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六味地黄丸及其4入血成分配伍对大鼠前脂肪细胞增殖、分化作用的研究

作　者: 赵婧
导　师: 肖子曾
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 方剂学
关键词: 六味地黄九前脂肪细胞马钱苷莫诺苷芍药苷丹皮酚含药血清含药血浆
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的研究六味地黄丸及其4入血成分配伍对大鼠前脂肪细胞增殖、分化作用的影响。通过六味地黄丸含药血清及含药血浆对大鼠前脂肪细胞增殖分化各个时间点的影响,比较六味地黄丸含药血浆与含药血清于各时间点药效实验结果的差异。方法原代培养大鼠前脂肪细胞,将马钱苷等四种入血主要成分通过四因素三水平的正交试验表L9(34)安排实验次数,及各个时间点含药血清血浆分别培养前脂肪细胞。以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖速度；以油红O染色法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中的细胞内脂肪积聚的影响。结果一、六味地黄丸4入血成分组合对大鼠前脂肪细胞增殖有促进作用、分化有抑制作用,影响因数顺序均为D>C>A>B,最终的优选方案为A1B3C1D1,即马钱苷高浓度(8.5μg/ml)芍药苷低浓度(1 .25μg/ml)莫诺苷高浓度(8.0μg/ml)丹皮酚高浓度(9.0μg/ml)二、六味地黄丸含药血清及含药血浆对大鼠前脂肪细胞的增殖均有促进作用,60min时间点采血的含药血清及含药血浆对大鼠前脂肪细胞的增殖作用最明显。经统计学分析,含药血清、含药血浆两种给药方式比较,差异无统计学意义(P>0.05)。空白组与-5,10,15,30,45,60,120,180,240,360min组比较差异有显著性意义(P<0.05),60min组与空白组,0,5,10,15,30,45,60,120,180,240,360,450min各组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。提示六味地黄丸能促进大鼠前脂肪细胞的增殖,在六味地黄丸的研究中,含药血清与含药血浆无差别,大鼠灌胃后60min的含药血清(血浆)对大鼠前脂肪细胞的增殖作用最为明显。六味地黄丸含药血清对大鼠前脂肪细胞的分化有抑制作用,60min时间点采血的含药血清作用最明显。结论一、六味地黄丸中马钱苷、莫诺苷、芍药苷、丹皮酚4主要入血成分配伍组合中,其中马钱苷、莫诺苷、丹皮酚为主要因素,而芍药苷为次要因素。马钱苷、莫诺苷、芍药苷、丹皮酚最优配伍组合表现出协同和增效的整体调节作用,但作用劣于六味地黄丸。二、在采血时间点不同的含药血清(血浆)对大鼠前脂肪细胞的影响中,给药60min的大鼠含药血清(血浆)对大鼠前脂肪细胞增殖或者分化的影响最为显著,此结论对六味地黄丸临床应用有一定指导价值。三、在六味地黄丸的体外实验前脂肪细胞研究中,血清药理学与血浆药理学的差别不大。

全文目录

目录  3-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
引言  10-14
第一部分大鼠前脂肪细胞的培养  14-23
  1.1 实验材料  14-15
    1.1.1 主要仪器  14
    1.1.2 药品及试剂  14-15
    1.1.3 实验动物  15
  1.2 实验方法  15-17
    1.2.1 各试剂的制备  15-16
    1.2.2 大鼠前脂肪细胞的培养  16-17
    1.2.3 大鼠前脂肪细胞生长曲线  17
    1.2.4 油红0染色提取法测定脂肪细胞内脂肪含量  17
  1.3 结果  17-21
    1.3.1 大鼠前脂肪细胞的原代及传代培养  17-20
    1.3.2 大鼠前脂肪细胞生长曲线  20
    1.3.3 油红0染色提取法测定脂肪细胞内脂肪含量  20-21
  1.4 讨论  21-23
第二部分六味地黄丸含药血清及血浆对大鼠前脂肪细胞增殖分化的影响及采血最佳时间点研究  23-34
  2.1 实验仪器与材料  23-25
    2.1.1 仪器  23-24
    2.1.2 药品及试剂  24
    2.1.3 实验动物  24
    2.1.4 供试品溶液的制备  24
    2.1.5 六味地黄丸含药血清、血浆的制备  24-25
  2.2 实验方法  25-27
    2.2.1 各试剂的制备  25
    2.2.2 分组与给药  25-26
    2.2.3 各时间点含药血清对大鼠前脂肪细胞增殖的影响的测定  26
    2.2.4 各时间点含药血浆对大鼠前脂肪细胞增殖的影响的测定  26
    2.2.5 各时间点含药血清对大鼠前脂肪细胞分化的影响的测定  26
    2.2.6 统计学方法与数据处理  26-27
  2.3 结果  27-31
    2.3.1 六味地黄丸各采血时间点含药血清及含药血浆对大鼠前脂肪细胞增殖的影响  27-30
    2.3.2 六味地黄丸各采血时间点含药血清对大鼠前脂肪细胞分化的影响  30-31
  2.4 讨论  31-34
第三部分六味地黄丸马钱苷等4入血成分组合对大鼠前脂肪细胞增殖、分化的最佳浓度配伍研究  34-49
  3.1 实验仪器与材料  35-36
    3.1.1 主要仪器  35
    3.1.2 药品及试剂  35-36
  3.2 实验方法  36-39
    3.2.1 供试品溶液的制备  36
    3.2.2 分组与给药  36-38
    3.2.3 六味地黄丸4入血成分组合对大鼠前脂肪细胞增殖的影响的测定及最佳配伍的优选  38
    3.2.4 六味地黄丸4入血成分组合对大鼠前脂肪细胞分化的影响的测定及最佳配伍的优选  38
    3.2.5 六味地黄丸4入血成分最佳配伍组合及各个单体组分对大鼠前脂肪细胞增殖的影响  38-39
    3.2.6 六味地黄丸4入血成分最佳配伍组合及各个单体组分对大鼠前脂肪细胞分化的影响  39
    3.2.7 统计学方法与数据处理  39
  3.3 结果  39-43
    3.3.1 正交优选4入血成分对大鼠前脂肪细胞增殖影响的最佳浓度配伍  39-40
    3.3.2 正交优选4入血成分对大鼠前脂肪细胞分化影响的最佳浓度配伍  40-41
    3.3.3 六味地黄丸的4种入血成分最佳配伍组合与各个单体组分对大鼠前脂肪细胞增殖的影响  41-42
    3.3.4 六味地黄丸的4种入血成分最佳配伍组合与各个单体组分对大鼠前脂肪细胞分化的影响  42-43
  3.4 讨论  43-49
结论  49-50
参考文献  50-53
致谢  53-54
附录  54-70
  附录一:综述  54-70
    参考文献  65-70
  附录二:攻读硕士学位期间发表论文,著作,参加课题及获奖情况  70

六味地黄丸及其4入血成分配伍对大鼠前脂肪细胞增殖、分化作用的研究

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