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抗仔猪大肠杆菌病高免卵黄抗体粉的研制

作　者: 刘海生
导　师: 杨增岐
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 仔猪 大肠杆菌 卵黄抗体 动物试验
分类号: S858.28
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


仔猪大肠杆菌病是目前危害我国养猪业的主要传染病之一,它是由产肠毒素大肠杆菌(ETEC)引起的一种急性传染病,以急性腹泻和败血症为特征,在临床上可表现为白痢、黄痢和猪水肿病。本试验采取陕西西安、咸阳、渭南、宝鸡、榆林、汉中等地区规模化养猪厂中发生大肠杆菌病仔猪的新鲜粪便、小肠内容物、肠道等病料,通过分离纯化和生化鉴定为大肠杆菌,再进行O抗原的鉴定。试验共分离菌株294株,定型257株,血清型共计35种,其中O8、O9、O20、O45、O101、O138、O139、O141、O147、O149等10种血清型共有185株,占分离株的72%,为分离猪场中的主要流行血清型。选取试验中分离得到大肠杆菌,增菌培养,制成大肠杆菌油佐剂灭活疫苗免疫非免大肠杆菌疫苗的健康蛋鸡,用微量凝集试验检测蛋鸡血清和鸡蛋中K88、K99、987P、F41抗体水平,检测抗体变化规律并检测血清抗体和卵黄抗体二者之间的关系与变化趋势。当血清抗体水平达8log2以上时收取鸡蛋,分离卵黄,用喷雾干燥机在140℃进气72℃出气,喷雾干燥成粉。然后检测加工前后卵黄抗体水平的变化,将制备的卵黄抗体粉分低温(4℃)和室温(25℃)保存,检测保存条件对卵黄抗体效价的影响。试验结果表明:K88、K99、987P、F41蛋鸡血清和鸡蛋中卵黄抗体均在免疫之后7d开始出现,并在35d到达高峰,血清抗体和卵黄抗体二者之间的变化规律和变化趋势基本相同。卵黄抗体加工前后效价变化不大,卵黄抗体粉在4℃和25℃条件下密封保存6个月,卵黄抗体效价无明显变化,均适合卵黄抗体粉的保存。选择未经过大肠杆菌疫苗免疫母猪的新生健康仔猪50头分5组,其中四组按1g/头、2g/头、3g/头、4g/头每天饲喂,一组为对照组,进行预防试验。选择未经过大肠杆菌疫苗免疫母猪的新生健康仔猪10头分两组,利用高免卵黄抗体粉进行攻毒治疗试验。试验结果表明,2g/头以上剂量饲喂制备的高免卵黄抗体粉能有效预防仔猪大肠杆菌病,高免卵黄抗体粉对人工感染病例治愈率为90%。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
文献综述  10-23
  第一章 仔猪大肠杆菌病的研究进展  10-17
    1.1 病原学  10-13
      1.1.1 形态结构及染色特性  10
      1.1.2 培养特性  10
      1.1.3 生化特性  10
      1.1.4 抗原结构及血清学特性  10-11
      1.1.5 致病性和毒力因子  11
      1.1.6 ETEC 致病机制  11-12
      1.1.7 微生物学诊断  12-13
    1.2 仔猪大肠杆菌病  13-17
      1.2.1 仔猪大肠杆菌病临床症状  13-14
      1.2.2 传播途径和流行特点  14
      1.2.3 引起本病的主要病因  14-15
      1.2.4 大肠杆菌病的防治  15-17
  第二章 卵黄抗体的研究进展  17-23
    2.1 分子结构  17
    2.2 理化特性  17-18
    2.3 卵黄免疫球蛋白(IGY)的提取纯化  18-20
      2.3.1 IgY 的粗提方法  18-19
      2.3.2 IgY 的纯化  19-20
    2.4 卵黄抗体的应用  20-21
      2.4.1 IgY 在食品中的应用  20
      2.4.2 IgY 在医学上的应用  20-21
    2.5 抗仔猪大肠杆菌IGY 的研究  21-22
    2.6 前景展望  22-23
试验研究  23-38
  第三章 仔猪大肠杆菌病病原的分离与鉴定  23-28
    3.1 实验材料  23-25
      3.1.1 病料来源  23
      3.1.2 主要培养基及其配制  23
      3.1.3 主要药品与试剂  23
      3.1.4 主要培养基的配制  23-25
      3.1.5 主要实验器材  25
    3.2 实验方法  25-26
      3.2.1 病原菌的分离  25
      3.2.2 革兰氏染色镜检  25
      3.2.3 生理生化鉴定  25
      3.2.4 血清型鉴定  25-26
      3.2.5 分离菌株的菌种保存  26
    3.3 结果与分析  26
      3.3.1 细菌形态与培养特性  26
      3.3.2 细菌分离结果  26
      3.3.3 血清型的鉴定  26
    3.4 讨论  26-27
    3.5 小结  27-28
  第四章 高免卵黄粉的研制  28-36
    4.1 实验材料  28
      4.1.1 菌种  28
      4.1.2 血清  28
      4.1.3 主要试剂和培养基  28
    4.2 方法  28-30
      4.2.1 大肠杆菌油佐剂灭活疫苗的制备  28-29
      4.2.2 蛋鸡的免疫  29
      4.2.3 抗体水平的检测  29-30
      4.2.4 高免卵黄抗体粉的加工  30
      4.2.5 加工前后卵黄抗体效价测定  30
      4.2.6 保存温度和时间对卵黄抗体粉抗体效价的影响  30
    4.3 结果及讨论  30-34
      4.3.1 大肠杆菌油佐剂灭活疫苗  30
      4.3.2 蛋鸡血清抗体水平检测  30-32
      4.3.3 鸡蛋中卵黄抗体水平检测  32-33
      4.3.4 卵黄抗体与血清抗体的消长规律  33
      4.3.5 加工前后卵黄抗体的对比  33-34
      4.3.6 保存时间和温度对卵黄抗体水平的影响  34
    4.4 讨论  34-36
  第五章 高免卵黄抗体粉对仔猪大肠杆菌病防治效果的观察  36-38
    5.1 材料  36
    5.2 方法  36
    5.3 结果与分析  36-37
    5.4 讨论  37
    5.5 小结  37-38
结论  38-39
参考文献  39-43
致谢  43-44
作者简介  44

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 家畜 > 猪
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