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白花蛇舌草注射剂联合紫杉醇对卵巢癌和宫颈癌细胞生长抑制作用的研究

作　者: 高亚克
导　师: 张国楠
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中医妇科学
关键词: 白花蛇舌草注射液 LY294002 紫杉醇 宫颈癌 卵巢癌 细胞 体外抑制作用
分类号: R737.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的：研究中药白花蛇舌草注射剂联合紫杉醇对人卵巢癌细胞和人宫颈癌细胞生长的抑制作用。方法：白花蛇舌草注射剂联合紫杉醇分别与HeLa人宫颈癌细胞和HO-8910人卵巢癌细胞共培养48hr,以LY294002作为对照,用MTT分析法测定肿瘤细胞存活率,绘制药物浓度-存活曲线；取曲线中呈对数变化的药物浓度区间,以浓度和存活率(平均值±SD)对应的两个变量,求出对数回归方程,并计算出IC50。以IC50tax.comb对IC50tax.alone的比值,测定联合药物指数(Combination Index, CI),以此评价白花蛇舌草注射液对紫杉醇的增敏作用；CI≥1,表示无增敏作用,CI<1,表示有协同作用。同一种药物对不同细胞株的IC50差异采用单因素方差分析和t检验。结果：白花蛇舌草注射剂(以总黄酮mg／ml计)、LY294002和紫杉醇分别对HeLa和HO-8910细胞生长均有明显的抑制作用,随药物浓度的增加,其存活率随之降低,且呈药物浓度依赖关系,其IC50S OD.alone分别为1094.48±103.09μg/ml、388.15±6.30μg／ml；IC50S LY.alone分别为49.09±1.72μg／ml、24.58±3.09μg／ml；IC50STax.alone分别为>100μmol／L和43.16±4.911μmol／L；白花蛇舌草注射剂(IC10)、LY294002(IC10)联合紫杉醇分别作用HeLa和HO-8910细胞,其IC50STax/OD.comb分别为>100μmol／L和27.89±2.60μmol／L；IC50STax/LY.comb分别为71.11±7.73μmol／L和31.79±5.16μmol／L；CITax/OD.comb/Tax.alone分别为≈1、0.51和CITax/LY.comb/Tax.alone分别为<0.71和0.74。结果显示,白花蛇舌草注射剂对HO-8910细胞的抑制作用略强于对HeLa细胞(P<0.05)；LY294002对HO-8910细胞的抑制作用略强于对HeLa细胞(P<0.05)；而紫杉醇对HO-8910细胞的抑制作用显著强于对HeLa细胞(P<0.01),说明HeLa细胞对紫杉醇极不敏感或耐受；LY294002使紫杉醇对HeLa细胞与HO-8910细胞的敏感性增加了>40.85%与35.77%,白花蛇舌草注射剂并未增加紫杉醇对HeLa细胞的敏感性,但白花蛇舌草注射剂使紫杉醇对HO-8910细胞的敏感性增加了54.75%,说明白花蛇舌草注射剂联合紫杉醇对卵巢癌较宫颈癌细胞的细胞毒作用更高。结论：白花蛇舌草注射剂显著增加了紫杉醇对HO-8910细胞诱导的细胞毒作用,未增加紫杉醇对HeLa细胞诱导的细胞毒作用；紫杉醇联合白花蛇舌草注射剂获得的协同效应,与白花蛇舌草注射剂可增强紫杉醇的细胞毒效应相关；白花蛇舌草注射剂和紫杉醇的细胞毒作用存在明显差异,提示二者联合应用作用于卵巢癌可能会更适宜于临床。

