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鸭传染性浆膜炎油乳剂灭活疫苗与不同佐剂二联灭活疫苗的免疫原性比较研究

作　者: 马逊
导　师: 程安春；汪铭书
学　校: 四川农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 鸭疫里默氏杆菌 大肠杆菌 二联苗 免疫原性
分类号: S858.32
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 80次
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内容摘要


本研究选取我国养鸭生产中广泛流行的血清1型鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer, RA)和O78型大肠杆菌(Escherichia Coli, E.coli)为菌种研制了RA油佐剂灭活苗、RA-E.coli二联油佐剂灭活苗和RA-E.coli二联蜂胶佐剂灭活苗,并对这3种疫苗进行了临床试验比较研究,获得如下结果：1.疫苗安全性：3种疫苗分别以0.5ml/只、1ml/只、2ml/只和3ml/只的剂量免疫试验鸭。结果表明,RA油佐剂灭活苗和RA-E.coli二联油佐剂灭活苗免疫组在6倍于正常免疫剂量(0.5ml/只)免疫时,少数试验鸭出现5-8 h的精神稍差,之后迅速恢复,其他组均无异常反应,健康生长。剖杀检查,注射RA油佐剂灭活苗和RA-E.coli二联油佐剂灭活苗的试验组在注射部位有小的炎性结节,但该结节随着雏鸭的生长逐渐变小、消失。因此,所研制的3种疫苗均具有良好的安全性。2.疫苗最佳免疫剂量：分别以0.25ml/只、0.50ml/只、1.00ml/只和2.00ml/只免疫试验鸭,然后分别以109CFU/mL 1型RA强毒株和2.00×108CFU/mL O78型E.coli强毒株进行攻毒保护试验。结果表明,免疫剂量为0.25ml/只时即能获得良好保护效果,而当免疫剂量为0.5ml/只时可获得100%保护。因此,所研制疫苗的最佳免疫剂量为0.5ml/只。3.疫苗免疫效力：3种疫苗经过无菌及安全检查合格后,对8日龄樱桃谷鸭颈背部皮下注射0.5ml/只。于免疫后7d、14d、21d进行攻毒保护试验,1型RA的攻毒菌量为5.20×109CFU,O78型E.coli的攻毒菌量为1.00×109CFU。结果表明,对同源RA的攻击,RA油佐剂灭活苗表现出50%、80%和100%免疫保护;RA-E.coli二联油佐剂灭活苗表现出50%、70%和100%免疫保护；RA-E.coli二联蜂胶佐剂灭活苗表现出60%、80%和100%免疫保护。对同源E.coli的攻击,RA-E.coli二联油佐剂灭活苗表现出60%、80%和100%免疫保护；RA-E.coli二联蜂胶佐剂灭活苗表现出70%、100%和100%免疫保护。所研制的3种疫苗中,RA-E.coli二联蜂胶佐剂灭活苗具有保护力产生速度快,对同源菌攻毒的免疫保护率高的特点,特别适合商品肉鸭的免疫接种。RA油佐剂灭活苗和RA-E.coli二联油佐剂灭活苗,免疫保护力产生速度较慢,对同源菌攻毒的免疫保护率,相对蜂胶苗低。4.抗体消长规律：3种疫苗经过无菌及安全检查合格后,对8日龄樱桃谷鸭颈背部皮下注射0.5ml/只。于免疫后7d、14d、21d、35d、49d、63d、77d、91d测定血清凝集抗体效价。结果表明,所研制的3种疫苗中,RA-E.coli二联蜂胶佐剂灭活苗抗体产生速度最快,于免疫后21d最先达到高峰；RA油佐剂灭活苗和RA-E.coli二联油佐剂灭活苗于免疫后35d达到抗体水平高峰,时间比蜂胶苗要晚7d。至免疫后91d仍能检测出抗体存在。抗体水平达到高峰后,随即开始逐渐下降,此后油佐剂苗的抗体水平要高于蜂胶苗,特别适合种鸭免疫接种,以为下一代雏鸭提供长时间较高水平的母源抗体。3种疫苗均能长时间维持较高的抗体水平。这3种疫苗按免疫原性优良等级的顺序依次为RA-E.coli二联蜂胶佐剂灭活苗、RA油佐剂灭活苗、RA-E.coli二联油佐剂灭活苗。

全文目录


中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
缩略词表  9-10
目录  10-12
第一章 鸭传染性浆膜炎的研究概况  12-17
  1 RA血清型的研究  12-13
  2 RA分子生物学的研究  13-15
  3 RA检测方法的研究  15-16
  4 鸭传染性浆膜炎疫苗的研究  16
  5 展望  16-17
第二章 禽大肠杆菌病的研究概况  17-21
  1 E.coli血清型的研究  17
  2 E.coli外膜蛋白的研究  17-18
  3 禽大肠杆菌病疫苗的研究  18-20
  4 展望  20-21
第三章 疫苗安全性研究与最佳免疫剂量筛选  21-29
  1 材料  21-22
    1.1 菌种  21
    1.2 供试疫苗及试剂  21
    1.3 主要试剂  21-22
    1.4 试验动物  22
    1.5 主要仪器设备及试验器材  22
  2 方法  22-25
    2.1 疫苗制备  22-24
    2.2 培养基的配制  24
    2.3 攻毒用抗原的制备  24-25
    2.4 动物试验  25
  3 结果  25-26
    3.1 疫苗安全性试验  25-26
    3.2 疫苗最佳免疫剂量筛选  26
  4 讨论  26-29
    4.1 疫苗安全性  26-27
    4.2 疫苗最佳免疫剂量  27-29
第四章 疫苗免疫效力检测  29-37
  1 材料  29-30
    1.1 供试疫苗  29
    1.2 主要试剂  29
    1.3 攻毒用菌株  29
    1.4 试验动物  29
    1.5 主要仪器设备  29-30
  2 方法  30-32
    2.1 培养基的配制  30
    2.2 攻毒用菌种的制备  30-31
    2.3 攻毒菌量测定  31
    2.4 攻毒保护试验  31
    2.5 细菌再分离  31-32
  3 结果  32-34
    3.1 攻毒菌量测定结果  32
    3.2 攻毒保护结果  32
    3.3 死亡鸭的临床症状及剖检结果  32-33
    3.4 细菌再分离结果  33-34
  4 讨论  34-37
第五章 抗体消长规律检测  37-52
  1 材料  37-38
    1.1 供试疫苗  37
    1.2 主要试剂  37
    1.3 攻毒用菌株  37
    1.4 试验动物  37-38
    1.5 主要仪器设备及器材  38
  2 方法  38-42
    2.1 培养基的配制  38-39
    2.2 凝集抗原的制备  39
    2.3 兔抗RA阳性血清的制备  39-40
    2.4 抗体消长规律检测  40-42
  3 结果  42-49
    3.1 血清RA凝集抗体效价  42-45
    3.2 血清E.coli凝集抗体效价  45-49
  4 讨论  49-52
结论  52-53
参考文献  53-60
致谢  60-61
附图  61-64

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 家禽 > 鸭
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