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胰岛素样生长因子-1对rhBMP-2诱导下成纤维细胞增殖及成骨转化的影响

作　者: 管涛
导　师: 王东
学　校: 山西医科大学
专　业: 骨科学
关键词: 成纤维细胞胰岛素生长因子-1 重组人骨形成蛋白-2 成骨转化细胞增殖
分类号: R683
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：观察胰岛素样生长因子-1(IGF-Ⅰ)在重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)诱导成纤维细胞(Fb)转化为成骨细胞中的影响,探讨IGF-Ⅰ对Fb在体外诱导成骨的过程中是否具有促进作用。方法：Fb来源于成年新西兰大白兔(由山西医科大学实验动物中心提供)。分离、纯化提取成纤维细胞,然后培养。将细胞分为：空白对照组、rhBMP-2干预组和IGF-Ⅰ+rhBMP-2干预组。空白对照组：常规培养液培养,不加入任何诱导剂及干预因子；rhBMP-2干预组：常规培养液中加入100ng/ml的rhBMP-2;IGF-Ⅰ+rhBMP-2干预组：常规培养液中加入100ng/ml的rhBMP-2与终浓度为50ng/ml的IGF-Ⅰ。定期在倒置显微镜下观察Fb生长状况,并采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,同时行碱性磷酸酶(ALP)活性检测、茜素红染色及钙钴染色评价其成骨分化的能力。结果：1.与其它两组相比,IGF-Ⅰ+rhBMP-2组细胞增殖速度快,周期短,MTT法检测,细胞生长旺盛(P<0.05),而空白对照组与rhBMP-2干预组之间无统计学差异(P>0.05)。2.rhBMP-2干预组ALP表达高于空白对照组(P<0.01)；而IGF-Ⅰ+rhBMP-2组ALP表达明显高于其它2组,差异有统计学意义(P<0.01)。3.茜素红染色空白对照组未见明显钙化结节,rhBMP-2干预组细胞可见红色钙化结节,而IGF-Ⅰ+rhBMP-2组钙化结节数目明显较成骨诱导对照组多,面积增大。4.钙钴染色：rhBMP-2干预组和IGF-Ⅰ+rhBMP-2干预组细胞胞浆中均可见浅棕色至棕黑色的细胞颗粒。但以IGF-Ⅰ+rhBMP-2干预组棕黑色颗粒较多。空白对照组未见明显阳性细胞。结论：1.Fb在体外一定条件下经过诱导剂诱导后,可向成骨细胞方向转化。2.IGF-Ⅰ可以促进Fb在rhBMP-2诱导下的增殖。3.IGF-Ⅰ可以促进Fb在rhBMP-2诱导下成骨表型表达。

全文目录

英文缩略词表  5-6
摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-12
材料和方法  12-18
实验结果、讨论与结论  18-22
附图  22-26
参考文献  26-29
综述  29-35
  参考文献  33-35
个人简介  35-36
致谢  36

胰岛素样生长因子-1对rhBMP-2诱导下成纤维细胞增殖及成骨转化的影响

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