全文目录


中文摘要  3-5
Abstract  5-11
1.引言  11-14
2.正文  14-38
  2.1 材料与方法  14-20
    2.1.1.材料  14-16
      2.1.1.1 细胞系  14
      2.1.1.2 药物来源  14
      2.1.1.3 主要试剂  14-15
      2.1.1.4 主要器材与仪器  15
        2.1.1.4.1 主要仪器  15
        2.1.1.4.2 其它器材  15
      2.1.1.5 主要溶液配制  15-16
    2.1.2.实验流程及方法  16-20
      2.1.2.1 实验流程图  16
      2.1.2.2 细胞培养方法  16-17
        2.1.2.2.1 HeLa人宫颈癌细胞的培养  16-17
        2.1.2.2.2 HO-8910人卵巢癌细胞的培养  17
      2.1.2.3 MTT比色法测定药物对肿瘤细胞的增殖抑制作用  17-19
        2.1.2.3.1 白花蛇舌草注射液对HeLa人宫颈癌细胞与HO-8910人卵巢癌细胞的增殖抑制作用  17
        2.1.2.3.2 紫杉醇对HeLa人宫颈癌细胞与HO-8910人卵巢癌细胞的增殖抑制作用 #7■  17-18
        2.1.2.3.3 LY294002对HeLa人宫颈癌细胞与HO-8910人卵巢癌细胞的增殖抑制作用  18
        2.1.2.3.4 白花蛇舌草注射液联合紫杉醇对HeLa人宫颈癌细胞与HO-8910人卵巢癌细胞的增殖抑制作用  18-19
        2.1.2.3.5 LY294002联合紫杉醇对Hela人宫颈癌细胞与HO-8910人卵巢癌细胞的增殖抑制作用  19
      2.1.2.4 统计学分析  19-20
  2.2 结果  20-34
    2.2.1 不同药物对肿瘤细胞的生长抑制作用  20-34
      2.2.1.1 各实验组IC_(50)数值  20
      2.2.1.2 白花蛇舌草注射液对肿瘤细胞的生长抑制作用  20-22
        2.2.1.2.1 白花蛇舌草注射液对HeLa人宫颈癌细胞的生长抑制作用  20-21
        2.2.1.2.2 白花蛇舌草注射液对HO-8910人卵巢癌细胞的生长抑制作用  21-22
      2.2.1.3 LY294002对肿瘤细胞的生长抑制作用  22-23
        2.2.1.3.1 LY294002对HeLa人宫颈癌细胞的生长抑制作用  22-23
        2.2.1.3.2 LY294002对HO-8910人卵巢癌细胞的生长抑制作用  23
      2.2.1.4 紫杉醇对肿瘤细胞的生长抑制作用  23-25
        2.2.1.4.1 紫杉醇对HeLa人宫颈癌细胞的生长抑制作用  24
        2.2.1.4.2 紫杉醇对HO-8910人卵巢癌细胞的生长抑制作用  24-25
      2.2.1.5 紫杉醇联合LY284002对肿瘤细胞的生长抑制作用  25-28
        2.2.1.5.1 紫杉醇联合LY294002对HeLa人宫颈癌细胞的生长抑制作用  25-26
        2.2.1.5.2 紫杉醇联合LY284002对HO-8910人卵巢癌细胞的生长抑制作用  26-28
      2.2.1.6 紫杉醇联合白花蛇舌草注射液对肿瘤细胞的生长抑制作用  28-31
        2.2.1.6.1 紫杉醇联合白花蛇舌草注射液对HeLa人宫颈癌细胞株的生长抑制作用  29
        2.2.1.6.2 紫杉醇联合白花蛇舌草注射液对HO-8910人卵巢癌细胞的生长抑制作用  29-31
      2.2.1.7 紫杉醇联合白花蛇舌草注射液与紫杉醇联合LY294002对HO-8910人卵巢癌细胞的增殖抑制作用的比较  31-34
        2.2.1.7.1 紫杉醇联合白花蛇舌草注射液对人卵巢癌HO-8910细胞株的生长抑制作用  32
        2.2.1.7.2 紫杉醇联合LY294002对HO-8910人卵巢癌细胞的生长抑制作用  32-34
  2.3 结论  34-35
  2.4 讨论  35-37
  2.5 问题与展望  37-38
致谢  38-39
参考文献  39-41
附:中药白花蛇舌草抗肿瘤作用的研究进展  41-57
在读期间公开发表的学术论文  57

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤
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