学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

利用家系相关性分析方法探讨原发性胆汁性肝硬化的基因易感性

作　者: 乔丽娟
导　师: 樊代明；周新民；韩英
学　校: 第四军医大学
专　业: 内科学
关键词: 原发性胆汁性肝硬化单核甘酸多态性 Th1分化 IL-12
分类号: R575.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 24次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

背景原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)是一种自身免疫性肝脏疾病,主要是由免疫紊乱介导,引起慢性进行性非化脓性胆管炎,以肝内小胆管损伤和汇管区淋巴细胞浸润为主要特征,进而发生肝内胆汁淤积,最终导致肝纤维化和肝硬化。随着人们对PBC的认识和诊疗水平的提高及自身抗体检测技术的广泛应用,PBC发病率呈逐年增高的趋势。然而大多数病人在早期无症状,发现时已属肝硬化的晚期,因此早期诊断早期治疗对PBC患者具有非常重要的意义。但是PBC的发病机制尚不明确,近年来流行病学调查研究显示PBC发病呈明显的家族聚集现象。不同国家流行病学研究显示PBC一级亲属的PBC患病率在1.0%-7.1%之间,而正常群体PBC患病率仅为0.001%-0.2%,一级亲属PBC的患病率明显高于正常人群的PBC患病率[1];PBC在同卵双胞胎中的共患病率高达63%;PBC患者一级亲属其中有61%发现有免疫异常,有14%合并有其他自身免疫性疾病[2]。这三方面的资料说明PBC发病具有明显的家族聚集现象,提示基因易感性与PBC的发病密切相关。目前主要认为其发病机制是基因易感性与环境因素相互作用的结果。同时,PBC发病机制与免疫调节紊乱密切相关,尤其与T细胞阳性选择及Th1细胞增殖、分化异常甚为密切,其信号通路包括IL-12信号通路、Th1分化信号通路等。其中参与T细胞增殖、阳性选择的分子包括CTLA-4、PTPN22以及MHC类分子。参与Th1细胞分化的分子包括IL-12、STAT4、IRF5、INF-γ及Tyk2。目的利用家系相关性分析方法探讨原发性胆汁性肝硬化的基因易感性。主要针对免疫调节相关基因即与Th1细胞分化信号通路密切相关的单核甘酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)位点进行研究,寻找与PBC发病密切相关的基因,为研究PBC的发病机制提供理论基础。方法收集PBC家系(包括PBC患者及其一级亲属)血液样本,部分用于收集血清,部分用于DNA提取,储存并建立血清库及DNA库。用间接免疫荧光法、免疫印迹法对这些样本的血清库进行自身抗体的检测。利用芯片SNP的方法对DNA库基因SNP位点易感性进行检测。结果共收集80个家系的血液样本300份,结合临床诊断及实验室检测,共确诊94例PBC患者与206例正常的一级亲属。本实验研究发现,80个PBC家系中,10个家系的一级亲属中诊断有PBC患者,得出PBC家系患病率为12.5%,明显高于正常群体PBC患病率。在所有一级亲属中,发现14例在本实验研究中自身抗体检测异常,均为抗核抗体(antinuclear antibody, ANA)阳性,且间接免疫荧光结果表现为抗线粒体抗体(antimitochondrial antibody, AMA)阳性,并且免疫印迹法测定ANA谱为抗线粒体抗体M2型(antimitochondrial antibody M2, AMA-M2)阳性在+～++++。初步筛查认为此14例一级亲属为可疑PBC患者,结合进一步临床诊断,最终均确诊为PBC患者。利用家系相关性分析方法,对IL-12RB2基因上三个SNP位点(rs3790567, rs3790565, rs6679356)和STAT4基因上三个SNP位点(rs6748358, rs16833239, rs7574865)进行分析。得出位于IL-12RB2上的rs3790567位点和位于STAT4上的rs6748358位点与PBC密切相关。结论本实验获得我国人群中PBC家系患病率约为12.5%,充分说明了PBC具有明显的家族聚集性。IL-12RB2基因上的rs3790567位点A等位基因和位于STAT4基因上的rs6748358位点T等位基因,在病人与其一级亲属之间有显著差异,这两个位点可能与PBC易感性密切相关。PBC发病可能与Th1分化信号通路高度相关。

全文目录

缩略语表  5-7
中文摘要  7-10
英文摘要  10-14
前言  14-15
文献回顾  15-31
正文  31-48
  实验一纳入研究对象的PBC 患者诊断及其一级亲属的筛选  31-39
    1 材料  31-32
    2 方法  32-34
    3 结果  34-38
    4 讨论  38-39
  实验二样本DNA 库的建立及SNP 的检测  39-48
    1 材料  39-40
    2 方法  40-42
    3 结果  42-46
    4 讨论  46-48
小结  48-49
参考文献  49-59
个人简历和研究成果  59-60
致谢  60-61

利用家系相关性分析方法探讨原发性胆汁性肝硬化的基因易感性

内容摘要

全文目录

相似论文