学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

甜樱桃花发育相关MADS-box基因的克隆与分析

作　者: 林苗苗
导　师: 方金豹
学　校: 中国农业科学院
专　业: 果树学
关键词: 甜樱桃花发育 MADS-box 克隆实时荧光定量
分类号: S662.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 97次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

甜樱桃因其成熟期早、果个大、色泽艳丽、营养丰富、较耐贮运等优点深受人们喜爱,是目前国际和国内市场价格最高、效益最好的果树之一。然而在栽培过程中,常因种植地春温、花芽分化期温度过高而产生诸如花而不实、畸形果、产量低等现象。MADS-box基因家族在控制花器官、果实发育中发挥着重要作用,而花器官发育的好坏,决定了授粉受精以及果实的正常发育。为了解决甜樱桃生产中存在的问题,本试验拟从控制花器官和果实发育的基因出发,探讨甜樱桃结实率低、畸形果形成的分子机理,从而为克服这些制约甜樱桃产业发展的不良因素提供理论依据。本项研究以甜樱桃‘拉宾斯’(Prunus avium L.‘Lapins’)为试材,采用RT-PCR结合RACE技术克隆基因全长,应用实时荧光定量技术研究这些基因的表达情况,获得主要实验结果如下:1.对模式植物MADS-box基因和甜樱桃所在的李属MADS-box基因进行同源性比较,在保守区域设计引物,通过RACE技术获得基因全长,共得到4个MADS-box同源基因,分别命名为PaMADS2、PaMADS3、PaMADS4、PaMADS5。它们分别属于B(PaMADS2)、C(PaMADS5)、E(PaMADS3、PaMADS4)类MADS-box同源基因。2.组织特异性分析表明,PaMADS2仅在花瓣和雄蕊中表达,这与B类基因的表达模式一致。系统进化分析表明,PaMADS2和B类PI基因的亲缘关系最近,故将其归为B类。3.系统进化分析表明2个E(SEPALLATA)类基因PaMADS3和PaMADS4属于E类基因两个不同的亚分支,RT-PCR分析表明PaMADS3在花瓣、雄蕊、雌蕊中表达,而PaMADS4在花器官的四轮中均有表达。4.在春季花芽膨大期至开花后的不同温度(15℃/25℃)试验中,检测到PaMADS3在雌蕊中的表达量差异,在25℃时,PaMADS3的表达明显大于在15℃时的表达量。推断PaMADS3的表达状况可能受温度的影响。5.分离出控制花雄蕊和雌蕊发育的C类基因PaMADS5,该基因在花器官的雄蕊和雌蕊中表达。在系统进化分析中,PaMADS5和C类基因的AGAMOUS亲缘关系最近,故属于euAG亚家族,是一个典型的C类基因。6.在花芽开绽期应用10 mg/L、50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L四个不同浓度赤霉素喷施花芽,通过实时荧光定量检测,发现开花当天四个浓度GA3处理C类PaMADS5的表达量都比对照的高,但处理间的差异不明显;而在花后2天,高浓度200 mg/L处理的PaMADS5表达量明显高于对照的,但10 mg/L、50 mg/L、100 mg/L处理的表达量却比对照的低。推断高浓度的赤霉素可能通过影响MADS-box基因的表达,进而影响胚囊的活力。

甜樱桃花发育相关MADS-box基因的克隆与分析

内容摘要

全文目录

相似论文