盐含量骤然升高。这说明恶化的水体环境能增加对虾WSSV的易感性,或使潜伏感染WSSV的对虾产生应激反应引起急性感染死亡

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-11
第1章绪论  11-26
  1.1 免疫增强剂对甲壳动物免疫功能的影响  11-17
    1.1.1 甲壳动物免疫学研究进展  11-13
    1.1.2 甲壳动物免疫增强剂研究进展  13-15
    1.1.3 虾青素对甲壳动物的影响及作用机理  15-17
  1.2 抗氧化酶基因的研究进展  17-21
    1.2.1 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)  18-19
    1.2.2 过氧化氢酶(Catalase,CAT)  19-20
    1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)  20-21
  1.3 养殖水体环境与对虾白斑综合症关系的研究进展  21-25
    1.3.1 白斑综合症病毒(WSSV)研究进展  21-23
    1.3.2 温度与WSSV爆发的关系  23
    1.3.3 盐度与WSSV爆发的关系  23-24
    1.3.4 溶解氧(DO)和化学需氧量(COD)与WSSV爆发的关系  24
    1.3.5 pH值与WSSV爆发的关系  24
    1.3.6 含氮化合物与WSSV爆发的关系  24-25
  1.4 实验的目的和意义  25-26
第2章虾青素对凡纳滨对虾非特异性免疫因子的影响  26-41
  引言  26
  2.1 材料与方法  26-33
    2.1.1 实验材料  26-28
    2.1.2 方法  28-33
  2.2 结果和分析  33-38
    2.2.1 虾青素对凡纳滨对虾血细胞数量的影响  33
    2.2.2 虾青素对凡纳滨对虾血细胞吞噬活性的影响  33
    2.2.3 虾青素对凡纳滨对虾血清抗菌活力的影响  33
    2.2.4 虾青素对凡纳滨对虾血清溶菌活力的影响  33
    2.2.5 虾青素对凡纳滨对虾血清酚氧化酶活力的影响  33
    2.2.6 虾青素对凡纳滨对虾血清抗超氧阴离子自由基活力的影响  33-36
    2.2.7 WSSV实感染验  36-38
  2.3 讨论  38-41
    2.3.1 虾青素对凡纳滨对虾血细胞数量、吞噬活性和血清抗超氧阴离子活力的影响  38-39
    2.3.2 虾青素对凡纳滨对虾酚氧化酶活力的影响  39
    2.3.3 虾青素对凡纳滨对虾抗菌活力和溶菌活力的影响  39-40
    2.3.4 虾青素对感染WSSV的凡纳滨对虾的免疫防护  40-41
第3章虾青素对凡纳滨对虾抗氧化酶基因转录的影响  41-49
  引言  41
  3.1 材料和方法  41-45
    3.1.1 实验材料  41-42
    3.1.2 实验方法  42-45
  3.2 结果与分析  45-48
    3.2.1 虾青素对凡纳滨对虾MnSOD mRNA表达的影响  45-46
    3.2.2 虾青素对凡纳滨对虾CAT mRNA表达的影响  46
    3.2.3 虾青素对凡纳滨对虾GPX mRNA表达的影响  46-48
  3.3 讨论  48-49
第4章对虾WSSV感染与水体理化因子的关系  49-56
  引言  49
  4.1 材料和方法  49-50
    4.1.1 实验材料  49-50
    4.1.2 实验方法  50
  4.2 结果与分析  50-54
    4.2.1 水体温度、pH值、溶解氧连续监测  50-51
    4.2.2 水体理化因子的月份变化  51-52
    4.2.3 水体理化因子的昼夜变化  52-53
    4.2.4 WSSV的PCR检测  53-54
    4.2.5 对虾WSSV发生与水体理化因子变化的关系  54
  4.3 讨论  54-56
第5章结论  56-57
参考文献  57-66
附录  66-69
致谢  69-70
攻读学位期间取得的科研成果  70

虾青素对凡纳滨对虾的免疫防护及对虾养殖的水质监测和WSSV检测

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