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决明子中橙黄决明素的提取分离纯化及在正常大鼠体内的药代动力学参数研究

作　者: 戴迎春
导　师: 邓楠
学　校: 湖南师范大学
专　业: 生药学
关键词: 橙黄决明素高效液相色谱法提取分离纯化药代动力学参数
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：研究安徽决明子中有效降脂成分橙黄决明素的提取、分离、纯化工艺及含量测定方法,并初步探讨橙黄决明素在正常大鼠体内的药代动力学参数,旨在为决明子中药材及橙黄决明素的进一步开发利用提供有价值的参考。方法：(1)采用L9(34)正交试验设计,考察四因素(乙醇浓度、提取时间、提取次数及乙醇用量)三水平对橙黄决明素提取率的影响,建立决明子中橙黄决明素的优化提取方案；(2)采用高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD)测定决明子中橙黄决明素含量；(3)采用硅胶柱层析法分离纯化决明子醇提物中橙黄决明素,薄层色谱定性,高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD)纯度检查；(4)以Sprague-Dawley正常雄性大鼠为实验动物,采用灌胃给药方法给予决明子浸膏和橙黄决明素单体,于不同时间点断尾取血,采用液-液萃取的血样处理方法,建立适于橙黄决明素样品测定的HPLC-DAD分析法测定橙黄决明素在血浆中的浓度,数据代入药动学3p97统计软件处理,绘制药-时曲线,得主要药动学参数。结果：(1)决明子中橙黄决明素的最优提取条件为：提取温度90℃,乙醇浓度90%,溶剂用量1：6(料液比),回流提取2次,1 h·次-1,在此条件下橙黄决明素的提取效率最高,为1.2424 mg·g--；(2)采用HPLC测定决明子中橙黄决明素的含量,结果表明橙黄决明素在0.3048～3.0480μg与峰面积线性关系良好(r=0.9998)；平均回收率100.72%,RSD为1.57%；日内与日间精密度RSD均小于3.0%；(3)经硅胶柱层析常压分离,石油醚(60～90℃)-丙酮=9：1(v/v)洗脱,丙酮重结晶后得到的橙黄决明素纯度可≥99%；(4)橙黄决明素在大鼠体内药代动力学模型符合二室模型,其在体内迅速吸收进入血液循环,决明子浸膏组Tpeak为17.20 min, Cmax为2.57 mg·L-1,T1/2β为4.71 h,CLz为0.73 L·h-Kg-1, V/F(c)为1.73 L·Kg-1,橙黄决明素药时曲线出现双峰现象；橙黄决明素单体组Tpeak为16.31 min, Cmax为3.95 mg·L-1,T 1/2β约为5.16 h,CLz为0.20L·h·Kg-1, V/F(c)为0.39 L·Kg-1。结论：(1)乙醇浓度对决明子中橙黄决明素的提取率有显著影响。A3B1C2D1提取工艺及硅胶柱层析分离纯化方法稳定可行,成本低,可为橙黄决明素的生产提供理论依据；(2)HPLC-DAD测定决明子药材中及大鼠血浆中橙黄决明素含量的方法准确、简便、重现性好,同时不受其它干扰物的影响,可用于决明子的质量控制及橙黄决明素的体内定量分析；(3)橙黄决明素体内过程药时曲线符合二室模型；正常大鼠灌胃决明子浸膏后血浆中橙黄决明素药时曲线存在双峰现象。

决明子中橙黄决明素的提取分离纯化及在正常大鼠体内的药代动力学参数研究

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